Original title:
Potenciál cholesterolem obalených cyklodextrinů a nízkodenzitního lipoproteinu pro zvýšení účinnosti kryokonzervace epididymálních spermií hřebců
Translated title:
Potential of cholesterol-loaded cyclodextrins and low density lipoprotein for increasing the efficiency of cryopreservation of epididymal sperms in stallions
Authors:
Janošíková, Martina ; Rajmon, Radko (advisor) Document type: Doctoral theses
Year:
2016
Language:
cze Publisher:
Česká zemědělská univerzita v Praze Abstract:
[cze][eng] V případě náhlého úmrtí, nutné kastrace nebo poranění reprodukční soustavy hřebce, znemožňující odběr ejakulátu, lze pro zachování genetického potenciálu výjimečných jedinců využít epididymálních spermií. Prakticky jediným způsobem, jak dlouhodobě uchovat fertilizační potenciál spermií, je kryokonzervace. Tento proces však navozuje nevratné změny, které jsou příčinou sníženého počtu oplození schopných spermií po rozmrazení. Epididymální spermie mají jiné vlastnosti než ejakulované a hůře se uchovávají. Proto se neustále hledají způsoby, jak jejich kryokonzervaci zefektivnit.
Obecně nejpoužívanějšími kryoprotektanty jsou glycerol a vaječný žloutek. Navzdory pozitivním účinkům je glycerol pro buňky toxický a vaječný žloutek obsahuje i složky, které působí na metabolismus spermií negativně. Zvýšení efektivity kryokonzervačních protokolů by se pravděpodobně dalo dosáhnout náhradou toxických komponent při současném využití průmyslově vyráběných účinných frakcí žloutku.
Předkládané téma disertační práce se bude zabývat použitím cholesterolem obalených cyklodextrinů spolu s nízkodenzitními lipoproteiny při kryokonzervaci epididymálních spermií.
Hlavní metody: HPLC, Western blot, elektroforéza, fluorescenční značení, počítačem asistovaná analýza spermií(CASA).In the case of sudden death or injury stallion reproductive system or necessary castration preventing the collection of semen can to preserve the genetic potential of exceptional individuals take advantage of epididymal sperm. Virtually the only way, how to preserve fertilizing sperm POTENTIAL for long time IS cryopreservation. However, this process induces irreversible changes that are the cause of the reduced number of sperm capable of fertilization after thawing. Epididymal sperm cells have properties different from the ejaculated, harder to keep. Therefore, they are constantly looking for ways to streamline their cryopreservation.
GENERAL most commonly used cryoprotectants include glycerol and Egg yolk. Despite the positive effects is glycerol toxic to cells and Egg yolk also contains ingredients that act on sperm metabolism negatively. Increasing the efficiency of cryopreservation protocols themselves likely to be achieved by replacing toxic components while leveraging industry-produced active yolk fractions.
Submitted dissertation topic itself will deal with the use of cholesterol-loaded cyclodextrins Along with low density lipoproteins, the cryopreservation of epididymal sperm.
Main method: HPLC, Western blot, electrophoresis, fluorescent labels, computer-assisted sperm analysis (CASA).
Keywords:
cyklodextrin; hřebec; kryokonzervace; nízkodenzitní lipoprotein