|
Zavedení metody MST pro studium interakcí mezi biomolekulami
Krátký, Josef ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Josef Krátký Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Zavedení metody MST pro studium interakcí mezi biomolekulami Termoforéza v mikroměřítku (MST) je v současné době uznávanou metodou při studiu interakcí mezi biomolekulami, pomocí usměrněného pohybu biomolekul v teplotním gradientu je možné analyzovat prakticky jakékoliv interakce, kde dochází ke změně vlastností analytů. Tato práce byla zaměřena na zavedení metody pro studium interakcí proteinů s nízkomolekulárními látkami se zaměřením na ověření možnosti využití MST pro sledování interakce glutathion-S-transferasy (GST) s vybranými terpeny ((-)-fenchon, (-)-isopulegol, (+)-isomenthon, (-)-karvon, (+)-karvon, piperiton a thujon). Dalším cílem bylo stanovení vlastností terpenů pomocí klasických spektrofluorimetrických metod a MST. V práci bylo zjištěno spektrofluorimetrickými metodami, že terpeny ovlivňují fluorescenční spektra pro lidský sérový albumin a že neovlivňují fluorescenční spektrum pro barvivo NHS, které je využíváno pro přípravu vzorků pro MST. Dále byla v práci stanovena aktivita GST a bylo studováno její ovlivnění pomocí monoterpenů. GST po přidání terpenů vykazuje nižší aktivu. Metodou MST pak bylo zjištěno,...
|