|
|
Změna exprese transportních proteinů během obstrukční cholestázy u potkanů I
Šindelářová, Jana ; Doleželová, Eva (vedoucí práce) ; Zemánková, Lenka (oponent)
Jana Šindelářová Změna exprese transportních proteinů během obstrukční cholestázy u potkanů I Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Cílem diplomové práce bylo potvrzení cholestatického poškození jater navozeného podvazem žlučovodu v trvání 28 dnů pomocí biochemické analýzy séra a analýzy exprese jaterních transportérů pro uptake látek Ntcp, Oatp1a1, Oatp1a4, Oatp1b2 a Oat2 na úrovni mRNA i proteinu u potkanů. Metody: Potkani kmene Wistar (n = 6, v každé skupině; 280 - 320g) byli rozděleni do dvou skupin: kontrolní skupina sham-operovaných potkanů (Sham) a skupina s podvazem žlučovodu trvajícím 28 dní (BDO). Biochemická analýza séra byla provedena pomocí Cobas Integra ® 800. Změny v expresi mRNA a proteinů byly hodnoceny qRT-PCR a Western blot analýzou. Výsledky: Hladina žlučových kyselin byla zvýšená u BDO skupiny zvířat na 454 %, hladina celkového bilirubinu na 4111 % a hladina konjugovaného bilirubinu na 7313 % v porovnání s kontrolní skupinou. Aktivita ALP byla zvýšena na 238 %, aktivita GMT na 2826 %, aktivita ALT na 1200 % a aktivita AST na 1387 % oproti kontrolní skupině. U BDO skupiny zvířat bylo pozorováno snížení hladiny mRNA u Ntcp transportéru na 51 % a Oatp1a4 proteinu na 38 %. Změny hladiny Oatp1a1, Oatp1b2 a Oat2 mRNA...
|
|
|
Změna exprese transportních proteinů během obstrukční cholestázy u potkanů II
Skořepová, Zuzana ; Doleželová, Eva (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
4 Abstrakt Zuzana Skořepová Změna exprese transportních proteinů během obstrukční cholestázy u potkanů II Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíle práce: Cílem diplomové práce bylo ověření cholestatického poškození jater navozené podvazem žlučovodu po dobu trvání 28 dnů u potkanů analýzou exprese efluxních transportních proteinů v játrech (Bsep, Bcrp, Mrp2, Mdr1, Mdr2, Mrp3, Mrp4) na úrovni mRNA a proteinu. Metody: Potkani kmene Wistar (n = 6, v každé skupině; 280 - 320 g) byli rozděleni do dvou skupin: kontrolní skupina sham-operovaných potkanů (Sham) a BDO skupina (obstrukce žlučovodu v trvání 28 dnů). Byla provedena analýza exprese efluxních transportních proteinů na úrovni mRNA a proteinu metodou qRT-PCR a Western blot. Výsledky: Ve skupině BDO bylo pozorováno významné zvýšení mRNA exprese u Mdr2 proteinu na 303 %, Mdr1b na 340 % a Mrp3 na 9900 % v porovnání s kontrolní skupinou. Exprese Mrp2 mRNA byla snížena na 42 %. Významné zvýšení exprese proteinu ve skupině BDO bylo prokázáno u Bcrp na 160 %, Mdr1 na 1010 %, Mrp3 na 940 % a Mrp4 na 140 % v porovnání se Sham skupinou. Exprese proteinu byla významně snížena u Mrp2 na 31 %, Bsep na 59 % a Mdr2 na 82 % v porovnání s kontrolní skupinou. Závěr: Z výsledků diplomové práce vyplývá, že při obstrukční...
|
|
| |
|
|
Sledování změn exprese VCAM-1 v experimentální aterogenezi
Mertlíková, Veronika ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Veronika Mertlíková Školitel: Doc. PharmDr. Petr Nachtigal Ph.D. Název diplomové práce: Sledování změn exprese VCAM-1 v experimentální aterogenezi. Cílem práce bylo popsat expresi VCAM-1 ve stěně cévy u normocholesterolemických myší kmene C57BL/6J, kterým byla podávána standardní laboratorní dieta a u hypercholesterolemických apoE-deficientních myší. Jako experimentální model jsme použili samce normocholesterolemického myšího kmene C57BL/6J a apoE-deficientní myši ve věku 6 týdnů. Samci myšího kmene C57BL/6J byli krmeni standardní laboratorní dietou a apoE-deficientní myši cholesterolovou dietou po dobu 8 týdnů. Poté byla provedena biochemická analýza vzorků krve a imunohistochemická analýza odebraných segmentů aortálního sinu a aortálního oblouku. V porovnání s kontrolním kmenem myší C57BL/6J byla u apoE-deficientních myší nalezena vysoká hladina cholesterolu v krvi. Aterosklerotické pláty vyvíjí pouze tyto hypercholesterolemické myši. Pomocí imunohistochemických metod jsme sledovali expresi VCAM-1 v aortě u C57BL/6J myší, kde nebyly přítomny aterosklerotické pláty, dále u apoE-deficientních myší v místech bez plátů a v oblasti plátů. V oblastech bez lézí byla exprese VCAM-1 detekována...
|
|
|
Imunohistochemická analýza exprese fosforylované formy Smad2 po podávání atorvastatinu u experimentální aterogeneze
Vybulková, Lucie ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Biologických a lékařských věd Kandidát Mgr.Lucie Vybulková Konzultant Doc.PharmDr.Petr Nachtigal, PhD Název rigorózní práce Imunohistochemická analýza exprese fosforylované formy Smad2 po podávání atorvastatinu u experimentální aterogeneze Cíl práce: Cílem této rigorózní práce bylo popsat vliv atorvastatinu na expresi fosforylované formy Smad2 v aterosklerotických plátech ApoE/LDLr-deficitních myší pomocí imunohistochemických metod. Dále byl sledován vliv atorvastatinu na spektrum lipidů a velikost aterosklerotických plátů. Metody: V experimentu byly použity samice kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E a LDL- receptoru. Byla u nich provedena biochemická analýza vzorků krve, histologické barvení olejovou červení k detekci lipidů ve tkáních, kvantitativní analýza velikosti lézí a imunohistochemická analýza vzorků aorty se semilunárními chlopněmi pro detekci exprese Smad2 s využitím metodiky Avidin-Biotin a detekcí pomocí DAB. Výsledky: Při biochemické analýze jsme potvrdili nárůst hladin celkového cholesterolu a VLDL po podávání atorvastatinu. Kvantifikací aterosklerotických lézí byla zjištěna menší velikost lézí u ATV skupiny myší. Imunohistochemickou analýzou jsme prokázali expresi fosforylované formy Smad2 v...
|
|
|
Sledování exprese vybraných markerů kaskády pro transformující růstový faktor u myšího modelu aterosklerózy
Pagurko, Lukáš ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Lukáš Pagurko Sledování exprese vybraných markerů kaskády pro transformující růstový faktor u myšího modelu aterosklerózy. Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Sledovali jsme expresi endoteliální NO syntázy (eNOS) v aterosklerotických plátech myší za použití imunohistochemických metod. Cílem bylo prokázat jestli atorvastatin ovlivňuje expresi eNOS bez hypolipidemických účinků. Metody: Použili jsme samice kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E (apoE) a LDL-receptoru (LDLr) ve věku 16 týdnů. Byla provedena biochemická analýza vzorků krve a imunohistochemická analýza segmentů tkáně tvořených aortou a horní polovinou srdce. Pro detekci exprese eNOS byla použita metodika EnVision s detekcí pomocí DAB. Výsledky: V biochemické analýze jsme zjistili, že osmitýdenní podávání atorvastatinu statisticky významně zvýšilo hladiny celkového cholesterolu. U všech řezů v kontrolní i atorvastatinové skupině byla pozorována přítomnost aterosklerotických lézí, přičemž u řady z nich byla již nalezena ateromová nekrotická jádra. Podávání atorvastatinu vedlo k signifikantnímu poklesu velikosti aterosklerotických plátů ve srovnání s neléčenou skupinou. Podávání atorvastatinu dále vedlo k výraznému navýšení exprese eNOS zejména na povrchu...
|
|
|
Spirulina platensis a její vliv na aterogenezi u myšího modelu aterosklerozy
Žáková, Marie ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Marie Žáková Spirulina platensis a její vliv na aterogenezi u myšího modelu aterosklerózy Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Sledovali jsme vybrané aterosklerotické a zánětlivé markery u apoE-deficientních myší krmených Spirulinou platensis k ověření jejích hypolipidemických a protizánětlivých účinků. Metody: Použily jsme samce myši kmene C57BL/6J s deficitem apolipoproteinu E (apoE-/-) ve věku 3 měsíců. Zvířata byla rozdělena do 2 skupin (kontrolní a zkoušené). Obě skupiny byly krmeny po dobu 8 týdnů cholesterolovou dietou. Zkoušené skupině bylo přidáváno 20 mg/kg/den Spiruliny platensis. Provedená biochemická analýza sloužila k zjištění lipidového spektra v krvi. K vizualizaci velikosti aterosklerotické léze a detekci lipidů bylo provedeno histologické barvení olejovou červení. Imunohistochemická analýza sloužila k průkazu množství exprese VCAM-1. Výsledky: Biochemická analýza neprokázala kromě snížení LDL cholesterolu významný pokles celkového cholesterolu. U obou skupin myší byla histologickým barvením olejovou červení ilustrována přítomnost aterosklerotických lézí s kumulací lipidů, výsledky se mezi skupinami nelišily. Imunohistochemickou analýzou byl ve skupině, které byla podávána Spirulina, prokázán oproti kontrolní skupině...
|
|
|
Sledování vlivu exprese receptorů pro transformující růstový faktor během aterogeneze u myšího modelu aterosklerózy
Vybulková, Lucie ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Lucie Vybulková Sledování vlivu exprese receptorů pro transformující růstový faktor během aterogeneze u myšího modelu aterosklerózy Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Cílem práce bylo zavedení metodiky pro detekci TGF-βRI, subtypu ALK-5, a sledování jeho exprese v kořenu aorty u apoE/LDLr-deficientních myší. Metody: S využitím samic kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E a LDL- receptoru byla provedena biochemická analýza vzorků krve, histologické barvení olejovou červení k detekci lipidů ve tkáních a imunohistochemická analýza segmentů tkáně pocházejících z aorty a horní poloviny srdce. Pro detekci exprese ALK-5 byla použita metodika EnVision s detekcí pomocí DAB. Výsledky: Pomocí biochemické analýzy jsme potvrdili předpokládaný nárůst hladin cholesterolu u myší krmených cholesterolovou dietou ve srovnání se skupinou myší na standardní dietě. Při histologickém barvení olejovou červení jsme detekovali vyšší tvorbu aterosklerotických lézí u myší s cholesterolovou stravou. Imunohistochemickou analýzou exprese ALK-5 jsme prokázali vysokou expresi ALK-5 v tunica media a v aterosklerotických plátech bez výrazného rozdílu u obou skupin myší. Závěr: Výsledky ukázaly, že exprese ALK-5 není ovlivněna hladinami cholesterolu...
|
|
| |
|
|
Evaluace www stránek vybraných municipalit
Doleželová, Eva
Doleželová, Eva. Evaluace www stránek vybraných municipalit. Diplomová práce, Brno 2014. Tato práce vytváří podklad pro rekonstrukci webové stránky Městské části Brna-střed. Za tímto účelem bylo provedeno hodnocení webu Městské části Brna-střed a třech obdobných webů: Nové Město na Moravě, Praha 1 a Plzeň. Práce posuzuje, zdali stránky zvolených municipalit dodržují platnou legislativu České republiky a to zákona 106/1999 Sb. o svobodném přístupu k informacím a zákona 81/2006 Sb., kde je ukotvena povinnost orgánů městské samosprávy umožnit seznámení s informacemi na webových stránkách i hendikepovaným osobám. Také byla provedena analýza použitelnosti vybraných webových stránek municipalit a kvantitativní průzkum v lokalitě Brna-střed pro stanovení současných potřeb občanů na obsah webové stránky městské samosprávy. Výsledky hodnocení poukazují na významné nedostatky při naplňování zákonů. V práci byla stanovena vzorová řešení pro zadané úkoly použitelnosti internetových stránek a průzkum odhalil nespokojenost obyvatel Brna-střed s obsahem informací uvedenými na stránkách.
|
host ::
RSS.