|
|
Soluble endoglin: effect on bile acids and cholesterol transport in livers
Grešková, Mária ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Mária Grešková Solubilný endoglin: vplyv na transport žlčových kyselín a cholesterolu v pečeni Cieľ práce: Zvýšené plazmatické hladiny solubilného endoglínu (sEng) boli zistené u prejavmi akútneho srdečného zlyhania, hypertenziou, diabetom mellitom typu 2, a ďalších metabolických a kardiovaskulárnych ochorení ako napr. eróza a cystická fibróza, ktoré ovplyvňujú i pečene. Vzhľadom k tomu, že nie sú dostupné dáta s cholesterolu a žlčových kyselín, bolo zámerom tejto diplomovej práce popísanie tohoto žité šesť mesiacov staré samice s na CBAxC57BL/6J podklade a kontrolné myši (n = 8, v každej skupine), kŕmené tri mesiace štandardnou diétou. Pre zistenie toku žlče bola uskutočnená štúdia. a žlčových kyselín bola stanovená metodou qRT toku žlči ani ku zmenám v pečeni. Analýzou mRNA expresie transportných proteínov žiadna zmena medzi experimentálnou a Bola pozorovaná znížená mRNA expresia Výsledky diplomovej práce ukázali, že vysoká plazmatická hladina sEng znížila , tzv. "rate limiting" enzýmu v syntéze žlčových kyselín Vzhľadom k tomu, že neboli pozorované funkčné zmeny pečene je možné predpokladať, že sEng nebude ovplyvňovať metabolizmus cholesterolu a žlčových kyselín v
|
|
|
Histologická analýza vybraných markerů u kardiometabolických onemocnění 2
Zemánková, Lucie ; Vitverová, Barbora (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Nealkoholové ztučnění jater (NAFLD) je chronické onemocnění jaterní tkáně. Pokročilejší stádia NAFLD jsou charakterizována rozvojem fibrózy. Fibrotický proces se vyskytuje ve stádiu nealkoholové steatohepatitidy a bývá doprovázen zánětem. Cílem této studie bylo analyzovat expresi markerů fibrózy (α-SMA, galektinu-3 a kolagenu). V rámci designu studie byly myši rozděleny do dvou skupin, a to kontrolní skupinu, která byla krmena standardní laboratorní dietou (chow diet) a experimentální skupinu krmenou CDAA dietou. CDAA dieta vede k rozvoji fibrózy prostřednictvím inhibice oxidace mastných kyselin v hepatocytech, zvýšením syntézy lipidů a rozvojem oxidačního stresu a zánětu. Myši byly krmeny po dobu 4 týdnů. Exprese vybraných markerů fibrózy byla detekována a hodnocena pomocí nepřímé imunohistochemie metodou ABC. Výsledky této bakalářské práce ukazují, že pozitivita α-SMA markeru byla u experimentálního modelu silnější a byla zjištěna i v aktivovaných jaterních hvězdicových buňkách a myofibroblastech v játrech. Barvení galektinem-3 bylo také u experimentální skupiny výraznější než u kontrolní skupiny. Sirius Red barvení pro detekci kolagenních vláken prokázalo intenzivnější reakci u experimentální skupiny, kde analýza potvrdila přítomnost kolagenu i mimo hladké svalové buňky cév. Všechny tyto aspekty...
|
|
|
Histologická analýza vybraných markerů u kardiometabolických onemocnění 1
Bůtorová, Kateřina ; Vitverová, Barbora (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Nealkoholové ztučnění jater (NAFLD) je stav definovaný akumulací přebytečného tuku v játrech, který není doprovázen nadměrnou konzumací alkoholu. V prvním stadiu dochází k prostému ztučnění jater (steatóze), a to v důsledku nadměrného ukládání tuku v jaterních buňkách. V rámci progrese onemocnění poté dochází k rozvoji zánětlivé reakce a k přechodu do stadia nealkoholové steatohepatitidy. Cílem této studie bylo zhodnotit, zda dochází k rozvoji zánětlivé reakce a endotelové dysfunkce po podávání CDAA diety. Pro objasnění této hypotézy byla vybrána analýza exprese VCAM-1, ICAM-1 a endoglinu. V této studii byl použit myší model samců kmene C57BL/6. Kontrolní skupina byla krmena standardní laboratorní dietou, experimentální skupina dostávala po dobu 4 týdnu CDAA dietu pro indukci NAFLD. Podávání CDAA diety snižuje oxidaci mastných kyselin v hepatocytech, zvyšuje ukládání lipidů, vyvolává oxidační stres a způsobuje steatózu a rozvoj zánětu v jaterní tkáni. Exprese vybraných markerů zánětu a endotelové dysfunkce byla detekována pomocí nepřímé imunohistochemie. Výsledky této studie ukazují na významný rozdíl v expresi VCAM-1 prozánětlivé markeru. Kontrolní skupina vykazovala slabou expresi VCAM-1, kdežto podávání CDAA diety vedlo k signifikantnímu zvýšení exprese, což naznačuje rozvoj zánětlivé reakce....
|
|
|
Morfologická charakteristika rozvoje steatózy v precizních jaterních řezech a možnosti jejího ovlivnění
Přibáňová, Petra ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Laboratorní diagnostika ve zdravotnictví Autor: Petra Přibáňová Vedoucí bakalářské práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Název práce: Morfologická charakteristika rozvoje steatózy v precizních jaterních řezech a možnosti jejího ovlivnění Úvod a cíl práce: Nealkoholová jaterní steatóza je jednou z nejčastějších příčin chronického jaterního onemocnění. Je považována za manifestaci metabolického syndromu spojeného s obezitou, dyslipidémií a diabetem mellitem II. typu. Cílem bakalářské práce bylo popsání anatomie a histologie jater a jaterní steatózy, a dále zhotovení histologických preparátů, jejich následné obarvení za účelem sledování vlivu vybraných látek na rozvoj steatózy v jaterní tkáni. Metody: K přípravě precizních ultratenkých jaterních řezů (PCLS) byla použita myší játra. Vzniklé řezy byly poté inkubovány v různých médiích. Byly zhotoveny parafínové řezy a pod mikroskopem byly pozorovány preparáty obarvené hematoxylin-eozinem nebo olejovou červení. Výsledky a závěr: Při porovnání kontrolních PCLS bez inkubace s řezy inkubovanými 36 hodin v základním Williamsově médiu jsme zjistili, že došlo k rozvoji nekrózy zejména v centru řezů, z toho důvodu nebylo možné spolehlivě...
|
|
|
Immunohistochemická detekce aktivace profibrotických prekurzorů v precizních jaterních řezech
Richter, Adam ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Rathouská, Jana (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Adam Richter Školitel: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Název bakalářské práce: Immunohistochemická detekce aktivace profibrotických prekurzorů v precizních jaterních řezech Orgánová jaterní fibróza je tou nejtypičtější progresí onemocnění u chronických zánětlivých onemocnění a celkově výrazně přispívá k celosvětové mortalitě bez ohledu na ostatní příčiny. Za jaterní fibrotické procesy jsou nejčastěji zodpovědné aktivované hvězdicové buňky (HSC), které se nacházejí v Disseho prostoru jater, přičemž mohou podléhat diferenciaci do formy myofibroblastů, které se poté významně podílí na tvorbě fibrotické tkáně. Pro pozorování aktivace a vývoje fibrotických procesů a jejich hodnocení se běžně využívá řady markerových genů a proteinů specifických právě pro tyto buňky. Tato bakalářská práce byla věnována studiu detekce aktivace profibrotických prekurzorů v precizních jaterních řezech (PCLS). Bylo využito znázornění exprese vybraných proteinů v myších ultratenkých jaterních řezech. Sledována byla exprese desminu, gliálního fibrilárního kyselého proteinu (GFAP) a α-aktinu hladkého svalstva (αSMA). Řezy pro studium fibrózy byly inkubovány 48 hodin v základním Wiliamsově médiu obohaceném glukózou a s...
|
|
|
Funkční analýza endotelové dysfunkce v myší aortě po podávání vysokotukové diety
Martínková, Adéla ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Vitverová, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Školitel: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Autor: Adéla Martínková Název diplomové práce: Funkční analýza endotelové dysfunkce v myší aortě po podávání vysokotukové diety Úvod a cíl práce: Endotelová dysfunkce je spojována s poruchou vazodilatační odpovědi cévní stěny zprostředkované oxidem dusnatým, který za fyziologického stavu vzniká v endotelových buňkách. Dysfunkci endotelu je možné indukovat podáváním vysokotukové diety (HFD) experimentálním zvířatům. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, zda podávání HFD má vliv na funkční parametry aorty, zejména vliv vazodilatačního faktoru acetylcholinu na endotelové buňky hrudní části myší aorty. Metody: Myší samci kmene C57BL/6J ve věku 7 měsíců byli krmeni po dobu 12 týdnů vysokotukovou dietou s obsahem 42 % kcal tuku (HFD), která u nich měla navodit endotelovou dysfunkci v aortě. Kontrolní skupině byla podávána standardní laboratorní dieta po celou dobu experimentu. Funkční parametry aorty byly hodnoceny drátovým myografem 620M. Výsledky: Hmotnost zvířat byla na konci experimentu statisticky významně nižší ve skupině HFD v porovnání s kontrolní skupinou myší krmených standardní laboratorní dietou. Vazokonstrikční odpověď hrudní aorty byla stejná v...
|
|
|
TRC105 effects on development of fibrosis in liver
Masoumali, Kimia ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Rathouská, Jana (oponent)
Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences TRC105 effects on development of fibrosis in liver Diploma thesis Hradec Králové 2022 Abstrakt Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Ústav biologických a lékařských věd Školitel: Dr. Ivana Němečková, Ph.D. Konzultant: Mgr. Samira Eissazadeh Autor: Kimia Masoumali Název práce: Vliv TRC105 na rozvoj jaterní fibrózy Cíl práce V důsledku neustálého poškození získávají jaterní hvězdicovité buňky (HSCs) fenotyp myofibroblastů, které se vyznačují expresí α-hladkosvalového aktinu (α-SMA) a produkcí extracelulární matrix (ECM). α-SMA je izoforma aktinů, která je převážně produkována v buňkách vaskulárního hladkého svalstva, je typickým markerem pro diferenciaci hladkého svalstva a aktivaci hepatocytů a přispívá k fibrogenezi. Gliální fibrilární kyselý protein (GFAP) je monomerní intermediální filamentum (IF) III, které je typicky exprimováno v astrocytech, avšak exprese GFAP in vivo byla nalezena i v inertních hvězdicovitých buňkách jater. Bylo prokázáno, že hladiny GFAP v játrech myší s podvázáním žlučovodu byly zvýšeny. Protein 2 bohatý na cystein (CRIP2) je členem rodiny proteinů LIM, má dvě domény LIM, ale homeodomény vázající DNA chybí. Nadměrná exprese CRIP2 je spojena s fragmentací DNA, což svědčí o...
|
|
|
Vliv diety na rozvoj jaterního poškození charakteru nealkoholické steatohepatitidy u myší
Hemmerová, Amálie ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví Diplomová práce Autor: Bc. Amálie Hemmerová Vedoucí práce: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Název: Vliv diety na rozvoj jaterního poškození charakteru nealkoholické steatohepatitidy u myší Tato práce se zabývá studiem nealkoholické steatohepatitidy (NASH), která je považována za velice závažné chronické jaterní onemocnění. Nealkoholická steatohepatitida je pokročilou formou NAFLD (non-alcoholic fatty liver disease) a je charakterizovaná přítomnosti jaterní steatózy a zánětu. NASH může být následována komplikacemi, jako je jaterní cirhóza nebo hepatocelulární karcinom. Pro výzkum NASH je v první řadě třeba zvolit správný zvířecí model a dietu. V tomto směru se jeví velice účinným modelem pro studium NASH a hepatocelulárního karcinomu dietní model CDAA-HFD, který byl specifikován i v rámci této práce. Cílem této práce bylo sledovat vliv uvedeného dietního režimu na rozvoj jaterního poškození charakteru nealkoholické steatohepatitidy. Za tímto účelem byly sledovány vybrané parametry jaterní fibrózy u myší, kterým bylo uvedených dietním opatřením indukováno zmíněné poškození. Do studie byli zařazeni 9týdenní myší samci kmene C57BL/6J, kteří byli rozdělení...
|
|
|
Detekce nestinu ve svalu za vývoje a při poranění s využitím in vivo modelu léze kosterního svalu
Pechancová, Adéla ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Čížková, Dana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Autor: Adéla Pechancová Název bakalářské práce: Detekce nestinu ve svalu za vývoje i při poranění s využitím in vivo modelu léze kosterního svalu Vedoucí práce: RNDr. Ivana Němečková, PhD. Úvod a cíl práce: Regenerace tkání i orgánů je v současnosti velmi aktuální téma. Do popředí se dostává obor regenerativní medicína, která je zaměřena na reparaci tkání. Intermediární filamentum nestin, který je považován za marker kmenových a progenitorových buněk zejména v nervové tkáni byl prokázán i v nezralých elementech svalové tkáně. Cílem této práce bylo dokázat pomocí imunohistochemických metod expresi nestinu při vývoji a při poškození kosterního svalu po injekci kardiotoxinu a následné regeneraci. Metody: V experimentální části jsme detekovali nestin na parafínových řezech především nepřímými imunohistochemickými metodami (LSAB, EnVision FLEX kit). U parafínového řezu myšího embrya bylo cílem zachycení vývoje kosterního svalstva. U parafínového řezu poraněného svalu bérce dospělé myši pomocí injekce kardiotoxinu nám šlo o zachycení míry poškození kosterního svalu a jeho následná schopnost regenerace v různých časových intervalech. Výsledky a závěr: Výsledky práce dokládají, že nestin je důležitý ukazatel správného embryonálního vývoje,...
|
|
|
Zavedení bezobratlého zvířecího modelu, Galleria mellonella, pro studium účinnosti in vivo, stávajících a nově syntetizovaných, kandidátních antituberkulotik
Kubíček, Jiří ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Jiří Kubíček Vedoucí práce: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Název diplomové práce: Zavedení bezobratlého zvířecího modelu, Galleria mellonella, pro studium účinnosti in vivo, stávajících a nově syntetizovaných, kandidátních antituberkulotik. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo představit bezobratlý organismus, Galleria mellonella (G. mellonella), Pyralidae, jakožto alternativní, ekonomicky výhodnější a morálně lépe akceptovatelný model pro studie účinnosti antituberkulotických látek in vivo. V experimentální části této práce byla úvodem věnována pozornost optimalizaci metodických kroků, které by měly vést k vyšší reprodukovatelnosti a validitě získaných dat. Byl hodnocen vliv disagregačního suplementu, tyloxapolu, na růst bakterie Mycobacterium aurum (M. aurum). Byl rovněž mapován růst tohoto mikrobiálního kmene v kultivačním médiu, Middlebrook 7H9, za účelem určit exponenciální fázi růstu. V rámci druhé části experimentů byla provedena infekce larev G. mellonella bakteriálním kmenem M. aurum, s následnou administrací vybraných, komerčně dostupných antituberkulotik (anti-TB). Metody: Pro mapování exponenciální fáze růstu bakterie M. aurum byla provedena kultivace...
|
host ::
RSS.