|
Development of an LC-MS method for determination of new antimalarial drugs in biological matrices.
Klimeš, Jiří ; Kučera, Radim (oponent) ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce)
Artemisin a jeho deriváty, především artesunat, jsou nejdůležitější skupinou léků používaných v klinické praxi v léčbě malárie. Významná a charakteristická je pro ně endoperoxidická skupina. WHO doporučuje tyto látky v kombinaci s jinými déle působícími antimalariky (lumefantrinem, piperaquinem) jako léky volby. Jelikož ve struktuře těchto látek chybí UV nebo fluorescentně detekovatelné chromofory, dřívější metody pro stanovení těchto látek využívaly post-column on line derivatizaci nebo elektrochemickou detekci v redukujícím módu. Tyto metody ovšem vykazovaly malou selektivitu a sensitivitu. V rámci této práce byl proveden kompletní vývoj LC-MS metody pro stanovení artesunatu a jeho hlavního metabolitu dihydroartemisinu v biologických vzorcích. Vývoj zahrnoval tyto části: ladění ESI - triple quadrupole hmotového spektrometru a optimalizaci chromatografických podmínek, především pak pH a složení mobilní fáze. Artesunat (ARST) a dihydroartemisin (DHA) byly stanovovány v lidské plasmě za použití artemisinu jako vnitřního standardu. Různé úpravy vzorků plasmy, a to liquid-liquid extrakce a protein precipitace, byly optimalizovány a porovnány. Na základě prevalidačních údajů byl zjištěn spodní limit kvantifikace při úpravě liqud-liquid extrakcí 2,5 a 3,0 ng/ml pro DHA a ARST za použití 400 μl plasmy....
|
host ::
RSS.