|
|
Úloha Adenylát kinázy 1 v aktivaci a metabolismu imunitních buněk larev \kur{Drosophila melanogaster}
KAISLEROVÁ, Nikola
Cílem této práce bylo studium úlohy Adenylát kinázy 1 (Ak1) v imunitním systému larev Drosophila melanogaster po infekci parazitoidní vosičkou Leptopilina boulardi. Za použití Ak1 RNA interference specifické pro imunitní systém byl analyzován účinek snížené hladiny Ak1 na imunitní odpověď a životaschopnost drozofily. Důležitost Ak1 byla také vyhodnocena v rámci metabolismu imunitních buňěk. Ukázalo se, že Ak1 hraje významnou roli v energetickém metabolismu imunitních buněk a je důležitá pro správnou funkci imunitního systému Drosophila melanogaster.
|
|
|
Vliv cytosolické nukleotidázy cN-IIIB na imunitní odpověď u \kur{Drosophila melanogaster}
DOLEJŠKOVÁ, Tereza
Adenosin je klíčovou signální molekulou metabolického přesmyku, stěžejního procesu metabolických změn u Drosophila melanogaster při infekci parazitoidní vosičkou. Ovšem veškeré cesty vzniku adenosinu nejsou doposud známé. V této práci jsme studovali potenciální konvertor AMP na adenosin v imunitní odpovědi, cN-IIIB, cytosolickou nukleotidázu, o které je známo, že přijímá methylovaný RNA cap nukleotid 7-methylguanosin jako substrát a chrání buňky před nežádoucí inkorporací tohoto nukleotidu do nukleových kyselin. Tuto vlastnost považujeme za potenciálně také důležitou v metabolickém přesmyku.
|
|
|
Role makrofágy produkovaného cytokinu IMPL2 v regulaci systemického metabolismu během bakteriální infekce u \kur{Drosophila melanogaster}
VARGOVÁ, Hana
Hlavním cílem této bakalářské práce je ověřit, zda je ImpL2, produkovaný aktivovanými imunitními buňkami, zodpovědný za změny v systemickém metabolismu během imunitní odpovědi při akutní fázi bakteriální infekce u Drosophila melanogaster. Teoretická část zahrnuje dosud známé informace o imunitním systému savců a D. melanogaster, zvláště o polarizaci a buněčném metabolismu makrofágů, dále přináší poznatky o rolích genu ImpL2 a jeho savčího homologu Igfbp7. Praktická část bakalářské práce se zabývá úlohou genu ImpL2 v indukci změn systemického metabolismu během imunitní odpovědi. Pomocí makrofágově-specifické RNA-interference byl testován vliv cytokinu IMPL2 na zvolené metabolické geny v tukovém tělese po infekci Streptococcus pneumoniae. Práce také objasňuje, zda má tento signální faktor vliv na koncentraci vybraných metabolitů (cholesterolu a cholesterol-esteru) v cirkulaci a v makrofázích během akutní fáze bakteriální infekce.
|
|
|
Vytvoření a charakterizace transgenních linií drozofil manifestující neurodegenerativní onemocnění spinocerebelární ataxi typu 1 (SCA1)
JIČÍNSKÁ, Veronika
Cílem této bakalářské práce bylo pomocí GAL4/UAS sytému vytvořit a charakterizovat transgenní linie Drosophila melanogaster manifestující spinocerebelární ataxii typu 1 (SCA1). Pro všechny experimenty byli použiti 5denní a 30denní samci. Byl sledován vliv SCA1 u manifestujících linií na mobilitu, délku přežití a neurodegenerativní změny na mozku. Kromě těchto fyziologických metod byla testována exprese specifických genů metodou kvantitativní RT-PCR a kvantifikace specifických protein pomocí metody Western Blot. Neurodegenerativní změny u manifestujících linií byly zkoumány pomocí konfokální mikroskopie. Exprese specifických genů, jako jsou Ataxin, MMP1 a MMP2, byla testována u všech testovaných linií manifestujících SCA1 ve srovnání s kontrolními liniemi. Výsledky naznačují, že exprese hAtXN1 byla vyšší u linií manifestujících SCA1 oproti kontrolám. Nicméně trend exprese MMP není zcela zřejmý a bude předmětem navazující magisterské práce.
|
|
|
Vliv paralytického jedu lumčíka, \kur{Habrobracon hebetor}, na svalovou tkáň zavíječe, \kur{Ephestia kuehniella} a octomilky, \kur{Drosophila melanogaster}
PODLAHOVÁ, Šárka
Diplomová práce studuje vliv paralytického jedu H. hebetor na ultrastrukturu svalové tkáně přirozeného hostitele E. kuehniella a modelového organismu D. melanogaster pomocí transmisní elektronové mikroskopie (TEM). Práce navazuje na bakalářskou práci Šárky Podlahové, ve které byl zkoumán efekt adipokinetického hormonu (AKH) na působení jedu H. hebetor v thorakální svalové tkáni D. melanogaster (Podlahová 2019). Zatímco v původní práci byly pro aplikaci jedu a AKH použity podmínky in vitro, v této práci je jed aplikován in vivo ať už za použití přirozeného hostitele nebo za přímé injikace jedu do modelového organismu. Zpracování tkáně bylo optimalizováno tak, aby se minimalizoval vznik možných artefaktů. Dále byly testovány linie D. melanogaster s potenciální mutací v podjednotkách glutamátových receptorů GluRIIA a GluRIIB. A bylo prodiskutováno zapojení těchto receptorů v mechanismu paralýzy vosičkovým jedem.
|
|
|
Důležitost systemické inzulínové rezistence pro imunitní odpověď
STRYCH, Lukáš
Cílem této práce bylo studovat inzulínovou rezistenci v larválních periferních tkáních Drosophila melanogaster po infekci parazitoidní vosičkou Leptopilina boulardi. Nejprve byl analyzován stav inzulínové signalizace během imunitní odpovědi měřením genové exprese a fosforylace Akt. Následně byla testována důležitost inzulínové rezistence v periferních tkáních pro efektivitu imunitní odpovědi. Zhodnocen byl i vliv Jak-Stat signalizace na indukci inzulínové rezistence v larválních svalech.
|
|
|
Role of adipokinetic hormone during starvation in Drosophila
KUTHANOVÁ, Michaela
The role of adipokinetic hormone (Drome-AKH) in maintaining the levels of basic nutrients, under starvation conditions, was studied using Drosophila melanogaster mutants with AKH deficiency (Akh1) and AKH abundance (EE-Akh). Our results showed lipids as the main energy reserve in Drosophila, and their physiological level and metabolism were shown to be under the control of AKH. AKH abundance in the body resulted in lower levels of triacylglycerols and diacylglycerols than in the controls, probably due to a more intensive metabolism; interestingly, there was a disproportional representation of fatty acids in triacylglycerols and diacylglycerols in Drosophila. Lower level of glycogen and its partial control by AKH suggest its lesser role as the storage substance. However, maintenance of free carbohydrate level in Drosophila seemed to be critical; when glycogen stores are exhausted, carbohydrates are synthesized from other sources. Protein levels and their alterations, under starvation, did not seem controlled by AKH. AKH-deficient flies were more resistant while AKH-abundant flies were more sensitive to starvation; females were found to be more resistant than males, regardless of the AKH level, probably due to higher body mass and higher amount of nutrients. However, in accordance with the level of all nutrients, that of AKH also gradually decreased with prolonged starvation
|
|
|
CRISPR/Cas9 gene editing in Drosophila melanogaster
KALTENBÖCK, Konstantin
The aim of this thesis was to predict functional sites in the timeless gene of Drosophila melanogaster, to design fitting gRNAs for the identified sites to create transformation vectors for fly transformations and to induce CRISPR/Cas9 mediated target mutations by crossing gRNA expressing flies with Cas9 expressing flies.
|
|
|
The Role of Juvenile Hormone during Immune Response in Drosophila melanogaster
TSCHERNUTH, Sebastian
The role of Juvenile hormone during immune response was investigated in Drosophila melanogaster larvae. The levels of Juvenile hormone were measured directly by mass spectrometry and indirectly by monitoring Krüppel Homologue expression. Neither of those approaches were successful. We genetically manipulated JH production and signalling, infected the larvae with parasitoid wasps and found a significant difference in immune strength between larvae with and without functional JH production.
|
|
| |
host ::
RSS.