|
|
Studium interakce platinových cytostatik s BCRP lékovým transportérem pomocí MTT cytotoxicitního testu
Horká, Markéta ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
AAbbssttrraakktt Rezistence onkologických onemocnění na léčbu cytostatiky patří mezi nejzávažnější problémy protinádorové terapie. Jedním z možných mechanismů vzniku rezistence vůči cytostatikům je zvýšení exprese efluxních transportérů, které snižují koncentraci použitých léčiv v buňkách. Tato práce je zaměřena na studium interakce klinicky používaných platinových cytostatik (cisplatina, karboplatina a oxaliplatina) s buněčným transportérem BCRP, který je považován za velmi důležitý z hlediska vzniku rezistence nádorových buněk vůči cytostatické léčbě. Testování bylo provedeno na buněčné linii MDCKII (parentní linie bez BCRP) a na linii MDCKII-BCRP, která byla transfekovaná genem pro BCRP. Při prvním testování bylo zjištěno, že při použití oxaliplatiny není životaschopnost buněk přítomností BCRP výrazněji ovlivněna. Transportér projevil důležitou roli v testech s cisplatinou a karboplatinou, protože buňky transfekované genem pro BCRP vykazovaly signifikantně vyšší životaschopnost než buňky bez tohoto transportéru. Inhibice transportéru specifickým inhibitorem BCRP fumitremorginem C však neměla na životaschopnost buněk MDCKII-BCRP vliv. Z těchto výsledků tedy vyplývá, že rezistence transfekovaných buněk vůči csplatině a karboplatině je způsobena jiným mechanismem. Zvýšená rezistence může být způsobena EGFP,...
|
|
|
Pokračování studie Kuopio 75+: Prevalence ortostatické hypotenze
Henzlová, Veronika ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
Kuopio studie 75+: Prevalence orthostatické hypotenze Veronika Henzlová Abstrakt Tato diplomová práce se zabývá prevalencí orthostatické hypotenze u starších lidí 75 let žijících doma. Data byla získána z pokračování Kuopio 75+ studie provedené v roce 2003 ve Finsku a zpracována pomocí programu SPSS 14. Byla zjištěna 23,7% prevalence orthostatické hypotenze. Nebyl nalezen rozdíl v prevalenci mezi pohlavími, věkovými skupinami a v kategoriích systolického krevního tlaku.
|
|
|
Mechanizmy vzniku rezistence vůči platinovým cytostatikům
Bouška, Petr ; Štaud, František (oponent) ; Čečková, Martina (vedoucí práce)
1. Abstrakt Ačkoliv první platinová sloučenina, cisplatina, byla poprvé popsána již v roce 1845, její biologická aktivita byla objevena o více než 100 let později. Od té doby je cisplatina a její klinicky využívané analogy karboplatina a oxaliplatina široce používána pro léčbu mnoha lidských karcinomů. Mezi ně patří zejména ovariální, cervikální, renální a nemalobuněčný plicní karcinom, karcinom hlavy a krku, prsu, tlustého střeva, žaludku, sarkom a lymfom. Bohužel je léčba často doprovázena vážnými nežádoucími účinky, ze kterých nefrotoxicita, periferní neurotoxicita a útlum kostní dřeně patří mezi ty nejzávažnější. Další významnou překážkou v jejich klinickém využití je vznik lékové rezistence. Tato práce hodnotí možné mechanismy vzniku rezistence na platinové sloučeniny. Jsou rozmanité a zahrnují (i) sníženou akumulaci platinových sloučenin způsobenou influxními (Aquaporin 9, CTR1, OCT1, OCT2) a efluxními (ATP7A, ATP7B, ABCG2) transportéry; (ii) zvýšenou detoxifikaci pomocí thiolových sloučenin glutathionu a metallothioneinu; (iii) zvýšenou schopnost opravovat jaderná poškození (NER, MMR a homologní rekombinace), zvýšenou toleranci k jaderným poškozením (Replicative bypass), inhibici pro-apoptických faktorů (kaspáza-3, -8, Fas a další) a nebo zvýšenou expresi inhibitorů apoptózy (Xiap, Bcl-2, Bcl-xL)....
|
|
|
Studium vlivu EGFP na cytotoxicitu platinových cytostatik
Musilová, Markéta ; Štaud, František (oponent) ; Čečková, Martina (vedoucí práce)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Mgr. Markéta Musilová Rigorózní práce Studium vlivu EGFP na cytotoxicitu platinových cytostatik Abstrakt Tato práce je zaměřena na studium role EGFP v rezistenci nádorových buněk vůči platinovým cytostatikům (cisplatině, karboplatině a oxaliplatině). Práce navazuje na předchozí výsledky experimentů s BCRP lékovým efluxním transportérem, které naznačily, že zvýšená rezistence nádorových buněk vůči platinovým cytostatikům je patrně způsobena spíše přítomností EGFP než vlivem efluxního transportéru. Pro potvrzení této hypotézy byla s uvedenými platinovými cytostatiky provedena série MTT cytotoxicitních testů na parentní buněčné linii Hep2 a linii Hep2-EGFP transferované pro expresi EGFP. Výsledky prokázaly vyšší toleranci buněk exprimujících EGFP vůči působení platinových cytostatik oproti buňkám parentním. Dle získaných výsledků usuzujeme, že k interakci mezi EGFP a platinovými cytostatiky skutečně dochází, což může vést ke zkresleným interpretacím výsledků cytotoxicitních studií.
|
|
| |
|
|
Nové přístupy léčby prsního nádoru
Ahmadimoghaddam, Davoud ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Breast cancer is a malignant tumor that originates in the cells of the breast both in women and men. It is the second leading cause of cancer death in women today. Risk factors causing breast cancer in humans comprise, among others, prolonged exposure to estrogen, ionizing radiation, genetic predisposition (BRCA1, BRCA2, others), sedentary lifestyle, high-fat diet, alcohol, and tobacco smoking. Classical treatment strategies include chemotherapy, surgery and radiotherapy. The aim of this diploma thesis was to review recent developments in breast cancer treatment, such as endocrine therapy, molecular targeting therapy as well as breast cancer stem cells.
|
|
|
Principy transportu léčiv přes placentu: nové aspekty pro farmakoterapii v těhotenství
Schönwälderová, Denisa ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
8. SOUHRN Po thalidomidové aféře se náhled na farmakologickou nedostupnost placenty významně změnil. Následně byl přijat názor, že placentu prostupuje v podstatě jakákoliv chemická látka. Jelikož je potřeba léčit chronické choroby matky i během těhotenství, strhla se vlna výzkumů, která měla dát této léčbě racionální podklad. Postupné získávání informací o jednotlivých složkách placentární bariéry umožnilo vznik in vitro a in vivo modelů, které podpořily studium léčiv. Syncytiotrofoblast hraje důležitou roli v rychlosti přestupu léčiv přes bariéru. Pro distribuci léčiv je nezbytné uvažovat změny ve farmakokinetice během těhotenství (vazba na bílkoviny, distribuční objem, krátký eliminační poločas, polarizace, pH gradient mezi sérem matky a plodu). Pro většinu léčiv je nejdůležitějším mechanismem transportu pasivní difuze. Klíčovou roli v definitivním prostupu do fetálního kompartmentu má skupina ABC proteinů, v placentě zastoupena především P-glykoproteinem, skupinou MRP transportních proteinů a ABCG2 transportérem. P-gp byl objeven jako první a je nejlépe prozkoumán. Bylo definováno mnoho jeho substrátů a inhibitorů, jejichž vzájemné interakce jsou stěžejní pro racionální farmakoterapie v těhotenství. I když byla v rámci vlastní placentární tkáně definována celá řada enzymů (včetně izoforem CYP450), zdá...
|
|
|
Sledování exprese ABC - transportérů na transkripční úrovni
Kalmanová, Milada ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Lidská ABC (ATP-binding cassette) rodina aktivních transportů obsahuje asi 50 funkčně rozdílných transmembránových proteinů. Využívají energii z hydrolýzy ATP a transportují různé druhy endogenních a exogenních sloučenin přes membrány proti koncentračnímu spádu. ABC transportéry hrají důležité role v absorpci, distribuci a exkreci léků. Některé jsou také schopné udělit mnohočetnou lékovou rezistenci nádorovým buňkám. Sledovat expresi ABC transportérů na transkripční úrovni lze v dnešní době několika metodami. Patří mezi ně Northern blotting, "RNase protection assay", real-time RT-PCR a microarray analýza. V této práci jsou shrnuty aktuální informace o kvantifikaci ABC transportérů, které transportují léky. Bylo zjištěno, že ABC transportéry jsou exprimovány v játrech, ledvinách, gastrointestinálním traktu, hematoencefalické bariéře, placentě a dalších tkáních.
|
|
|
Exprese a role P-glykoproteinu a BCRP transportního proteinu a karcinomu prsu
Kvaková, Lucia ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
ABC proteiny tvoří největší genovou rodinu transportérů. P-gp a BCRP jsou dosud nejvíc prozkoumanými členy ABC rodiny, které přes buněčné kompartmenty přenášejí různé endogenní a exogenní sloučeniny včetně léků. Tímto způsobem transportéry chrání zdravou lidskou tkáň před cizorodými látkami, které mohou poškodit strukturu nebo funkci tkáně. V posledních letech bylo vytvořeno mnoho studií, které hledali vztah mezi expresí ABC transportérů v nádorových buňkách u karcinomu prsu a selháním její léčby. Bylo potvrzeno, že exprese P-gp a BCRP probíhá u karcinomu prsu ve vyšší míře a může být zodpovědná za snížení koncentrace cytotoxických léků v buňce a následnému selhání léčby. Bylo vytvořeno mnoho P-gp a BCRP modulátorů, které zabránili expresi transportérů a tím následně zvýšili citlivost na léky. To vytváří nové a perspektivní strategie léčby, jako například kombinaci klasických chemoterapeutik spolu s látkami, které inhibují a/nebo chrání buňku před lékovou rezistencí.
|
|
|
Steps towards the development of an in vitro assay of early endosome fusion
Švédová, Lucie ; Kučerová, Marta (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
7. SHRNUTÍ Tato diplomová práce byla zpracována pod záštitou programu SOCRATES/ ERASMUS na Welsh School of Pharmacy v Cardiffu. Cílem mé práce bylo modifikovat již vyvinutou metodu (Wessling-Resnick M. et al., January 1990) a přizpůsobit ji podmínkám tamní laboratoře. Předmětem studia byla subpopulace tzv. časných endosomů, které vznikají těsně při povrchu plasmatické membrány po rozpadu klatrinového pláště. Jednou z jejich vlastností je schopnost spojovat se, fúzovat, čímž vzniká nadbytečná membrána potřebná pro další osud těchto organel. Ve svých experimentech jsem pracovala se dvěma komplementárními markery. Jedním z nich byl avidin navázaný na enzym -galaktosidasu, která štěpí kromě laktosy také syntetické substráty za vzniku příslušných produktů. V této studii byl produktem specifické hydrolýzy methylumbeliferylgalaktosidu intenzivně fluoreskující methylumbeliferon. Druhým markerem byl biotinylovaný transferin. Podstatou komplementarity markerů je vysoká afinita avidinu k biotinu. Dvě skupiny buněk byly inkubovány se zmíněnými markery a po jejich akumulaci v endosomech následovala mechanická destrukce buněk za uvolnění organel. Oba typy endosomů byly smíchány v prostředí podporujícím jejich fúzi. Spojením dvou endosomů nesoucích různé markery došlo k jejich rychlé kombinaci za vzniku komplexu...
|
host ::
RSS.