Original title:
Ozdravení kulturních odrůd plamenky latnaté (Phlox paniculata) od háďátek za použití kultur in-vitro
Translated title:
Healing of cultural varieties paniculate phlox (Phlox paniculata) from nematodes using in-vitro cultures
Authors:
Nogly, David ; Matiska, Pavel (advisor) ; Augustinová, Ludmila (referee) Document type: Bachelor's theses
Year:
2016
Language:
cze Publisher:
Česká zemědělská univerzita v Praze Abstract:
[cze][eng] Plamenka latnatá (Phlox paniculata) patří do čeledi jirnicovitých (Poleminiacea). Je to velmi významná trvalka, která se uplatňuje jak v zahradní a parkové tvorbě, tak i k řezu. Ačkoliv se plamenky řadí mezi odolné rostliny proti škůdcům a patogenům, tak trpí na listová a stonková háďátka rodu Ditylenchus spp. Není známa metoda, která by 100 % zbavovala rostliny háďátek. Cílem této práce bylo ověřit hypotézu o metodě ozdravování rostlin pomocí in-vitro kultur a vytvoření čistých, zdravých kultur pro následné matečnice. Pokus byl sledován na vybraných deseti odrůdách a to 'Aňa Gaganova', 'Blue Paradise', 'Errötense Mädchen', 'Molodost', Igor Talkov', 'Jubilee', 'Laura', 'Mies Copijn', 'Sekret' a 'Winsdor'. Dále byla zkoumána regenerace kalusů, následné prorůstání a regenerace prýtů v závislosti
na odrůdě.
Rostliny byly testovány na přítomnost háďátek rodu Ditylenchus spp., pomocí modifikované Baermannovy extrační techniky. Testovány byly všechny odrůdy kultivované ve skleníku. Pro pokus byly zvoleny listové segmenty o velikost 0,5 - 1 cm2, následná kultivace byla prováděna na základním MS médiu (Murashige and Skoog, 1962) s 30 g . l-1 sacharózy, pyridoxin 0,05 g . l-1 ,thiamin 0,01 g . l-1, glycin 0,20 g . l-1 a kyseliny nikotinové 0,05 g . l-1. Základní kultivace probíhala na MS médiu obohaceném o RRR a to 1,5 mg. l-1 TDZ a 0,5 mg . l-1 IAA pro iniciaci růstu kalusů a prorůstaní regenerovaných prýtů. Bylo ověřeno, že při dané koncentraci RRR je regenerace kalusů téměř rovná 100 % u většiny zkoumaných odrůd. Nejlepší výsledky dosahovaly odrůdy 'Aňa Gaganova', 'Blue Paradise', 'Errötense Mädchen' a 'Molodost' i při opakovaném testování. V další části testování se prokázaly pozitivní podmínky pro regeneraci a prorůstání prýtů při kultivaci v řízeném prostředí, oproti neregulovaném prostředí. Explantáty v řízeném prostředí dosahovaly v průměru o 0,33 vyšší tvorbou prýtů na kalus. Úspěšným ozdravením kultur od škůdce Ditylenchus dipsaci pomocí explantátových kultur byla ověřena počáteční hypotéza, kdy výsledné explantáty převáděné do ex-vitro podmínek byly 100 % bez výskytu škůdce. V průběhu testování, kalusové kultury rostlé na MS médiu 1,5 mg . l-1 TDZ a 0,5 mg . l-1 IAA vykazovaly určitou míru výskytu háďátek, ale následným pasážováním byly i zbylé populace háďátek eliminovány.
Phlox paniculata belongs to the family Poleminiaceae. Phlox paniculata is very important perenial which is used in commons gardens, park landscaping and also to product cut flowers. Although garden phlox are classified as resistant plants to pests and pathogens, they suffer from leaf and stem nematodes of genus Ditylenchus spp. Method eliminating these nematodes from plants for 100 % is still unknown. This thesis investigate the possibility of eliminating nematodes by using explant cultures and creating healthy plants for future mother plants of Phlox paniculata. For this experiment was chosen 10 varieties, 'Aňa Gaganova', 'Blue Paradise', 'Errötense Mädchen', 'Molodost', Igor Talkov', 'Jubilee', 'Laura', 'Mies Copijn', 'Sekret' and 'Winsdor'. These plants were also researched for regeneration of calluses and growing ratio of shoots according to their varietes.
Plants were tested for presence of nematodes Ditylenchus dipsaci by using modified Baermann Technique. All varietes of Phlox paniculata were grown in greenhouse and all of them were tested. For experiment were chosen leaf segments measuring 0,5 - 1 cm2 and the cultivation took place on MS medium (Murashige and Skoog 1962) + 30 g sucrose, pyridoxine 0,5 mg. l-1, thiamine 0,5 mg. l-1, glycine 2 mg. l-1 , nicotinic acid 0,05 mg. l-1. Leaf segments were placed to MS medium enriched by 1,5 mg . l-1 TDZ (Thidiazuron) and 0,5 mg . l-1 IAA (Indole-3-acetic acid). Callus regeneration at the level of plant growth regulators was almost fully vertified during this experiment. Best results were obtained from follow varieties 'Aňa Gaganova', 'Blue Paradise', 'Errötense Mädchen' and 'Molodost'. These results were also obtained from repeated experiment. Positive influence of controlled conditions to growing shoots and callus regeneration was also proved. Explants which were grown in controlled conditions reached higher efficiency on average 0,33 shoots per callus.
By successful recovery of the plants from pests Ditylenchus dipsaci using explantate cultures, it was verifed the initial hypothesis, where resulting explants are transferred to ex-vitro conditions were 100 % pest free. Although, callus cultures grown on MS medium of 1,5 mg . l-1 TDZ and 0,5 mg . l-1 IAA showed some degree of nematode occurrence during testing, consequent passage eliminated the remaining population of nematodes.
Keywords:
háďátka; in vitro; ozdravování rostlin; phlox paniculata; regenerace kalusu
guest ::
