Národní úložiště šedé literatury Nalezeno 1 záznamů.  Hledání trvalo 0.00 vteřin. 
Nové alternativní krystalizační techniky používané pro zlepšení morfologie a difrakční kvality proteinových krystalů
TOMČOVÁ, Ivana
Röntgénová strukúrna analyza predstavuje v dnesnej dobe jeden z najúcinnejsích nástrojov urcenych k rieseniu struktúry a funkcie proteínov. V predkladanej práci je popísaná detailná atómová struktúra bakteriálneho dvojdoménového cytochrómu c4 po prvykrát izolovaného z anaerobného organizmu a atómové struktúry dvoch rôznych krystálovych foriem {\clqq}sladkého`` proteínu {--} thaumatínu izolovaného z Africkej kroviny. Na príklade cytochrómu je ukázané, ako bola pouzitá biochemická analyza spolu s röntgénovou struktúrnou analyzou pri hladaní funkcie tohto proteínu. Popri modernych vysoko-vykonnych metódach krystalizácie proteínov sa v poslednych rokoch coraz viac kladie dôraz na stúdium ich fyzikálno-chemickych vlastností a vyskum molekulovych interakcií. Nasim cielom bolo vylepsit proces hladania podmienok pre rast proteínovych krystálov s pouzitím novych alternatívnych krystalizacnych metod. V tejto práci sú prezentované dva nové prístupy proteínovej krystalizácie. Prvym je nová metóda krystalizácie spocívajúca v pridávaní aditív do okolitych kvapiek, ktoré môzu vplyvom pomalého vyparovania ovlyvnit pH, ci tlak pary nad proteínovou kvapkou bez toho, aby boli v kvapke samotnej prítomné. Druhy prístup spocíva v precíznom kontrolovaní teploty pocas krystalizacného procesu a udrziavania proteínového roztoku v metastabilnom stave. Pri tomto experimente je mozné manipulovat s rastom jednotlivych krystálov a tiet ovplyvnovat nukleáciu novych krystalizacnych jadier. Oba prístupy boli testované na modelovych i nami studovanych proteínoch (cytochróm, xylanáza a thaumatín), vysledkom coho boli získané kvalitnejsie, stabilnejsie a lepsie difraktujúce krystáli. Na záver práce sú prezentované vysledky krystalizácie dalsích troch enzymov, dvoch haloalkán dehalogenáz izolovanych z dvoch rozdielnych baktérií a jedného membránového proteínu {--} hydrogenázy izolovanej z anaerobného organizmu. Tieto vysledky budú dalej pouzité k röntgénovej struktúrnej analyze.

Chcete být upozorněni, pokud se objeví nové záznamy odpovídající tomuto dotazu?
Přihlásit se k odběru RSS.