|
|
Studium exprese SWC7 molekul na prasečích B lymfocytech
Fikrová, Petra ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
2. SOUHRN Cílem této diplomové práce je objasnit profil exprese molekuly SWC7 na B buňkách a případně její úlohu ve vyzrávání B lymfocytů. Zrání prasečích B lymfocytů v periferii lze v současné době definovat na základě exprese povrchových molekul CD2 a CD21. Jako experimentální metoda sloužící pro zjištění fenotypu B lymfocytů nesoucích na svém povrchu molekulu SWC7 byla používána průtoková cytometrie. Měření schopnosti produkce protilátek bylo provedeno metodou ELISA. Při základní fenotypizaci bylo zjištěno, že molekula SWC7 se vyskytuje pouze na povrchu IgM+ a CD21+ B buněk, které mohou, ale nemusí, na svém povrchu nést molekulu CD2. Na základě tohoto zjištění byly na sortovacím průtokovém cytometru získány čisté subpopulace IgM+ CD21+ B buněk lišící se v expresi molekul SWC7 a CD2. Čisté subpopulace byly následně kultivovány a analyzovány pro zjištění změny fenotypu. Média ze sortovaných buněk byla odebírána a analyzována metodou ELISA na přítomnost prasečích protilátek IgM, IgG a IgA. Získané výsledky naznačují, že expresi molekul SWC7 na povrchu B buněk lze považovat za znak zrání, protože ztráta této molekuly z povrchu buněk je nevratná a protože pouze SWC7- B buňky jsou schopné produkovat protilátky typu IgM a IgG. Proces zrání prasečích B lymfocytů probíhá pravděpodobně tak, že nejprve dojde u CD2+...
|
|
|
Alergie, jejich komplikace a léky v této souvislosti začátkem 21.století
Březinová, Lenka ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Lenka Březinová Školitel: PharmDr. Petr Jílek, CSc. Název bakalářské práce: Alergie, jejich komplikace a léky v této souvislosti začátkem 21. století Alergie je jedním z hlavních zdravotních problémů většiny moderních společností. I když je známá po staletí, byl v posledních desetiletích zaznamenán dramatický nárůst výskytu tohoto onemocnění. Důležitým pokrokem v alergologii byl objev imunoglobulinu E jako nosiče přímého typu hypersensitivity. Alergické reakce dělíme do šesti základních skupin s tím, že se vzájemně v organismu prolínají. Klinické příznaky předurčují tzv. Mediátory, které pocházejí různých buněk. Mezi nejznámější patří histamin, dále jsou to např. Leukotrieny, eikosanoidy a další. Alergické nemoci mohou komplikovat alergická konjunktivitida, chronická sinusitida, nosní polypy, záněty středouší, atopický ekzém, astma a nejzávažnější a život ohrožující anafylaktický šok. Mezi základní léky k tlumení příznaků alergie patří antihistaminika, které se dělí do I. a II. generace. Další možností léčby je imunoterapie, která má jako jediná potenciál, aby se zabránil nebo změnil průběh alergického onemocnění. Tato léčba je však velice nákladná. Alergie je celosvětová epidemie s...
|
|
|
Současné postupy v diagnostice, léčbě a prevenci infekce vyvolané methicilin rezistentními kmeny bakterie Staphylococcus aureus (MRSA)
Korejsová, Erika ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Vejsová, Marcela (oponent)
Autor: Erika Korejsová Vedoucí práce: Mgr. Klára Konečná, Ph.D. Konzultant: MUDr. Marie Smolíková Název: Současné postupy v diagnostice, léčbě a prevenci infekce vyvolané methicilin rezistentními kmeny bakterie Staphylococcus aureus (MRSA) Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Biologických a lékařských věd Studijní obor: Zdravotnická bioanalytika Staphylococcus aureus je bakterie, která se nachází na nosní sliznici zdravých lidí (20-40%) a na kůži, aniž by způsobovala onemocnění. Za určitých okolností, například při poškození či poranění kůže, sliznic a při snížené obranyschopnosti jedince, může vzniknout infekce. Proto jsou hospitalizovaní pacienti k této infekci mnohem vnímavější. Největší nebezpečí představují kmeny MRSA (methicilin-rezistentní Staphylococcus aureus). Jedná se většinou o multirezistentní kmeny Staphylococcus aureus, kde se kromě rezistence k oxacilinu (methicilinu) vyskytuje i rezistence k dalším antibiotikům. Léčba těchto pacientů je problematická, protože MRSA jsou kmeny značně odolné a přetrvávají v organizmu a v prostředí. Jejich eradikace není jednoduchá. Často při snížené hladině antibiotik v krvi pacienta dochází k reinfekci. To znamená značné finanční náklady pro zdravotnická zařízení, zvláště nemocnice. Proto se zde...
|
|
|
Indukce přirozené imunitní odpovědi proti intracelulární bakterii Francisella tularensis
Sommerová, Gabriela ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Myslivcová Fučíková, Alena (oponent)
Cíl práce: Cílem této rešeršní práce je seznámit čtenáře s problematikou týkající se intracelulární bakterie Francisella tularensis ve vztahu k aktivaci přirozené imunitní odezvy hostitele na přítomnost infekčního agens. Hlavní poznatky: Mezi hlavní cíle této práce patří podat stručný přehled o rozpoznávání F. tularensis cestou Toll-like receptorů, produkce cytokinů a chemokinů a následné zapojení dalších komponent přirozené imunity, mezi které patří neutrofily, NK buňky nebo humorální složky imunitní odpovědi, do které se řadí také komplement. Zpracované informace se opírají o řadu studií prováděných převážně na myších modelech. Závěry: Intracelulární bakterie F. tularensis je známá jako původce onemocnění tularémie. Její vysoká infekčnost spolu s vysokým rizikem úmrtí u plicní formy vyvolává velké obavy ze zneužití této bakterie jako biologické zbraně. Doposud nejsou známy veškeré její mechanismy patogeneze, což je velkým problémem při vývoji účinných vakcín. Indukce přirozené imunity se jeví v obraně hostitele proti F. tularensis jako velmi důležitá. I přes několik desetiletí bádání se však stále nedaří plně objasnit mechanismy F. tularensis, kterými se podílí na manipulaci s hostitelskou buňkou včetně regulace indukce imunitní reakce na infekci vyvolanou F. tularensis. Klíčová slova:...
|
|
|
Taxonomic characterization of new Halorubrum isolates from hypersaline soils.
Horáčková, Markéta ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Kandidát: Markéta Horáčková Název diplomové práce: Taxonomická charakterizace nových izolátů rodu Halorubrum z hypersalinních půd. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd University of Sevilla, Faculty of Pharmacy Department of Microbiology and Parasitology Studijní program: Farmacie Cílem této práce je pokračovat v charakterizaci nových Archaeí rodu Halorubrum izolovaných z hypersalinních půd lokalizovaných u města Huelva v jihozápadním Španělsku. Tato Archaea jsou mikroorganismy vyžadující ke svému životu vysokou koncentraci solí v okolním prostředí. S jejich charakterizací začala minulý rok Ana Durán Viseras a během svého pobytu jsem se podílela na pokračování této charakterizace. Pro doplnění fylogenetické studie jsme amplifikovali gen rpoB jednotlivých Archeí pomocí MLSA a vytvořili fylogenetický strom. Na základě výsledků této studie jsme usoudili, že se jedná o nový druh a započali jsme s fenotypickou charakterizací. U izolované DNA jsme určili obsah guaninových a cytosinových bazí, jež je součástí taxonomických charakterizací nových druhů.
|
|
|
Laboratorní diagnostika infekčních zánětů jater
Šífová, Ivana ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Šifova, I. Laboratorni diagnostika infek nich zan t jater. č ě ů Diplomova prace. Hradec Kralove, 2008 Prace se zabyva problematikou infekčnich zanětů jater, a to hlavně virovymi hepatitidami, ktere jsou velkym zdravotnickym problemem. Popisuje hlavni infekčni agens způsobujici tato onemocněni a jejich laboratorni diagnostiku.
|
|
|
Enzyme kinetic evaluation of several potential inhibitors of certain human cysteine and serine proteases
Hympánová, Michaela ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Janďourek, Ondřej (oponent)
IN CZECH Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Školitelé: prof. Dr. Michael Gütschow RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Kandidát: Michaela Hympánová Název diplomové práce: Hodnocení enzymové kinetiky několika potenciálních inhibitorů lidských proteáz cysteinového a serinového typu Úvod Enzymy řadící se mezi cysteinové a serinové proteázy jsou součástí mnoha fyziologických procesů. Nerovnováha mezi enzymy a jejich endogenními inhibitory patří mezi faktory účastnící se rozvoje řady chorob, například nádorových onemocnění nebo osteoporózy. Syntetické inaktivátory by proto mohly být užitečné v léčbě těchto patologických stavů. Některé látky jsou již ve vývoji a dohledatelné v literatuře. Náplní této diplomové práce je hodnocení inhibičního potenciálu látek syntetizovaných skupinou prof. Gütschowa proti vybraným lidským proteázám. Testované látky patří mezi imidazolové sloučeniny pocházející z N-chráněného cyclohexylalaninu, sloučeniny získané substitucí 2-phenyl-7,8- dihydroimidazo[1,2-a]pyrazin-6(5H)-onu, -nenasycené peptidomimetické sloučeniny, karbamáty, deriváty N,N-dibenzyl-krotonamidu a peptoidy. Cíle Cílem této diplomové práce bylo zhodnotit nové potenciální inhibitory pomocí testování na katepsinech B, L, S a K, které jsou zástupci...
|
|
|
Vyhodnocení aktivity potenciálně antimykotických látek pomocí mikrodiluční bujónové metody III
Zavřelová, Alena ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vyhodnocení aktivity potenciálně antimykotických léčiv mikrodiluční bujónovou metodou III Autor diplomové práce: Alena Zavřelová Vedoucí diplomové práce: Mgr. Klára Konečná, Ph.D. Cíl: Cílem této práce, díky narůstajícímu počtu mykotických onemocnění a narůstajícímu výskytu rezistence, bylo zjistit aktivitu u potenciálně antimykoticky působících látek. Testovaly se nově syntetizované látky, strukturně vycházející z molekuly pyrazinamidu, což je významné antituberkulotikum. Metody: Testování látek probíhalo pomocí mikrodiluční bujónové metody na osmi kmenech patogenních hub, tvořené pěti kmeny kvasinek: Candida albicans, Candida tropicalis, Candida krusei, Candida glabrata, Trichosporon asahii a třemi kmeny vláknitých hub: Aspergillus fumigatus, Absidia corymbifera, Trichophyton mentagrophytes. Výsledky: V rozsahu testovaných koncentrací, z celkového počtu třiceti testovaných látek, vykazovala nejvýraznější antifungální aktivitu látka 5-methyl- 6-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin-2,3-dikarbonitril. Všechny kmeny, kromě Trichophyton mentagrophytes, vykazovaly poměrně slibnou citlivost vůči testovaným látkám. Obecně, nejcitlivějším kmenem byl kmen Candida krusei, kde bylo dosaženo...
|
|
|
Optimalizace metod pro stanovení aktivace receptoru CD44
Skalická, Nela ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Optimalizace metod pro stanovení aktivace receptoru CD44. CD44 je transmembránový glykoprotein přítomný na většině buněčných typů, který je zapojen do řady fyziologických i patologických procesů, taktéž představuje hlavní receptor pro kyselinu hyaluronovou (HA). HA je nesulfatovaný glykosaminoglykan, přítomný ve velké míře v extracelulární hmotě, kde zajišťuje hydrataci buněk, je zapojen do nádorových procesů, ovlivňuje buněčnou migraci, podporuje angiogenezi, podílí se na hojení ran. V této práci jsme se zaměřili na optimalizaci metod sledujících aktivaci, množství a štěpení receptoru CD44 u buněčné linie HT-29. Pomocí metod Western Blot, ELISA a průtokové cytometrie jsme pozorovali množství celkového receptoru a jeho rozštěpených domén. K aktivaci jsme využili HA o molekulové hmotnosti 71 kDa a PMA (Phorbol-12-Myristate-13-Acetate). Po aktivaci došlo k časově závislým změnám množství celkového CD44 i jeho fragmentů. Sledovali jsme také buněčnou smrt v závislosti na přítomnosti HA a PMA. Neprokázali jsme žádný významný vliv těchto látek na viabilitu buněk. Pro vizuální vyhodnocení translokace odštěpené intracelulární domény do jádra jsme použili fluorescenční a konfokální...
|
|
|
Proteomová analýza secernovaných proteinů Francisella tularensis
Konečná, Klára ; Hernychová, Lenka (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent) ; Bílková, Zuzana (oponent)
Název disertační práce: Proteomová analýza secernovaných proteinů Francisella tularensis Fakultativní intracelulární bakterie F. tularensis je původcem onemocnění zvaného tularemie. Přestože je k dněšní době dostupná široká škála nových poznatků týkající se tohoto patogena, doposud mechanismy patogeneze onemocnění tularemie nebyly zcela objasněny. Náplň naší práce se zakládala na analýze a identifikaci proteinů kultivačních filtrátů bakterie F. tularensis tří kmenů (LVS, FSC200, SchuS4). Mezi identifikovanými proteiny byly vyhledávány kandidátní sekretované proteiny a proteiny, které by mohly pomoci s objasněním molekulárních mechanismů patogeneze onemocnění vyvolaného F. tularensis. Nejlepším identifikovaným proteinovým kandidátem na sekreci je enzym kyselá fosfatáza, u kterého bylo prokázáno, že sehrává důležitou roli při úniku bakterie F. tularensis z fagosomu. Pozornost byla také věnována nově popisovanému mechanismu bakteriální sekrece, zprostředkovaného membránovými vesikly. Pomocí transmisní elektronové mikroskopie bylo prokázáno, že F. tularensis kmene LVS a FSC200 sekretuje membránové vesikly do extracelulárního prostředí. Klíčová slova: Francisella tularensis, sekreční systémy, proteiny kultivačního filtrátu, sekretované proteiny, vesikly vnější membrány
|
host ::
RSS.