Original title:
Analýza vývoje klíčních transgenních rostlin Arabidopsis thaliana nadprodukující cytokinin-glukosid specifické ß-glukosidasy Zm-p60.1
Authors:
Štuříková, Helena Document type: Bachelor's theses
Year:
2014
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] V této bakalářské práci byla studována lokalizace exprese kukuřičné beta-glukosidázy Zm-p60.1 v transgenních liniích Arabidopsis pomocí metod histochemického barvení a konfokální mikroskopie. Zm-p60.1 hraje významnou roli v části cytokininového metabolismu, kde se účastní zpětné aktivace zeatinu z inaktivní zásobní formy, zeatin-O-glukosidu. Histochemické barvení prokázalo expresi Zm-p60.1 v kořenových špičkách, pletivech listů a cévních svazcích. Následně bylo v těchto oblastech díky konfokální mikroskopii a fluorescenčnímu značení GFP ve zkoumaných rostlinách specifikováno umístění signálu do chloroplastů, plastidů (v kořenových špičkách) a xylému cévních svazků. Lokalizace Zm-p60.1 v chloroplastech a plastidech u Arabidopsis koreluje s předchozími studiemi kukuřice (Kristoffersen et al., 2000) a tabáku (Kiran et al., 2006), což dokazuje stabilitu lokalizace Zm-p60.1. Exprese Zm-p60.1 v cévních svazcích je naopak nečekaný poznatek, případné objasnění je možné v dalším výzkumu.In this bachelor thesis the localization of the maize beta-glukosidase Zm-p60.1 was studied in transgenic Arabidopsis plants using histochemical staining and confocal microscopy. Zm-p60.1 plays an important role in cytokinin metabolism, where it participates in the reversible activation of zeatin from its inactive storage form - zeatin-O-glucoside. Histochemical staining confirmed the expression of Zm-p60.1 in root tips, leaf tissues and vasculature. Subsequent, confocal microscopy using a fluorescently (GFP)-labeled version of Zm-p60.1 revealed localization in chloroplasts, plastids (in root tips) and in xylem of vasculature. Localization of Zm-p60.1 in chloroplasts and plastids in Arabidopsis correlates with previous studies in maize (Kristoffersen et al., 2000) and tobacco (Kiran et al., 2006), which indicates the stability of Zm-p60.1 targeting. The expression of Zm-p60.1 in the vasculature is an unexpected finding and needs to be clarified in future research.
Keywords:
beta-glukosidáza; cytokininový metabolismus; plastid; zeatin-O-glukosid