|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení ciprofloxacinu a jeho čtyř metabolitů v krysím séru
Hennhoferová, Nikola ; Kozlík, Petr (vedoucí práce) ; Křížek, Tomáš (oponent)
Diplomová práce se zaměřuje na vývoj metody pomocí ultra vysokoúčinné kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrii (UHPLC-MS/MS) pro stanovení ciprofloxacinu a jeho metabolitů (desethylenciprofloxacinu, formylciprofloxacinu, oxociprofloxacinu a sulfociprofloxacinu) v biologické matrici. V rámci této práce bylo optimalizováno nastavení hmotnostního spektrometru a byla optimalizována chromatografická separace. Nalezené optimální parametry jsou následující: chromatografická kolona ACE® Excel® C18-Amide (100 mm × 2,1 mm; 1,7 μm), Advanced Chromatography Technologies, Skotsko. Jako mobilní fáze (MF) byla zvolena směs 5 mmol l-1 pufru mravenčanu amonného o pH 3 (složka A) a methanolu (složka B) za gradientové eluce. Průtok MF byl 0,5 ml min-1 , nástřik 1 μl, celková doba analýzy 12 minut, teplota na dávkovači 15 řC, teplota kolony 40 řC. Byly sledovány následující MRM přechody v pozitivním režimu: ciprofloxacin a sulfociprofloxacin: 332,1/314,1 (Q1: -12 V, CE: -21 V, Q3: -22 V), desethylenciprofloxacin: 306,2/288,2 (Q1: -15 V, CE: -19 V, Q3: -30 V), oxociprofloxacin: 346,1/328,1 (Q1: -17 V, CE: -20 V, Q3: -23 V), formylciprofloxacin: 360,1/342,1 (Q1: -18 V, CE: -21 V, Q3: -23 V) a pro sulfociprofloxacin byl sledován MRM přechod také v negativním režimu: 410,1/366,1 (Q1: 30 V, CE: 23 V,...
|
host ::
RSS.