Národní úložiště šedé literatury Nalezeno 2 záznamů.  Hledání trvalo 0.01 vteřin. 
Production and purification of recombinant human xenobiotic nuclear receptors
Menclová, Alena ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Předložená diplomová práce se zabývá produkcí a purifikací rekombinantních lidských xenobiotických jaderných receptorů (NRs). Důraz je kladen na ligand- vazebnou doménu (LBD) lidského konstitutivního androstanového receptoru (hCAR) a lidského pregnanového X receptoru (hPXR). Tyto receptory patří do podskupiny NR1I jaderných receptorů a slouží k regulaci metabolismu léčiv. Významnou roli hrají u mnoha lidských nemocí, jako je zánětlivé onemocnění střev nebo diabetes a obezita. V rámci práce byly cDNA rekombinantních proteinů sloužící pro produkci hCAR a hPXR LBD klonované do bakteriálního expresního vektoru pET-15b od Novagenu. Získané plasmidy byly pomnoženy v kompetetivních buňkách E. coli kmene DH5. K ověření správnosti vložených inzertů sloužila technika PCR a restrikční analýza velikosti fragmentů na agarózových gelech. Vhodné izolované klony byly následně transformovány do kompetetivních buněk E. coli kmene BL21 DE3 a rekombinantní protein byl připraven za optimálních podmínek v expresním systému za použití regulace pomocí koncentrace isopropyl-1-thio--D- galactopyranosidu (IPTG). Produkce hCAR LBD a hPXR LBD byla sledována při definovaných koncentrací IPTG, teplotě a buněčné hustotě (OD600). Z výsledků vyplynuly optimální podmínky pro proteinovou produkci; hCAR LBD byla dosažena při 0.75 mM...
Production and purification of recombinant human xenobiotic nuclear receptors
Menclová, Alena ; Pávek, Petr (oponent) ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce)
Předložená diplomová práce se zabývá produkcí a purifikací rekombinantních lidských xenobiotických jaderných receptorů (NRs). Důraz je kladen na ligand- vazebnou doménu (LBD) lidského konstitutivního androstanového receptoru (hCAR) a lidského pregnanového X receptoru (hPXR). Tyto receptory patří do podskupiny NR1I jaderných receptorů a slouží k regulaci metabolismu léčiv. Významnou roli hrají u mnoha lidských nemocí, jako je zánětlivé onemocnění střev nebo diabetes a obezita. V rámci práce byly cDNA rekombinantních proteinů sloužící pro produkci hCAR a hPXR LBD klonované do bakteriálního expresního vektoru pET-15b od Novagenu. Získané plasmidy byly pomnoženy v kompetetivních buňkách E. coli kmene DH5. K ověření správnosti vložených inzertů sloužila technika PCR a restrikční analýza velikosti fragmentů na agarózových gelech. Vhodné izolované klony byly následně transformovány do kompetetivních buněk E. coli kmene BL21 DE3 a rekombinantní protein byl připraven za optimálních podmínek v expresním systému za použití regulace pomocí koncentrace isopropyl-1-thio--D- galactopyranosidu (IPTG). Produkce hCAR LBD a hPXR LBD byla sledována při definovaných koncentrací IPTG, teplotě a buněčné hustotě (OD600). Z výsledků vyplynuly optimální podmínky pro proteinovou produkci; hCAR LBD byla dosažena při 0.75 mM...

Viz též: podobná jména autorů
1 Menclová, Anika
Chcete být upozorněni, pokud se objeví nové záznamy odpovídající tomuto dotazu?
Přihlásit se k odběru RSS.