|
|
Ezrin-Radixin-Moesin (ERM) proteiny: Spojník tetraspaninových sítí a cytoskeletu gamet
Picková, Jana ; Frolíková, Michaela (vedoucí práce) ; Lánská, Eva (oponent)
Ezrin, který společně s radixinem a moesinem patří do rodiny ERM proteinů, hraje významnou roli v propojení membránových proteinů s aktinovým cytoskeletem. Ve spermiích byl ezrin doposud identifikován pouze u lidí a býků, kde se pravděpodobně podílí na řízení polymerace aktinu během kapacitace. V průběhu akrozomální reakce hraje aktin důležitou roli v přesunu proteinů z vnitřní akrozomální membrány do ekvatoriálního segmentu, což je děj nezbytný pro úspěšný průběh oplození. Mezi proteiny, které se během akrozomální reakce přesouvají do ekvatoriálního segmentu, místa iniciace fúze gamet, patří i protein CD9. Tento protein pravděpodobně stabilizuje interakce ostatních proteinů mezi spermií a oocytem během fúze gamet. V této diplomové práci jsme se zaměřili na roli ezrinu v propojení proteinu CD9 s aktinovým cytoskeletem v myší spermii. Pomocí nepřímé imunofluorescence jsme detekovali přítomnost ezrinu, CD9 a aktinu v akrozom intaktní myší spermii. Jejich ko-lokalizace v apikální akrozomální oblasti spermie naznačuje, že tyto proteiny mohou ve spermii interagovat, avšak naše výsledky ko-imunoprecipitace tuto možnost nepotvrdili. Nicméně, v apikální akrozomální oblasti jsme detekovali také přítomnost proteinu EWI-2, který by mohl být prostředníkem této vazby. V rámci práce jsme se rovněž zabývali...
|
|
|
Monitoring of protein network dynamics: the role of FcRL proteins during sperm-egg membrane interaction
Bašus, Kryštof ; Komrsková, Kateřina (vedoucí práce) ; Šušor, Andrej (oponent)
Vzájemná interakce a fúze membrán spermie a vajíčka je zprostředkována různými molekulami, které se nacházejí na membáně spermie i vajíčka a tvoří proteinové sítě. U mnoha kandidátních proteinů byla předpokládána jejich účast při fúzi membrán gamet, některé z těchto proteinů (Izumo1, CD9, Juno) se ukázaly býti nezbytnými, zatímco u jiných byla objevena zcela jiná role (CD46, tetraspaniny). U myši se po vazbě spermie na vajíčko váže protein Juno na povrchu vajíčka na monomerní protein Izumo1 na povrchu spermie, následuje dimerizace Izumo1 a rychlé vyvázání proteinu Juno z povrchu vajíčka, jak bylo popsáno u myši. Tato skutečnost naznačuje, že pro zajištění fúze membrán musí být na vajíčku exprimován další, zatím nespecifikovaný receptor. Abychom nalezli hlavní lidský fúzogenní receptor pro IZUMO1, využili jsme metodu náhodného screeningu, jedna kulička - jedna sloučenina" (one--bead one compoud, OBOC). Byla vybrána kulička interagující s lidskými spermiemi za splnění všech kritérií a tato kulička nesla navázanou peptidovou sekvenci homologní s Ig doménou ...
|
|
|
Monitoring of protein network dynamics: the role of FcRL proteins during sperm-egg membrane interaction
Bašus, Kryštof ; Komrsková, Kateřina (vedoucí práce) ; Šušor, Andrej (oponent)
Vzájemná interakce a fúze membrán spermie a vajíčka je zprostředkována různými molekulami, které se nacházejí na membáně spermie i vajíčka a tvoří proteinové sítě. U mnoha kandidátních proteinů byla předpokládána jejich účast při fúzi membrán gamet, některé z těchto proteinů (Izumo1, CD9, Juno) se ukázaly býti nezbytnými, zatímco u jiných byla objevena zcela jiná role (CD46, tetraspaniny). U myši se po vazbě spermie na vajíčko váže protein Juno na povrchu vajíčka na monomerní protein Izumo1 na povrchu spermie, následuje dimerizace Izumo1 a rychlé vyvázání proteinu Juno z povrchu vajíčka, jak bylo popsáno u myši. Tato skutečnost naznačuje, že pro zajištění fúze membrán musí být na vajíčku exprimován další, zatím nespecifikovaný receptor. Abychom nalezli hlavní lidský fúzogenní receptor pro IZUMO1, využili jsme metodu náhodného screeningu, jedna kulička - jedna sloučenina" (one--bead one compoud, OBOC). Byla vybrána kulička interagující s lidskými spermiemi za splnění všech kritérií a tato kulička nesla navázanou peptidovou sekvenci homologní s Ig doménou ...
|
|
| |
host ::
RSS.