|
|
The effect of elicitors on the secondary metabolites production in vitro cultures -I.
Damaskinos, Antonios ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
Účinné látky vždy pocházely z rostlin. Rostliny však byly schopny vyrobit jen velmi malá množství a to byl důvod, proč se zkouší mnoho alternativních způsobů výroby, jeden z nich je kultivace tkáňových kultur. Tato metoda používá fragment z živé tkáně nebo orgánu, odebíraný z neporušené rostliny, nebo již existující explantátové kultury, za účelem pěstování umělého růstového média. I tento způsob však není schopen produkovat velké množství ve srovnání s extrakcí z terénních rostlin. Elicitace je považována za možný způsob, jak zvýšit produkci sekundárních metabolitů. Tato metoda využívá rostlinám vlastní obranný systém, aby se zvýšila produkce sekundárních metabolitů in vitro. Sloučenina, která se používá k dosažení tohoto jevu se nazývá elicitor. Během naší experimentální práce jsem použil jako spouštěče sloučeninu Ethephon (2-chlorethylfosfonová kyselina) na kalusů a suspenzi kultur Hypericum perforatum, se záměrem sledovat jeho vliv na produkci flavonoidů. Tento experiment byl založen na třech různých koncentracích a šesti různých ochranných časech, přičemž v 6, 12, 24, 72, 168 hodin. Maximální efekt spouštěče byl dosažen s koncentrací C1 (1mg/100ml) po 12 hodinách a o koncentraci C3 (100mg/100ml) po 72 hodinách.
|
|
|
Květinářské využití Dionaea muscipula a její kultura in vitro
Danko, Jiří ; Augustinová, Ludmila (vedoucí práce) ; Lucie, Lucie (oponent)
Tato práce se věnuje správnému založení kultury mucholapky podivné (Dionaea muscipula Ell.) v podmínkách in vitro. Hypotézou této práce je, že roztok Sava, které obsahuje chlornan sodný, o určité koncentraci bude schopný účinně sterilizovat semena mucholapky bez jejich poškození.
Pokus byl založen ve třech opakováních na dvou místech - v Botanické zahradě hl. m. Prahy, kde bylo založeno jedno opakování, a na katedře zahradnictví na České zemědělské univerzitě, kde byla založena dvě další opakování.
Semena byla ošetřena v 5 roztocích Sava Original a to o koncentraci 5, 10, 15, 20 a 25% s přídavkem smáčedla Trend 90 a dále nasazena na 1/2 MS médium, kde byla kultivována po dobu 4 měsíců a dále přepasážována na stejné médium na další 4 měsíce. Kultivace probíhala za světelných podmínek 16 hodin světlo, 8 hodin tma.
Během kultivace se sledoval vznik kontaminací po založení kultury, počet vzešlých semen a počet rostlin, které vytvořily pravé listy. Dále také kvalitativní vzhled rostlin. Po kultivaci se sledovala hmotnost rostlin.
Z výsledků vyplývá, že všechny roztoky Sava působí dostatečně pro sterilizaci semen pro in vitro kulturu. Vliv jednotlivých roztoků na průběh klíčení je statisticky průkazný u dvou roztoků - 15 a 20 % Sava. U těchto roztoků byl průběh klíčení mnohem rychlejší než u ostatních. Na výsledný počet vyklíčených semen ani na výslednou hmotnost ale tyto roztoky neměly statisticky průkazný vliv.
Během kultivace se vyskytlo i několik zajímavých jevů - samovolná multiplikace vzešlých rostlin, tvorba polyfenolů, kvetení explantátů, chlorózy a vitrifikace pletiv.
Po ukončení předchozí kultivace byly rostliny převedeny na nesterilní substrát. Variantami substrátů byly perlit, rašelina a perlit v poměru 2:1 a čistá rašelina. Substráty byly před kultivací ošetřeny fungicidem Previcur Energy. Pro kultivaci byla zajištěna vysoká vzdušná vlhkost. Pro tyto podmínky se jako nejvýhodnějším substrátem s minimem ztrát jeví substrát směsi rašeliny a perlitu.
|
host ::
RSS.