|
|
Rekombinantní exprese, purifikace a charakterisace povrchového imunoreceptoru CD47 (integrin associated protein)
Kuchyňová, Sarah ; Konvalinka, Jan (vedoucí práce) ; Vaněk, Ondřej (oponent)
Lidský imunoreceptor CD47, taktéž označovaný "Intergrin Associated Protein" je nových terapeutických cílů v léčbě rakoviny. Při interakci s proteinem nacházející se na buňkách imunitního systému (SIRP pohlcení buňky exprimující CD47. Tento mechanismus využívají nádorové buňky pro únik imunitnímu systému a činí tak CD47 nadějným cílem imunoterapií. literárním přehledu této práce je charakterizován protein CD47 z struktury, lokalizace a funkce. Zároveň je detailně rozebraná interakce této bílkoviny se zmíněným SIRP Následující experimentální část se věnuje přípravy plazmidu pTT28_hCD47. Je popsáno, jak do linearizovaného vektoru pTT28 byl začleněn gen pro extracelulární část lidského proteinu CD47, který byl transfekován do savčího buněčného systému pro jeho NTA agarose a gelovou permeační chromatografií, kdy byly izolovány proteiny CD47 lišící se v glykosylacích. Jejich funkčnost byla úspěšně ověřena na přístroji ční protilátky. Experimentální část se dále zaměřuje na metody průtokové cytometrie využité pro evaluaci exprese proteinu CD47 na buněčných linií U937, THP které jej všechny vykazovaly. Klíčová slova:
|
|
|
The cell migration monitoring in a microfluidic system by the "Scratch Wound Healing Assay" method
Morgaenko, Katsiarina ; Skopalík, Josef (oponent) ; Chmelíková, Larisa (vedoucí práce)
This thesis describes the cell culture methods of mouse embryonic fibroblast (3T3), human umbilical vein endothelial (HUVEC), and Chinese hamster ovary (CHO) cell lines in microfluidic systems simulating capillary. Literature research for microfluidic realizations of Scratch Wound Healing Assay with fibroblasts and endothelial cell lines was performed in this thesis. The principles of confocal and fluorescence microscopy, and relevant image processing techniques used for quantifying cell migration were studied. Experimental setup for microfluidic Scratch Wound Healing Assay with using of trypsin – EDTA for creation of cell delusion, and confocal microscope Leica TCS SP8 X for subsequent image acquisition was proposed and tested. An appropriate algorithm for cell migration analysis was written in Matlab computing environment. Experiment’s results are discussed in the conclusion of this thesis.
|
|
|
The cell migration monitoring in a microfluidic system by the "Scratch Wound Healing Assay" method
Morgaenko, Katsiarina ; Skopalík, Josef (oponent) ; Chmelíková, Larisa (vedoucí práce)
This thesis describes the cell culture methods of mouse embryonic fibroblast (3T3), human umbilical vein endothelial (HUVEC), and Chinese hamster ovary (CHO) cell lines in microfluidic systems simulating capillary. Literature research for microfluidic realizations of Scratch Wound Healing Assay with fibroblasts and endothelial cell lines was performed in this thesis. The principles of confocal and fluorescence microscopy, and relevant image processing techniques used for quantifying cell migration were studied. Experimental setup for microfluidic Scratch Wound Healing Assay with using of trypsin – EDTA for creation of cell delusion, and confocal microscope Leica TCS SP8 X for subsequent image acquisition was proposed and tested. An appropriate algorithm for cell migration analysis was written in Matlab computing environment. Experiment’s results are discussed in the conclusion of this thesis.
|
host ::
RSS.