| |
|
Use of biochemical methods in the study of plant metabolism with emphasis on the defense system
Bělonožníková, Kateřina ; Ryšlavá, Helena (vedoucí práce) ; Luhová, Lenka (oponent) ; Plchová, Helena (oponent)
(In Czech) Rostliny, jako sesilní organismy, se nemohou vyhnout působení abiotických a biotických stresových faktorů. Z těchto důvodů se v rostlinách vyvinuly komplexní a sofistikované mechanismy obrany. V zemědělství se k ochraně rostlin používají pesticidy, které ale mohou mít nežádoucí vedlejší účinky, a proto se pozornost obrací na přípravky biologické ochrany rostlin. Jedním z takových prostředků je Pythium oligandrum, půdní oomyceta, která pozitivně působí na rostliny v několika úrovních. Jednak vylučuje elicitiny, které stimulují obranné odpovědi a připravují rostlinu na případnou infekci (tzv. priming efekt), jednak sekretuje tryptamin, prekurzor auxinu, čímž podporuje růst rostliny. Kromě toho je P. oligandrum schopné mykoparazitismu vůči různým patogenům nebo antibiózy, přičemž také úspěšně soutěží s ostatními mikrooganismy o živiny a prostor. Klíčovým výzkumným tématem této práce byla analýza biochemických vlastností jedenácti izolátů P. oligandrum a jejich vliv na metabolismus rostlin. Naše výsledky ukázaly, že i blízce příbuzné izoláty P. oligandrum se významně liší v obsahu sloučenin sekretovaných do média, včetně proteinů, aminokyselin, tryptaminu a hydrolytických enzymů schopných degradovat buněčné stěny (endo-β-1,3-glukanasa, chitinasa a celulasa), exoglykosidasy, proteasy a...
|
| |
| |
|
Vektory odvozené od viru mozaiky tabáku a jejich použití pro expresi proteinů v rostlinách
Kroupa, Daniel ; Moravec, Tomáš (vedoucí práce) ; Plchová, Helena (oponent)
(cz): V průběhu několika posledních desetiletí se rostlinné viry a vektory odvozené z nich se staly nejen nedílnou součástí práce v laboratořích, ale začali se i komerčně využívat pro tvorbu vakcín, léčiv, enzymů a jiných proteinů/peptidů. Jedním z nejčastěji používaných virů pro expresi heterologních proteinů je virus tabákové mozaiky. V této práci bych se rád zaměřil na rostlinné viry, na vektory z nich odvozené. Porovnat je s dalšími používanými expresními systémy v rostlinách a popsat, jak by jejich výhody mohli být dále využívány a zkombinovány s metodami moderního klonování. Klíčová slova: virový vektor, exprese, virus tabákové mozaiky, virus mozaiky vigny, Golden- gate klonování
|
|
Acetyl - CoA karboxylasa - evoluce a inhibice
Chalupská, Dominika ; Čeřovská, Noemi (vedoucí práce) ; Plchová, Helena (oponent) ; Vlček, Čestmír (oponent)
Abstrakt
Acetyl-CoA
karboxylasa
(ACC)
je
klíčovým
enzymem
metabolismu
mastných
kyselin.
U
eukaryot
se
často
vyskytuje
v
mnoha
isoformách
a
v
různých
buněčných
kompartmentech.
V
zemědělství
jsou
inhibitory
plastidové
ACC
používány
jako
účinné
herbicidy
travinných
plevelů.
Problémem
se
ale
stává
resistence
některých
populací
travinných
plevelů
vůči
používaným
herbicidům
aryloxyfenoxypropionatům
(APPs)
a
cyklohexandionům
(CHDs).
Pomocí
PCR
a
sekvenování
bylo
u
resistentních
rostlin
populací
Avena
sterilis
ssp.
ludoviciana
Durieu
z
obilnářské
oblasti
severní
Austrálie
nalezeno
pět
aminokyselinových
substitucí
v
plastidové
ACC:
Trp-1999-Cys,
Trp-2027-Cys,
Ile-2041-Asn,
Asp-2078-Gly
a
Gly-2096-Ala.
S
použitím
kvasinkového
"gene-replacement"
systému
jsme
ukázali,
že
každá
z
těchto
mutací
způsobuje
resistenci
k
herbicidům
i
u
pšeničné
plastidové
ACC:
Asp-2078-Gly
způsobuje
resistenci
k
APPs
a
CHDs,
Trp-2027-Cys
a
Ile-2041-Asn
způsobují
resistenci
k
APPs
a
Trp-1999-Cys
způsobuje
resistenci
pouze
k
fenoxapropu.
Tyto
mutace
by
velmi
pravděpodobně
mohly
způsobit
resistenci
kteréhokoli
druhu
travinných
plevelů
pod
selekčním
tlakem
hojně
používaných
herbicidů.
Lidská
ACC
představuje
zajímavý
cíl
nových
léčiv
pro
léčbu
metabolického
syndromu.
...
|
| |