|
|
Analýza vybraných fyziologických parametrů sportovců během zátěže
Ambrožová, Monika ; Kolářová, Jana (oponent) ; Ronzhina, Marina (vedoucí práce)
Pravidelná pohybová aktivita je považována za nezbytnou součást našeho života. Sport je doporučován pro předcházení různým chorobám, posílení imunitního systému či pro udržování váhy a zlepšení kondice člověka. Avšak v jaké míře je sportovní aktivita lidskému zdraví prospěšná a kdy přechází do stavu, kdy tělu spíše škodí? Tato práce pojednává o možných škodlivých účincích ultravytrvalostních sportů na lidský organismu. V našem případě se jedná o 100km běh, tedy ultramaraton a MTB. V následujících částech je snaha o vysvětlení metabolických změn a vlivu ultra vytrvalostního sportu na imunologické a biochemické parametry. Zkoumány byly parametry imunoglobulin A, M, leukocyty, kreatinin, sodné a draselné ionty a enzymy jako laktátdehydrogenáza, kreatinkináza a alaninaminotransferáza. Hodnoty těchto parametrů byly získány ze vzorků krve závodníků odebrané před závodem a následně hned po závodě. Bylo zkoumáno celkem 23 vzorků z cyklistického závodu na 24 hodin a 24 vzorků z běžeckého závodu na 100 km. Pro statistickou analýzu dat byl vytvořen nástroj v programu Matlab. Byl zjištěn enormní nárůst množství leukocytů v obou typech závodů. V cyklistickém závodě se jedná o navýšení z 5,75±1,29 x109/l na 11,80±3,08 x109/l, v běžeckém závodě z 4,99±1,84 x109/l na 13,20±5,36 x109/l. IgA se významně nesnížil, naopak se mírně zvýšil. Hodnoty IgM se u běžců výrazně nezměnily. U cyklistů došlo ke statisticky významnému snížení z původního množství 60,23±6,54 mg/dl na 52,60±10,43 mg/dl. U běžeckého závodu dále došlo ke statisticky významným změnám hladiny CK a LDH. Z původních hodnot CK 4,25±2,74 kat/l stoupla aktivita enzymu vlivem závodu na 50,09±60,08 kat/l. LDH se u cyklistického závodu nijak významně neliší, stejně jako je tomu u enzymu ALT. V tomto případě nedošlo k jeho statisticky významné změně ani v jednom typu závodu. Koncentrace draselných a sodných iontů významně poklesla. U draslíku jeho koncentrace poklesla z 5,61±0,59 mmol/l na 4,57±0,39 mmol/l. Koncentrace sodných iontů se snížila po závodě z 138,22±1,17 mmol/l na 137,00±1,75 mmol/l.
|
|
|
Vývoj imunologických testů pro detekci nebezpečných bakteriálních patogenů
Šmídová, Lada
Cílem diplomové práce bylo vytvořit imunologický test pro detekci nebezpečného bakteriálního patogenu methicilin rezistentní Staphylococcus aureus (MRSA). Infekce MRSA způsobují celosvětové problémy ve zdravotnických zařízení poskytujících akutní a následnou péči v lůžkové i ambulantní části, proto je u pacientů velmi důležitá včasná a rychlá diagnostika a cílená terapie. Z E. coli byl pomocí QIAquick PCR Purificatin Kitu izolován bakteriální konstrukt, který byl následně purifikován a dialyzován. Získaný rekombinantní protein PBP2a byl v různých koncentracích nanesen na nitrocelulózovou membránu v podobě linií. Dále se provedla optimalizovaná blot-line metoda pro detekci specifických protilátek proti rekombinantnímu antigenu PBP2a ve třídách imunoglobulinů IgG, IgA a IgM. Pro detekci bylo použito několik různých koncentrací konjugátu Goat Anti-Human IgG-AP, Goat Anti-Human IgA-AP nebo Goat Anti-Human IgM-AP. Intenzita zabarvení linií každého jednotlivého stripu byla hodnocena pomocí Immunoblot softwaru. Z naměřených hodnot byla zjištěna diagnostická citlivost, specifita a celková diagnostická shoda. Dále bylo provedeno testování preciznosti za podmínek opakovatelnosti (intra-assay) a reprodukovatelnosti (inter-assay). Preciznost metody byla vyjádřena variačním koeficientem. Jako nejvhodnější pro výrobu soupravy IgG byla stanovena koncentrace antigenu PBP2a od 0,30 mg/ml do 0,45 mg/ml a koncentrace konjugátu IgG 1:1500-1:1800. Pro třídu imunoglobulinů IgA byla jako nejvhodnější zjištěna koncentrace antigenu PBP2a od 0,40 mg/ml do 0,52 mg/ml a koncentrace konjugátu IgA 1:500-1:1000. Variační koeficient za podmínek opakovatelnosti pro celý rozsah u třídy IgG je 10,09 % a u třídy IgA je 8,91 %. Variační koeficient za podmínek reprodukovatelnosti pro celý rozsah u třídy IgG je 9,23 % a u třídy IgA je 9,60 %. Preciznost metody za podmínek opakovatelnosti a reprodukovatelnosti pro třídy imunoglobulinů IgG a IgA vyhovuje kritériím pro výrobu diagnostické soupravy. Výsledky titrací prokázaly, že vyrobené konkrétní šarže karet nitrocelulózové membrány s naneseným antigenem PBP2a musí být vždy ověřeny na panelu referenčních vzorků a podle toho se nastaví hodnoty koncentrací (jak antigenu, tak konjugátu) dle potřeby, odlišně však pro třídu imunoglobulinů IgG a IgA.
|
|
|
Experimentální infekce Oryctolagus cuniculus motolicí Fascioloides magna
Melounová, Klára ; Kašný, Martin (vedoucí práce) ; Novobilský, Adam (oponent)
Fasioloides magna je motolice parazitující v jaterním parenchymu přežvýkavců. Její životní cyklus je vázaný na vlhké prostředí a zahrnuje mezihostitele, jimiž jsou sladkovodní plži (Lymnaeidae). Široké spektrum definitivních hostitelů lze dělit podle schopnosti tvorby určitého typu pseudocysty na specifické definitivní hostitele (jelen lesní, daněk evropský, srnec obecný), nespecifické definitivní hostitele (tur domácí, prase divoké či los evropský) a netypické hostitele (ovce domácí a koza domácí). Vedle záznamů o přirozených infekcích uvedených hostitelů byly prováděny také experimentální nákazy různých druhů potenciálních hostitelů v laboratorních podmínkách, např. kamzík horský, lama krotká a ovce tlustorohá, ale také u tradičních laboratorních zvířat, myš, morče, potkan a králík. Během nejrůznějších typů onemocnění probíhá v hostiteli mnoho změn, které lze kvalitativně a kvantitativně stanovit. Podobně u fascioloidózy lze měřit některé změny, které jsou spojeny s přítomností parazita v hostitelově těle, např. tvorba protilátek, zvýšení počtu eozinofilů, uvolňování vajíček trusem, vnitřní krvácení nebo i poškození jater. Právě míra poškození jaterní tkáně se odráží především v biochemických parametrech měřitelných z krve. Jedná se nejen o jaterní enzymy, ale také další složky krve, které...
|
|
|
Analýza vybraných fyziologických parametrů sportovců během zátěže
Ambrožová, Monika ; Kolářová, Jana (oponent) ; Ronzhina, Marina (vedoucí práce)
Pravidelná pohybová aktivita je považována za nezbytnou součást našeho života. Sport je doporučován pro předcházení různým chorobám, posílení imunitního systému či pro udržování váhy a zlepšení kondice člověka. Avšak v jaké míře je sportovní aktivita lidskému zdraví prospěšná a kdy přechází do stavu, kdy tělu spíše škodí? Tato práce pojednává o možných škodlivých účincích ultravytrvalostních sportů na lidský organismu. V našem případě se jedná o 100km běh, tedy ultramaraton a MTB. V následujících částech je snaha o vysvětlení metabolických změn a vlivu ultra vytrvalostního sportu na imunologické a biochemické parametry. Zkoumány byly parametry imunoglobulin A, M, leukocyty, kreatinin, sodné a draselné ionty a enzymy jako laktátdehydrogenáza, kreatinkináza a alaninaminotransferáza. Hodnoty těchto parametrů byly získány ze vzorků krve závodníků odebrané před závodem a následně hned po závodě. Bylo zkoumáno celkem 23 vzorků z cyklistického závodu na 24 hodin a 24 vzorků z běžeckého závodu na 100 km. Pro statistickou analýzu dat byl vytvořen nástroj v programu Matlab. Byl zjištěn enormní nárůst množství leukocytů v obou typech závodů. V cyklistickém závodě se jedná o navýšení z 5,75±1,29 x109/l na 11,80±3,08 x109/l, v běžeckém závodě z 4,99±1,84 x109/l na 13,20±5,36 x109/l. IgA se významně nesnížil, naopak se mírně zvýšil. Hodnoty IgM se u běžců výrazně nezměnily. U cyklistů došlo ke statisticky významnému snížení z původního množství 60,23±6,54 mg/dl na 52,60±10,43 mg/dl. U běžeckého závodu dále došlo ke statisticky významným změnám hladiny CK a LDH. Z původních hodnot CK 4,25±2,74 kat/l stoupla aktivita enzymu vlivem závodu na 50,09±60,08 kat/l. LDH se u cyklistického závodu nijak významně neliší, stejně jako je tomu u enzymu ALT. V tomto případě nedošlo k jeho statisticky významné změně ani v jednom typu závodu. Koncentrace draselných a sodných iontů významně poklesla. U draslíku jeho koncentrace poklesla z 5,61±0,59 mmol/l na 4,57±0,39 mmol/l. Koncentrace sodných iontů se snížila po závodě z 138,22±1,17 mmol/l na 137,00±1,75 mmol/l.
|
|
|
Protilátková odpověď specifických hostitelů vůči antigenům ptačích schistosom
Turjanicová, Libuše ; Mikeš, Libor (vedoucí práce) ; Kolářová, Libuše (oponent)
Tato práce zaměřená na humorální odpověď specifických hostitelů proti antigenům různých vývojových stadií ptačích schistosom T. regenti a T. szidati navazuje na předchozí výzkum protilátkové odpovědi u nespecifických hostitelů (myš, člověk). Pomocí metod ELISA a na western blotu byla testována séra experimentálně nakažených kachen a séra z ulovených divokých kachen. Séra byla odebírána v předem určených intervalech. Výsledky ELISA testu ukazují průběh humorální odpovědi po infekci ptačími schistosomami. Po infekci T. regenti se 20. d.p.i. (den po infekci) signifikantně zvýšila hladina specifických protilátek IgY proti homogenátu cerkárií T. regenti. U kachen nakažených druhem T. szidati nebyl podobný vývoj zaznamenán. Změny hladiny specifických IgM proti homogenátu cerkárií T. szidati byly zaznamenány pouze u kachen nakažených v době plné imunokompetence a u opakovaně infikovaných kachen. Jednalo se o mírné zvýšení hladiny IgM 10. d.p.i. U ulovených kachen nebyla při celkovém vyšetření prokázána infekce ptačími schistosomami, což potvrzují i výsledky ELISA. Protilátky IgY z sér kachen infikovaných T. regenti na imunoblotu silně rozpoznávaly 2 antigeny v oblasti 49-47 kDa a 47-45 kDa. Objevily se i další reakce, které však nebyly zaznamenány u všech jedinců. Western blot, při němž jako antigen...
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.