|
|
Funkční analýza exprese komplexu HSP v odpovědi na chlad u \kur{Drosophila melanogaster}
ŠTĚTINA, Tomáš
Konstitutivně pozorovaná up-regulace exprese Hsp70 často vedla k unáhledným závěrům o její nezbytnosti pro potřeby opravy chladového poškození, které je, mimo jiné, charakterizováno nesprávným skládáním/denaturací proteinů. V naší studii analyzujeme odolnost vůči chladu a expresi 24 různých mRNA transkriptů komplexu Hsps a dalších genů, které jsou spojovány s opravou poškození způsobeného chladem. Použili jsme dva kmeny D. melanogaster: divoký typ a mutantní Hsp70-, který postrádá všech 6 kopií genu hsp70. Zjistitli jsme, že larvy obou kmenů se neliší ve vzorech exprese cílových genů jak v průběhu dlouhodobé chladové aklimace, tak během zotavování z chronického vystavení chladu či akutního chladového šoku, tudíž nebyla pozorována ani žádná kompenzace na úrovni transkripce jiných Hsp genů za chybějící hsp70 u kmene Hsp70-. Chladová odolnost larev kmene Hsp70- byla narušena pouze tehdy, pokud byly larvy vystaveny silnému akutnímu chladovému šoku o teplotách rovnajících se -8°C či menších. Žádný rozdíl v chladové odolnosti nebyl pozorován, pokud byly larvy larvy vystaveny chronickému mírnému chladu při teplotě 0°C či mírnému akutnímu chladovému šoku při teplotách nejníže -4°C. Na základě našich výsledků tvrdíme, že podstata chladového poškození způsobeného silným chladovým šokem se liší od té, způsobené mírným chladem a pouze v prvním případě je exprese Hsp70 důležitá pro opravu chladového poškození u larev D. melanogaster.
|
|
|
Současné možnosti využití metabolomiky v produkci rostlin
Maršík, Petr ; Vaněk, Tomáš
Metabolomika podobně jako další takzvané "omics" přístupy je založena na charakterizaci a zpracování co možná největšího souboru dat v daném biologickém systému. Význam jednotlivých "omics" technik spočívá především v jejich vzájemné integraci jejímž vyústěním je tzv. systémová biologie spojující výstupy na úrovních genové exprese, translace proteinů a souboru metabolitů s genomickými daty. Tyto vztahy jsou shrnuty na obr. 1. Primárním cílem systémové biologie je porozumět biologickým procesům v takové míře, aby bylo možné predikovat funkci biologických systémů od úrovně genů přes metabolismus, fyziologické procesy až po růst a vývoj.
|
|
|
Changes in the expression of selected testicular genes in mice
Valášková, Eliška ; Margaryan, Hasmik ; Žatecká, Eva ; Pěknicová, Jana
The decrease in population fertility has become a major concern in many developed countries. Recent studies show that infertility is affecting an estimated 15% of all couples (World Health Organization, WHO, 2010). Male infertility is the primary or contributing cause in 60% of cases. Male infertility is caused by a number of factors, such as genetic background, various environmental factors and disease. Diabetes mellitus (DM), a serious health problem on its own, is also suspected to be a contributing factor to male infertility. The aim of this project was to analyze the cellular, molecular and genetic effects of diabetic environment on spermatogenesis and sperm quality and to determine the impact of DM on the in vivo reproduction, using the mouse model (Mus musculus) inbred FVB. Diabetes was induced using streptozotocin. We used our knowledge and tools (unique monoclonal antibodies developed by our group) to determine the status of reproductive organs, anogenital distance, and the quality of sperms. Genetic analysis was performed by a quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (qPCR). We tested selected genes which are expressed in testicular tissue and thus can influence process of spermatogenesis and consequently the sperm quality. Our preliminary data strongly suggest that DM impairs male fertility. We have found significant changes in the body and reproductive organ weight of mice with DM. We have identified qualitative and quantitative changes in the expression of proteins in epididymal fluid and sperms. We have also detected an increased number of apoptotic cells in sperm of diabetic mice compared to the control group. To our knowledge, there is no study assessing the correlation between DM and “unexplained infertility”. In view of this, it is essential to analyze the effects of DM on male fertility, sperm quality, and reproduction parameters.
|
|
|
Effect of exposure to bisphenol A on gene expression in the testicular tissue in male mice
Dorosh, Andriy ; Elzeinová, Fatima ; Žatecká, Eva ; Kubátová, Alena ; Pěknicová, Jana
Laboratory of Reproductive Biology, Institute of Biotechnology, Academy of Sciences of the Czech Republic, v.v.i., Prague, Czech Republic Bisphenol A (BPA) is a synthetic, endocrine-disrupting compound able to directly bind estrogen receptors. Free BPA has been detected in human samples indicating that humans are internally exposed to BPA. The purpose of this study was to analyse the effect of BPA on the male reproductive system and testicular gene expression in germ cells. We studied the influence of long-term low concentration BPA exposition on male fertility in vivo in a two-generation study in C57BL/6 mouse strain. In this work, BPA was added with water at two environmentally relevant concentrations: 0, 4 and 4 µg/l. We measured the reproductive organs weight and sperm cells morphology and quality. Expression of genes involved in endocrine regulation and energy metabolism in testis was analysed after BPA exposure. Next, the epigenetic mechanisms of gene expression and regulation during the germ cell differentiation and effect of BPA will be analysed.
|
|
|
Reportéry genové exprese u \kur{Drosophila melanogaster}.
ŠTROS, Jiří
Drosophila melanogaster je široce používaný modelový organismus v genetice a v dalších disciplínách souvisejících s lékařsky a biotechnologicky významnými problémy. První část práce podává přehled některých základních genetických nástrojů a reportérů genové exprese používaných při práci s D.melanogaster s důrazem na reportérový gen GFP. Druhá část podává popis a výsledky experimentální práce zaměřené na reportérový konstrukt sestávající z genu adenosin deaminasy (ADGF-A) a značky GFP. Při práci s reportéry genové exprese, jako je GFP, je důležité vědět, zda přítomnost reportéru neovlivňuje studovaný proces. Experiment popsaný v této práci testoval, zda je fúzní protein sestávající z adenosin deaminasy a GFP plně funkčním enzymem, nebo zda je aktivita enzymu ovlivněna přítomností fluorescenční značky. Výsledky práce podporují vhodnost fúzního konstruktu jako reportéru genové exprese.
|
|
| |
|
| |
|
|
Patogeneze klíšťové encefalitidy a její ovlivnění genetickým pozadím hostitele
PALUS, Martin
Práce se zabývala vlivem genetického pozadí hostitele na patogenezi klíšťové encefalitidy. U rekombinantních kongenních kmenů myšířady CcS/Dem po intracerbrální a subkutánní inokululaci virem klíšťové encefalitidy byla sledována letalita, titr viru v různých orgánech a klinické projevy klíšťové encefalitidy. Důraz byl zejména kladen na produkci virus-neutralizačních protilátek a expresi imunologicky významných genů v centrální nervové soustavě.
|
|
|
Změny globální genové exprese v lidských neurálních buňkách po infekci virem klíšťové encefalitidy
TYKALOVÁ, Hana
Our study was focused on the effect of tick-borne encephalitis virus infection on global gene expression in two human neural cell lines (neuroblastoma and glioblastoma). Changes of gene expression were determined using microarray approach. We identified several genes with up-or down-regulated expression in neural cells following the infection. The changes in expression of some of them were similar in both cell lines,other exhibited different pattern.
|
|
| |
host ::
RSS.