|
|
HPLC separace p-aminofenolu, paracetamolu, kofeinu a propyfenazovu na polární stacionární fázi
Maroušková, Alena ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
V této práci byly nalezeny optimální chromatografické podmínky pro separaci p-aminofenolu, paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu pomocí metody HPLC. Jde o látky vzájemně se lišící lipofilitou a acidobazickými vlastnostmi. Použití klasických kolon s reverzní fází je pro jejich společné stanovení problematické. PEG kolona se ukázala jako vhodná pro efektivní separaci látek s odlišnou polaritou, tedy s různým chromatografickým chováním. Výhodou výsledné metody je především zkrácení doby analýzy, což hraje významnou roli zejména při analýzách velkých sérií vzorků. V rámci optimalizace chromatografických podmínek: byl vyzkoušen široký výběr mobilních fází (různá organická rozpouštědla, různý poměr zastoupení organické složky ke složce vodné) bylo testováno pH mobilní fáze v rozmezí 4 - 7 byly testovány různé pufry bylo vyzkoušeno chování látek na koloně při zvýšené teplotě byly testovány dvě PEG kolony s rozdílnými délkami Byly nalezeny optimální chromatografické podmínky, při kterých dojde k separaci výše uvedených látek a které současně vyhovují požadavkům na jednoduchost a časovou nenáročnost při zachování vysoké spolehlivosti metody. Konečné chromatografické podmínky: Stacionární fáze: Supelco Discovery HS PEG kolona (15 x 4 mm, 3 µm) Mobilní fáze: octanový pufr o pH 4,5 s obsahem 0,04%...
|
|
|
Determination of Co (II) ions in the SIA system with chemiluminescence detection
Köszegy, Erik ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Erik Köszegy Školiteľ: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Stanovení kobaltnatých iontů v SIA systému s chemiluminiscenční detekcí V tejto práci bola použitá metóda sekvenčnej injekčnej analýzy na stanovenie kobaltnatých iónov s chemiluminiscenčnou detekciu. Základom stanovenia je chemiluminiscenčná reakcia, ktorej podstatou je oxidácia luminolu peroxidom vodíka v prietokovom systéme za prítomnosti kobaltnatých iónov v alkalickom prostredí. Stopové množstvá kobaltnatých iónov fungujú v reakcii ako katalyzátor chemickej reakcie. Použitá aparatúra pozostávala z klasického SIA systému s prietokovou celou tvorenou špirálou z priehľadnej teflónovej hadičky, ktorá je vhodná na chemiluminiscenčné meranie. Emitované žiarenie bolo detekované pomocou citlivého fotonásobiča. Reakcia bola prevedená v systéme po predchádzajúcej optimalizácii reakčných podmienok. Ďalej bola zisťovaná citlivosť a opakovateľnosť chemiluminiscenčnej reakcie. Pri stanovení kalibračnej závislosti bol použitý roztok peroxidu vodíka, luminolu v 0,1 M NaOH a roztok vzorky, ktorý obsahoval kobaltnaté ióny v odstupňovanej koncentrácii od 1 mM do 0,001 mM. Optimálne koncentrácie činidiel boli 5 mM pre luminol v...
|
|
| |
|
| |
|
|
Hodnocení antioxidační aktivity přírodních látek
Kunovská, Klára ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Horstkotte Šrámková, Ivana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Klára Kunovská Školitel: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, PhD. Konzultant: doc. RNDr. Miroslav Polášek, CSc. Název diplomové práce: Hodnocení antioxidační aktivity přírodních látek Cílem této diplomové práce bylo hodnocení antioxidační aktivity přírodních látek pomocí chemiluminiscenční detekce v průtokovém systému sekvenční injekční analýzy (SIA). Výhodou tohoto systému je vysoká citlivost, jednoduchost a vysoká opakovatelnost jednotlivých analýz. Jako antioxidační aktivita byla hodnocena závislost chemiluminiscenčního signálu na koncentraci testovaného antioxidantu a následně odvozen index Q. Jako chemiluminiscenční činidlo zde sloužil luminol, který v bazickém prostředí při oxidaci peroxidem vodíku za přítomnosti katalyzátoru vykazoval chemiluminiscenční záření. Jako katalyzátor byl použit roztok hexakyanoželezitanu draselného a celé měření probíhalo při pracovním napětí 435 mV. Chemiluminiscenční signál byl snímán po dobu 60 s. U každé testované látky proběhly 3 cykly měření. Výsledky testování byly hodnoceny pomocí plochy a výšky chemiluminiscenčního signálu a srovnány s experimentem bez testovaného antioxidantu. Nejprve byly hodnoceny jednotlivé vybrané látky s antioxidační aktivitou, a to kvercitrin,...
|
|
|
Quantum-Dots částice jako zesilovače při chemiluminiscenčním stanovení v SIA systému
Bártová, Zuzana ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Zuzana Bártová Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Quantum-Dots částice jako zesilovače při chemiluminiscenčním stanovení v SIA systému Quantum-Dots částice (QDs) byly testovány jako zesilovače chemiluminiscenčního (CL) signálu pomocí sekvenční injekční analýzy (SIA). K testování bylo využito CL reakce, při které byl luminol (5-aminoftalylhydrazid) v bazickém prostředí oxidován peroxidem vodíku, QDs vystupovaly jako zesilovač CL signálu. Při reakci byly vyzkoušeny následující koncentrace roztoků: peroxid vodíku v rozsahu 1.10-1 až 1.10-7 mol.l-1 , a to bez QDs a s QDs s emisními maximy 520, 575, 603 a 636 nm a ředěním 10 µl/10 ml (0,1% roztok), 200 µl/10 ml (2% roztok) a 200 µl/1 ml (20% roztok). CL signál byl detekován dvěma způsoby. Pro reakce s koncentrovanějším roztokem peroxidu vodíku (1.10-1 až 1.10-3 mol.l-1 ) byla použita CL cela navržená na Katedře analytické chemie FaF UK v HK - a jako detektor fotonásobič Hamamatsu (Japonsko), který umožňuje sledovat CL signál od začátku chemické reakce včetně jeho časového záznamu. Pro reakce se zředěnějším roztokem peroxidu vodíku (1.10-3 až 1.10-7 mol.l-1 ) fotonásobič fluorimetru Schoeffel (Německo) se spirální...
|
|
|
Hodnocení vybraných obsahových látek v ovoci metodou HPLC-DAD-CAD
Košková, Stanislava ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Stanislava Košková Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Konzultant: Ing. Radek Vávra, Ph.D. (VŠÚO Holovousy) Název diplomové práce: Hodnocení vybraných obsahových látek v ovoci metodou HPLC-DAD-CAD Tato diplomová práce byla zaměřena na stanovení obsahu sedmi fenolických látek, konkrétně kyseliny gallové, kyseliny chlorogenové, epikatechinu, rutinu, floridzinu, kvercetinu a floretinu v jablkách 20 odrůd, které byly dodány Výzkumným a šlechtitelským ústavem ovocnářským Holovousy s.r.o. K tomuto účelu byla použita HPLC separace v reverzním módu využívající kolonu Luna Omega Polar C18 (150 mm x 4,6 mm; 5 µm). Jako mobilní fáze byla použita směs ultra čisté vody okyselené kyselinou octovou na pH 2,8 a acetonitrilu. Byl zvolen lineární gradient s postupným zvyšováním podílu organické složky z počátečních 10 % na 50 % během 10 min separace. Následovala ekvilibrace kolony - do 12,50 min při 10 % organické složky. Celková délka separace byla 12,5 min při průtokové rychlosti 1 ml/min. Teplota kolonového prostoru byla nastavena na 30 řC. Detekce byla provedena pomocí DAD (254, 280, 320 nm) a CAD detektoru (teplota nebulizéru 25 řC). Součástí této práce je test způsobilosti chromatografického systému,...
|
|
|
Stanovení kreatininu v moči pomocí on-line SPE v SIA
Semerádová, Eva ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Eva Semerádová Školitel: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení kreatininu v moči pomocí on-line SPE v SIA Cílem diplomové práce bylo stanovit kreatinin v moči metodou, jejíž výsledky by byly srovnatelné s rutinně používanou metodou na bázi Jaffého reakce. Byly použity tři vzorky moči, výsledné hodnoty byly statisticky porovnány s hodnotami naměřenými na klinickém analyzátoru dle Jaffého protokolu. Kreatinin v moči byl stanoven pomocí online extrakce na tuhé fázi (SPE) v sekvenční injekční analýze (SIA). Kolona v systému SIA byla naplněna sorbentem pro extrakci, byl použit sorbent do materiálu Plexa PCX. Pro stanovení kreatininu byla použita metoda standartního přídavku, každý vzorek byl změřen dvakrát a pro hodnocení byl využit průměr daných hodnot. Podmínky experimentu byly nejprve optimalizovány na roztocích standardu ve zředěné kyselině octové, poté byly aplikovány i na reálné vzorky moči. V metodě byla hodnocena linearita, výtěžnost, opakovatelnost a robustnost. Dle hodnoty korelačního koeficientu bylo dosaženo dobré linearity, výtěžnosti kolem 100 %. Opakovatelnost byla zhodnocena dle RSD, která se pohybovala vždy kolem 2-3 %, což je považováno za velmi...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení účinných látek a nečistoty v přípravku Valetol
Maroušková, Alena ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Tato práce navazuje na diplomovou práci (1) , ve které byly nalezeny optimální chromatografické podmínky pro stanovení účinných látek léčivého přípravku Valetol, paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu, a nečistoty p-aminofenolu, metodou HPLC. Součástí rigorózní práce bylo nalezení vhodného vnitřního standardu pro přesnou kvantifikaci účinných látek a nečistoty, kyseliny benzoové. Následně byla provedena validace analytické metody, včetně testu vhodnosti chromatografického systému. V rámci testu vhodnosti chromatografického systému byla testována: účinnost kolony vyjádřená počtem teoretických pater N asymetrie chromatografických píků vyjádřená faktorem T rozlišení chromatografických píků opakovatelnost vyjádřená relativní směrodatnou odchylkou V rámci validace analytické metody byla testována: přesnost linearita správnost selektivita robustnost stabilita Test robustnosti prokázal citlivost analýzy na změnu složení mobilní fáze. Byly testovány dva parametry mobilní fáze: pH a změna obsahu triethylaminu. Bylo dokázáno, že změna pH mobilní fáze má vliv především na retenční časy p-aminofenolu a kyseliny benzoové. Změna obsahu triethylaminu v mobilní fázi má výrazný vliv jak na retenční čas p-aminofenolu, tak na velikost plochy píku p-aminofenolu (na jeho kvantifikaci). Požadavek na...
|
|
|
Monitorování liberačních testů.
Beran, Marek ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Marek Beran Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Konzultant: Ing. Daniela Šmejkalová, Ph.D Název diplomové práce: Monitorování liberačních testů. Diplomová práce je zaměřena na vývoj automatizované metody pro monitorování disolučního profilu klotrimazolu z topických lékových forem. Je zde porovnáván disoluční profil přípravků obsahujících antimykotikum klotrimazol. A to komerčně dostupných léčivých přípravků Canesten a Clotrimazol AL ve formě krémů, které jsou porovnávány s novou formulací od firmy Contipro a.s. zvanou Delcore, obsahující komplexní matrici. V teoretické části práce je pojednáno o mykotických infekcích se zaměřením na povrchové mykózy a o přípravcích, dostupných na Českém trhu, určených pro léčbu těchto infekcí. Dále se v práci nachází popis vybraných neseparačních průtokových analytických metod. Analýza probíhala v systému sekvenční injekční analýzy, se třemi připojenými Franzovými disolučními celami s membránou, na níž byla nanesena látka, u které byl sledován disoluční profil. Franzovy cely byly umístěny do vodní lázně o teplotě 32 řC. Jako disoluční prostředí byl zvolen fosfátový pufr s pH 7,4 pro částečnou imitaci lidského prostředí. Detekce byla provedena UV detektorem při...
|
host ::
RSS.