|
| |
|
| |
|
|
Proliferace a dynamika tkání během vývoje zubů a jim pribuzných patrových lišt
Rothová, Michaela ; Peterková, Renata (vedoucí práce) ; Matalová, Eva (oponent) ; Černý, Robert (oponent)
V této dizertační práci jsem se zaměřila na otázky týkající se buněčné proliferace a dynamiky tkání u tří klíčových oblastí obličejového vývoje: během potlačení nebo revitalizace zubních pupenů, které se vyvíjejí v myší embryonální dentici jako pozůstatky ztracených premolárů; během vzniku zubní papily a zubního folikulu prvního myšího moláru; a během vzniku patrových lišt na ústním povrchu tvrdého patra u myši. Buněčnou proliferaci v tvářové oblasti dolní čelisti jsme porovnávali u méně a více vývojově pokročilých myších zárodků na embryonálním dni 13,5, v období předpokládané zástavy růstu premolárového rudimentu R2. Ukázali jsme, že růst rudimentu R2 je potlačen v důsledku nízké míry buněčné proliferace a vysoké míry apoptózy. Zajímavé bylo, že při narušení Sprouty signalizace, R2 rudiment vykazoval podobnou míru proliferace a apoptózy jako progresivně rostoucí první molár. V důsledku těchto změn se R2 rudiment u Sprouty 2 mutantních myší revitalizoval a vyvinul v nadpočetný zub před prvním molárem. Dále jsme objevili, že během stádia zubního pupenu a pohárku, je zubní mezenchym velmi dynamická tkáň, a že zubní papila prvního myšího moláru vzniká pouze z omezené populace buněk původní kondenzace zubního mezenchymu. Studovali jsme identitu buněk zubní papily, které nejsou odvozené od buněk...
|
|
| |
|
|
Sample preparation for single cell analysis
Adamová, Eva ; Basova, E. Y. ; Potáčová, Anna ; Foret, František ; Matalová, Eva ; Klepárník, Karel
Development of sensitive, miniaturized and fast methods aims to reliable analyze even small amounts of samples. Micromanipulation systems such as laser capture microdissection enable to collect just single cells from cell suspensions or tissue samples. One option for further analysis is the bioluminescence reaction based on luciferin/luciferase conversion. This approach was used for detection of active caspases, caspase-3/7. Droplets based microfluidic systems provide benefits in biological, pharmaceutical and chemical research.
|
|
|
Analysis of tissue-bound cells: Novel approaches using laser capture microdissection
Matalová, Eva ; Adamová, Eva ; Klepárník, Karel
Recent biomedical research prefers analysis of homogenous samples obtained from primary cells to cell lines. Moreover, attention is paid to cells of low number but high biological impact, such as signalling centres in embryonic development, stem cells or tumour cells. To localize cells of interest within an organ/tissue, histological sections are widely used. However, the methods of choice for further analysis of such samples are mostly limited to histochemistry, immunohistochemistry and in situ hybridization.
|
|
|
Senzitive method of Caspase-3 detection in single stem cell
Adamová, Eva ; Klepárník, Karel ; Matalová, Eva
Caspases are involved in physiological process (e.g. cellular differentiation) but also can cause serious disorders. It is getting necessary to develop sensitive, miniaturized and fast methods amenable to analyze small amounts of samples. Luciferin/luciferase chemiluminescence reaction is one of the methods of caspase-3 detection. We have developed a miniaturized device enabling detection of caspase-3 and quantitation just in femtogram level (10–15 g) in single apoptotic human stem cells (neural crest derived). The technology is based on the specific cleavage of modified luciferin by caspase-3, emissions of photons and their detection by photomultiplier tube working in the photon counting regime.
|
|
| |
|
|
Modulace intracelulární kaspázové mašinérie s využitím explantátových kultur
Matalová, Eva ; Fleischmannová, Jana ; Norek, Adam ; Míšek, Ivan
Orgánové explantátové kultury minimalizují experimentální zásahy na zvířatech, ale současně umožňují studium intaktních orgánů a tkání se zachováním mezibuněčných interakcí odpovídajících systémům in vivo. Explantáty mohou být navíc modulovány celou řadou moderních mikromanipulačních technik (elektroporace, inhibice, atd.). Příspěvek ukazuje možnost využití explantátových kultur při studiu apoptotických událostí během embryogeneze, a to na modelu digitalizace myších končetin, morfogeneze zubních základů a separace středoušních kůstek. Demonstrovány jsou výsledky specifických farmakologických inhibic intracelulárních signálních drah se zaměřením na kaspázy jako klíčové molekuly realizace apoptotických signálů.
|
|
|
Molekulární aspekty hypodoncie
Fleischmannová, Jana ; Krejčí, P. ; Matalová, Eva ; Míšek, Ivan
Abnormality v počtu zubů jsou nejčastější kraniofaciální malformací v lidské populaci. Více než 20 % lidí nemá vyvinutý jeden nebo více třetích molárů a zhruba 5 % populace vykazuje agenezi dalších zubů. Příspěvek se zabývá korelací molekulárních kroků (zatím je známo asi 200 genů, které provázejí embryonální vývoj zubů) s výskytem defektů formování zubních základů. Sledovány jsou jak syndromické formy hypodoncií (např. Riegerův syndrom, anhidrotická ektodermální dysplazie), tak nesyndromické, se kterými jsou spojovány především klíčové regulační geny pax9, msx1, axin2.
|
host ::
RSS.