|
|
Doprava genomů neobalených DNA virů do buněčného jádra
Bílková, Eva ; Forstová, Jitka (vedoucí práce) ; Hatáková, Ladislava (oponent)
Většina DNA virů musí pro úspěšnou infekci nejprve dopravit svůj genom do buněčného já- dra, které jim poskytuje faktory nutné pro jejich replikaci a transkripci. Tato práce je zaměřena na tento proces u malých neobalených DNA virů. Popisuje dopravu genomů adenovirů, parvo- virů, papillomavirů a polyomavirů do buněčného jádra. Tyto viry jsou endocytovány buňkou a putují do určitého membránou obaleného kompartmentu. Virová částice prochází změnami vlivem okolního prostředí a aktivity buněčných enzymů, které vyústí v její únik z obaleného váčku za použítí virových proteinů. Některé viry pro pohyb v cytoplazmě k jádru využívají přímé interakce s komponentami cytosketelárního transportu. Ve většině případů virová DNA vstupuje do buněčného jádra přes jaderný pór, existují ale důkazy o alternativních mechanis- mech. Tato práce pojednává o časné fázi životních cyklů vybraných virů a cílení jejich genomů do jádra. Pochopení mechanismů jaderného importu virové DNA může přispět k objevu nových protivirových způsobů léčby.
|
|
|
Vliv fosforylace na jaderný import virových proteinů a komplexů
Pokorná, Karolína ; Forstová, Jitka (vedoucí práce) ; Roučová, Kristina (oponent)
Replikace celé řady virů probíhá v jádře hostitelské buňky. Tyto viry objevily způsob jak překonat překážku v podobě jaderného obalu a často doslova přimět buňku, aby zajistila jaderný import jejich proteinů a genomu. Pro mnoho virových proteinů je důležité, aby byl jejich transport do jádra přesně načasován. Díky tomu je zajištěn ideální průběh replikace viru, případně je umožněno, aby protein během životního cyklu viru plnil různé funkce v závislosti na své lokalizaci. Jedním ze způsobů regulace jaderného importu virových proteinu je jejich fosforylace. Fosforylace může jaderný import virových proteinů a komplexů kontrolovat různými způsoby. Například může ovlivnit afinitu virového proteinu k importinům nebo jiným buněčným proteinům, nebo také vyvolat změnu konformace proteinu, která vede k vystavení lokalizační sekvence.
|
|
|
Characterisation of the mechanisms regulating 53BP1 nuclear transport
Liďák, Tomáš ; Macůrek, Libor (vedoucí práce) ; Brábek, Jan (oponent)
Protein 53BP1 se významně podílí na buněčné odpovědi na poškození DNA a udržování integrity genomu. Nedávno bylo popsáno, že je transportován do jádra prostřednictvím importinu ß. Cílem této práce bylo identifikovat jaderný lokalizační signál proteinu 53BP1, a to s využitím metod fluorescenční mikroskopie a imunoprecipitace. Získané výsledky ukázaly, že protein 53BP1 váže importin ß prostřednictvím svých dvou úseků bohatých na bazické aminokyseliny (1667-KRK-1669 a 1681-KRGRK- 1685). Tyto úseky byly rovněž nutné pro jeho vstup do jádra. Krátký polypeptid zahrnující tyto dva úseky vázal importin ß a umožnil transport GFP do jádra. Dále jsem se zaměřil na testování vlivu fosforylace serínu 1678 na transport proteinu 53BP1 do jádra. Mutanta 53BP1-S1678D, která mimikuje fosforylovaný serín na pozici 1678, měla výrazně sníženou schopnost vázat importin ß a byla hůře transportována do jádra. Nicméně žádné změny v transportu proteinu 53BP1 do jádra nebyly pozorovány, a tak se zdá, že fosforylace serínu 1678 cyklin-dependentními kinázami nebude významně regulovat jeho transport. Závěrem lze konstatovat, že protein 53BP1 má klasický bipartitní jaderný lokalizační signál. I když se transport proteinu 53BP1 do jádra nezdá být regulován v průběhu buněčného cyklu, může být regulován v odpovědi na jiné podněty....
|
|
|
Vliv fosforylace na jaderný import virových proteinů a komplexů
Pokorná, Karolína ; Forstová, Jitka (vedoucí práce) ; Roučová, Kristina (oponent)
Replikace celé řady virů probíhá v jádře hostitelské buňky. Tyto viry objevily způsob jak překonat překážku v podobě jaderného obalu a často doslova přimět buňku, aby zajistila jaderný import jejich proteinů a genomu. Pro mnoho virových proteinů je důležité, aby byl jejich transport do jádra přesně načasován. Díky tomu je zajištěn ideální průběh replikace viru, případně je umožněno, aby protein během životního cyklu viru plnil různé funkce v závislosti na své lokalizaci. Jedním ze způsobů regulace jaderného importu virových proteinu je jejich fosforylace. Fosforylace může jaderný import virových proteinů a komplexů kontrolovat různými způsoby. Například může ovlivnit afinitu virového proteinu k importinům nebo jiným buněčným proteinům, nebo také vyvolat změnu konformace proteinu, která vede k vystavení lokalizační sekvence.
|
|
|
Doprava genomů neobalených DNA virů do buněčného jádra
Bílková, Eva ; Forstová, Jitka (vedoucí práce) ; Hatáková, Ladislava (oponent)
Většina DNA virů musí pro úspěšnou infekci nejprve dopravit svůj genom do buněčného já- dra, které jim poskytuje faktory nutné pro jejich replikaci a transkripci. Tato práce je zaměřena na tento proces u malých neobalených DNA virů. Popisuje dopravu genomů adenovirů, parvo- virů, papillomavirů a polyomavirů do buněčného jádra. Tyto viry jsou endocytovány buňkou a putují do určitého membránou obaleného kompartmentu. Virová částice prochází změnami vlivem okolního prostředí a aktivity buněčných enzymů, které vyústí v její únik z obaleného váčku za použítí virových proteinů. Některé viry pro pohyb v cytoplazmě k jádru využívají přímé interakce s komponentami cytosketelárního transportu. Ve většině případů virová DNA vstupuje do buněčného jádra přes jaderný pór, existují ale důkazy o alternativních mechanis- mech. Tato práce pojednává o časné fázi životních cyklů vybraných virů a cílení jejich genomů do jádra. Pochopení mechanismů jaderného importu virové DNA může přispět k objevu nových protivirových způsobů léčby.
|
host ::
RSS.