|
|
Preparation and properties of cyanide-transforming enzymes and their analytical uses
Šťastná, Katarína ; Martínková, Ludmila (vedoucí práce) ; Čermáková, Michaela (oponent)
Kyanidy jsou sloučeniny, které se přirozeně vyskytují v přírodě a také se používají v různých průmyslových odvětvích. Jejich negativní účinky na lidské zdraví i na životní prostředí byly prokázány, a proto by měl být jejich výskyt sledován. Cílem této diplomové práce je enzymové stanovení volného kyanidu se zaměřením na charakterizaci a aplikaci specifických enzymů v enzymových kaskádách. Mezi hlavní cíle patří produkce a purifikace klíčových enzymů podílejících se na přeměně kyanidu, jmenovitě kyanidhydratázy (CynH), formamidázy (AmiF) a kyaniddihydratázy (CynD). Byly hodnoceny katalytické vlastnosti a posouzena účinnost těchto enzymů při detekci kyanidu. K měření reakčních meziproduktů a produktů byly použity spektrofotometrické techniky. Byly navrženy, testovány a optimalizovány enzymové kaskády, aby se prokázala jejich proveditelnost a účinnost při stanovení kyanidu. Výsledkem je vývoj dvou selektivních, citlivých a rychlých enzymových testů pro detekci volného kyanidu. Navrhované testy vyžadují malá množství vzorků, enzymů a dalších složek a umožňují rychlé stanovení kyanidu za méně než dvě hodiny. Celkově tento výzkum přispívá k rozvoji metod pro analýzu kyanidu s potenciálními aplikacemi v oblastech monitorování životního prostředí, průmyslové bezpečnosti a péče o veřejné zdraví. Klíčová...
|
|
|
Enzymatic detoxification of cyanide using cyanide hydratases
Sedova, Anastasia ; Rucká, Lenka ; Glozlová, Michaela ; Novotný, Petr ; Martínková, Ludmila ; Bojarová, Pavla
Cyanide, a strong chelator of metals in vital enzymes and proteins, is very toxic for most living organisms. Wastewaters from the mining, metallurgical and chemical industries contain significant concentrations of free cyanide. Though it can be largely eliminated by physicochemical methods, these processes may in turn lead to the formation of other waste. In addition, no effective methods have been found to neutralize cyanide spills coming from industrial accidents. The use of enzymes to remove cyanide is an attractive alternative, which is environmentally friendly and applicable to high cyanide concentrations. Cyanide hydratases (CynHs) are of considerable interest for the decomposition of hazardous cyanide wastes. Here we investigate the biochemical properties of new CynHs from Stereum hirsutum and Exidia glandulosa, it is of fundamental importance to preserve the enzyme activity at alkaline pH as cyanide waste is stored under these conditions.
|
host ::
RSS.