|
|
Využití kapilární elektroforézy v rámci forenzních molekulárně genetických zkoumání
Grafnetterová, Anna ; Doubková, Klára (vedoucí práce) ; Coufalová, Pavla (oponent)
4 Abstrakt Kapilární elektroforéza (CE) je metoda založená na principech tradiční deskové elektroforézy. Díky moderním způsobům fluorescenčního značení a jeho detekce, dosahuje vyšší spolehlivosti analýzy a přesnějších výsledků. Tato metoda je využitelná v mnoha oborech, kde dokonce může nahradit doposud používané metody jako je např. vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC). Důležité využití CE je ve forenzním zkoumání, kde se jedná především o identifikaci jedince na základě analýzy DNA i z velmi malého množství materiálu. Tím se zabývá tzv. STR analýza, která pro své účely využívá krátké tandemové repetice (STR) vykazující vysokou variabilitu v populaci. K získání správných dat je důležité odpovídající vybavení, přístroje, softwary, kity, na jejichž vývoji se podílejí i komerční firmy jako je Promega Corporation a Applied Biosystems. Celá analýza vede k získání DNA profilu a jeho vyhodnocení na základě shody vzorků získaných na místě činu a kontrolních (srovnávacích) vzorků. STR analýzu lze využít kromě lidské DNA i u zvířecí DNA zejména v chovu koní, skotu apod., kde napomáhá určení původu jedince a výběru jedince s nejlepšími znaky. Klíčová slova: kapilární elektroforéza fluorescenční značení STR STR analýza DNA profil
|
|
|
Odhad vývojových trendů vybraných biomarkerů u sledovaných populačních skupin s využitím dat humánního biomonitoringu získaných v ČR
Grafnetterová, Anna ; Černá, Milena (vedoucí práce) ; Bendlová, Běla (oponent)
Humánní biomonitoring představuje v dnešní době důležitý nástroj pro sledování expozice člověka environmentálním polutantům. Mezi dlouhodobě sledované biomarkery v České populaci patří rtuť a kadmium. V této práci je zkoumán vývojový trend hladiny rtuti v moči a ve vlasech u dětské populace a v moči a krvi u dospělé populace. Dále je sledován vývojový trend hladin kadmia v moči u dětí a v moči a v krvi u dospělých. Tyto biomarkery jsou sledovány v období 1996 - 2011. Data pocházejí z databází SZÚ a mezinárodního projektu COPHES/DEMOCOPHES. První sledovanou populační skupinou jsou dospělí dárci krve od 18 do 64 let. Druhou sledovanou populační skupinou jsou děti ve věku 6 - 12 let, které byly získány prostřednictvím základních škol a ve spolupráci s pediatry. Dostupná data byla zpracována statisticky, trendy jsou znázorněny v grafech závislosti geometrických průměrů jednotlivých sledovaných biomarkerů na čase (rok sběru biologických vzorků). Výsledky ukazují, že vývoj hladin biomarkerů v různých matricích není stabilní. U kadmia v moči dospělých byl prokázán mírný klesající trend. Hodnoty GM pro dospělé klesly z 0,43 μg/g kreatininu v roce 2009 na 0,24 μg/g kreatininu v roce 2009. Pro rok 2011 jsou dostupná data pouze pro ženy (GM = 0,21 μg/g kreatininu). Klesající vývojový trend byl zjištěn i u...
|
|
|
Biomonitoring vybraných biomarkerů v české populaci v rámci spojených projektů COPHES a DEMOCOPHES
Grafnetterová, Anna ; Černá, Milena (vedoucí práce) ; Bencko, Vladimír (oponent)
Humánní biomonitoring představuje v dnešní době důležitý nástroj pro sledování expozice člověka environmentálním polutantům. Projekty COPHES a DEMOCOPHES se zabývají harmonizovaným přístupem k humánnímu biomonitoringu v rámci Evropy. Tento postup umožní získat srovnatelná data na mezinárodní úrovni. Pro tuto pilotní studii byly vybrány 4 biomarkery (rtuť, kadmium, kotinin a metabolity ftalátů), které jsou v současné době velmi sledovány. Projektu COPHES se zúčastnilo celkem 27 evropských států a postupy byly ověřovány v 16 zemích Evropské Unie a ve Švýcarsku (projekt DEMOCOPHES). Byly zvoleny dvě lokality lišící se hustotou obyvatel - pro ČR se jednalo o Prahu a Liberecko. Jako citlivé populační skupiny byly vybrány děti ve věku 6 - 11 let a jejich matky do věku 45 let. Do studie bylo celkem zapojeno 120 párů matka - dítě. Vybraným jedincům byly odebrány vzorky biologického materiálu (vlasy a moč). Dále byly od účastníků pomocí dotazníků získány informace o jejich stravování a stylu života, bydlení, vzdělání, zaměstnání a kuřáckých návycích. Získané informace byly propojeny s výsledky analýz biologického materiálu a statisticky vyhodnoceny. Z výsledků bylo zjištěno, že naměřené hladiny sledovaných biomarkerů nepřekračují zdravotně významné limitní hodnoty (pokud jsou stanoveny). Dále pak na základě použití...
|
|
|
Odhad vývojových trendů vybraných biomarkerů u sledovaných populačních skupin s využitím dat humánního biomonitoringu získaných v ČR
Grafnetterová, Anna ; Černá, Milena (vedoucí práce) ; Bendlová, Běla (oponent)
Humánní biomonitoring představuje v dnešní době důležitý nástroj pro sledování expozice člověka environmentálním polutantům. Mezi dlouhodobě sledované biomarkery v České populaci patří rtuť a kadmium. V této práci je zkoumán vývojový trend hladiny rtuti v moči a ve vlasech u dětské populace a v moči a krvi u dospělé populace. Dále je sledován vývojový trend hladin kadmia v moči u dětí a v moči a v krvi u dospělých. Tyto biomarkery jsou sledovány v období 1996 - 2011. Data pocházejí z databází SZÚ a mezinárodního projektu COPHES/DEMOCOPHES. První sledovanou populační skupinou jsou dospělí dárci krve od 18 do 64 let. Druhou sledovanou populační skupinou jsou děti ve věku 6 - 12 let, které byly získány prostřednictvím základních škol a ve spolupráci s pediatry. Dostupná data byla zpracována statisticky, trendy jsou znázorněny v grafech závislosti geometrických průměrů jednotlivých sledovaných biomarkerů na čase (rok sběru biologických vzorků). Výsledky ukazují, že vývoj hladin biomarkerů v různých matricích není stabilní. U kadmia v moči dospělých byl prokázán mírný klesající trend. Hodnoty GM pro dospělé klesly z 0,43 μg/g kreatininu v roce 2009 na 0,24 μg/g kreatininu v roce 2009. Pro rok 2011 jsou dostupná data pouze pro ženy (GM = 0,21 μg/g kreatininu). Klesající vývojový trend byl zjištěn i u...
|
|
|
Využití kapilární elektroforézy v rámci forenzních molekulárně genetických zkoumání
Grafnetterová, Anna ; Doubková, Klára (vedoucí práce) ; Coufalová, Pavla (oponent)
4 Abstrakt Kapilární elektroforéza (CE) je metoda založená na principech tradiční deskové elektroforézy. Díky moderním způsobům fluorescenčního značení a jeho detekce, dosahuje vyšší spolehlivosti analýzy a přesnějších výsledků. Tato metoda je využitelná v mnoha oborech, kde dokonce může nahradit doposud používané metody jako je např. vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC). Důležité využití CE je ve forenzním zkoumání, kde se jedná především o identifikaci jedince na základě analýzy DNA i z velmi malého množství materiálu. Tím se zabývá tzv. STR analýza, která pro své účely využívá krátké tandemové repetice (STR) vykazující vysokou variabilitu v populaci. K získání správných dat je důležité odpovídající vybavení, přístroje, softwary, kity, na jejichž vývoji se podílejí i komerční firmy jako je Promega Corporation a Applied Biosystems. Celá analýza vede k získání DNA profilu a jeho vyhodnocení na základě shody vzorků získaných na místě činu a kontrolních (srovnávacích) vzorků. STR analýzu lze využít kromě lidské DNA i u zvířecí DNA zejména v chovu koní, skotu apod., kde napomáhá určení původu jedince a výběru jedince s nejlepšími znaky. Klíčová slova: kapilární elektroforéza fluorescenční značení STR STR analýza DNA profil
|
host ::
RSS.