|
| |
|
|
Monitorování kompenzace u pacientů s cystinurií spektrofotometrickou metodou
Leitner, Martin ; Hyánek, Josef (oponent) ; Chrastina, Petr (vedoucí práce)
Předložená bakalářská práce se zabývá problematikou cystinurie, dědičné metabolické poruchy transportu dibazických aminokyselin. Cílem práce bylo vybrat spektrofotometrickou metodu stanovení cystinu v moči, nalézt nejvhodnější podmínky pro stanovení cystinu v klinické laboratoři a aplikovat metodu na vzorky močí pacientů s cystinurií. Pro stanovení cystinu v moči byla zvolena metoda využívající barevný červenofialový produkt reakce cystinu po redukci na cystein s ninhydrinovým činidlem v kyselém prostředí. Byla změřena absorpční spektra standardu cystinu a moči pacienta s cystinurií s maximem při 560 nm. Byla vyloučena interference ornitinu a dalších aminokyselin. Byla proměřena kinetika redukce cystinu na cystein. Nejvhodnější dobou redukce je 5 minut, při delší době již dochází k oxidaci cysteinu na cystin. Byla proměřena kinetika tvorby barevného produktu. Maxima absorbance při zahřátí reakční směsi s ninhydrinem na 100 řC se dosáhlo po 10 minutách, dále již dochází k degradačním procesům a poklesu absorbance. Byla testována stabilita barevného produktu reakce na světle. Produkt je stabilní po dobu deseti minut, poté dochází k poklesu absorbance po 45 minutách o 8%. Byla ověřena linearita závislosti absorbance barevného produktu reakce na koncentraci cystinu v rozmezí 0 - 834 µmol/l. Byla testována...
|
|
|
The study of mitochondrial biogenesis during fetal development
Pejznochová, Martina ; Zeman, Jiří (vedoucí práce) ; Hyánek, Josef (oponent) ; Brdička, Radim (oponent)
Postnatální adaptace novorozence na extrauterinní prostředí je kromě jiného závislá i na efektivním průběhu mitochondriální biogeneze v období fetálního vývoje. Proto studium mitochondriální biogeneze na molekulárně genetické a biochemické úrovni může přispět k zlepšení péče o předčasně narozené děti, zvláště o kriticky nemocné novorozence. Práce vznikla v Laboratoři pro studium mitochondriálních poruch Kliniky dětského a dorostového lékařství 1.LF UK v Praze a zabývá se molekulárně genetickými analýzami zaměřenými na charakterizaci exprese genů podílejících se na mitochondriální biogenezi včetně genů pro systém oxidativní fosforylace (OXPHOS) a na charakterizaci změn množství mitochondriální DNA v průběhu fetálního vývoje člověka. Získané výsledky umožňují: Efektivní analýzu expresní hladiny mRNA metodou real-time PCR ve fetálních tkáních Kvantifikaci množství mtDNA v různých fetálních tkáních Pochopit a vysvětlit tkáňové specifické rozdíly v expresi OXPHOS genů a genů podílejících se na transkripci mtDNA a regulaci jejího množství v průběhu druhého trimestru gestace
|
|
|
Studium mitochondriální ultrastruktury a funkcí u vybraných mitochondriálních a lysosomálních střádacích chorob
Kostková, Olga ; Hansíková, Hana (vedoucí práce) ; Šmíd, František (oponent) ; Hyánek, Josef (oponent)
Disertační práce byla vypracována v Laboratoři pro studium mitochondriálních poruch, Kliniky dětského a dorostového lékařství, 1. LF UK v Praze a ve spolupráci s Ústavem dědičných metabolických poruch, 1. LF UK v Praze. Práce vychází z dlouhodobého zaměření pracoviště na studium mitochondriálních onemocnění a spojuje problematiku primárně mitochondriálních onemocnění a sekundárních mitochondriálních poruch u vybraných lysosomálních střádacích onemocnění. Mitochondriální onemocnění představují skupinu závažných onemocnění s nástupem od novorozeneckého věku až do dospělosti a u většiny pacientů mají velmi vážný průběh. Mitochondrie jsou hlavním producentem energie v savčí buňce a poruchy systému OXPHOS mají zásadní dopady především na tkáně s vysokou energetickou náročností. Obdobný fenotyp je společný i pro řadu lysosomálních střádacích onemocnění. I při známé molekulární podstatě mitochondriálních i lysosomálních onemocnění je stále obtížné odhadnout klinický průběh onemocnění i prognózu. Funkce mitochondrií se neomezuje pouze na produkci energie, ale hraje i významnou úlohu ve spouštění apoptózy, v produkci volných radikálů, je významným místem vápníkového metabolismu a poškozené mitochondrie se stávají cílem autofagie kontrolované lysosomy. Naše výsledky umožňují: 1. lépe porozumět tkáňově specifickému...
|
|
|
Vyšetření významu peptidů regulujících příjem potravy a nutriční stav u dětí a adolescentů
Bronský, Jiří ; Průša, Richard (vedoucí práce) ; Pelouch, Václav (oponent) ; Hyánek, Josef (oponent)
Úvod: Regulace příjmu potravy a nutričního stavu je komplexní děj zprostředkovaný vzájemnou souhrou řady regulačních peptidů centrálního nervového systému, gastrointestinálního traktu a tukové tkáně. Tyto systémy jsou propojeny zpětnými vazbami, které informují o příjmu potravy a množství energetických zásob v organismu. Porucha v některé z těchto oblastí může vést ke změně nutričního stavu organismu. Metody: Radioimunoanalýzou byly stanoveny plazmatické hladiny orexinu A, celkového ghrelinu a sérové hladiny leptinu a enzymovou imunoanalýzou byly stanoveny sérové hladiny adiponektinu u zdravých jedinců a u dětských pacientů s obezitou, mentální anorexií, Crohnovou nemocí a celiakální sprue a byl popsán vliv nutriční intervence na tyto hladiny. Dále byl zhodnocen vztah jednotlivých regulačních peptidů k základním biochemickým a antropometrickým ukazatelům nutričního stavu. Metodou enzymové imunoanalýzy s imunofluorescenční detekcí jsme stanovili plazmatické hladiny celkového a neredukovaného amylinu u dospělých pacientů s osteoporózou, diabetem II. typu a u kontrolní skupiny. Výsledky: Během redukce tělesné hmotnosti u dětských a adolescentních pacientů s obezitou došlo ke statisticky významným změnám plazmatických hladin orexinu A a celkového ghrelinu, zatímco sérové hladiny adiponektinu se významně...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.