|
|
Role fibroblastového aktivačního proteinu v růstu a invazivitě gliomových buněk
Fejfarová, Edita ; Bušek, Petr (vedoucí práce) ; Szabo, Pavol (oponent)
Astrocytární tumory vysokého stupně malignity jsou velice progresivní mozkové nádory. Glioblastoma multiforme je nejčastější a nejmalignější typ s infiltrativním fenotypem nádorových buněk. Fibroblastový aktivační protein (FAP) je prolyl peptidáza převážně vázaná na membránu a vykazující exo- a endopeptidázovou hydrolytickou aktivitu. Je známo, že se FAP podílí na hojení ran, buněčné migraci a invazi a jeho xprese je spojována s patogenezí řady malignit. Exprese FAP mRNA je podle microarray dat z The Cancer Genome Atlas zvýšena ve 48% glioblastomů. Vliv FAP na patogenezi astrocytárních nádorů není objasněn. Cíly této práce je analyzovat expresi FAP v primárních gliomových kulturách odvozených od gliomů vysokého stupně malignity a analýza vlivu FAP na růst, migraci a invazi gliomových buněk. Naše výsledky z ELISA a wester blotu ukázaly heterogenní expresi napříč studovanými gliomovými primárními buněčnými kulturami a permanentími liniemi. Obě enzymové aktivity charakteristické pro FAP byly detekovány v primární gliomové kultuře P11 s vysokou expresí FAP. Pomocí imunofluorescenčního značení se ukázalo, že v těchto buňkách se FAP nacházel nejen na plasmatické membráně, kde je typicky lokalizován, ale také v cytoplazmě. Buňky z kultury P11 byly tumorigenní v immunodeficientních myších a udržely si...
|
|
|
Význam dipeptidylpeptidázy-IV a homologních proteáz v procesech migrace a invaze.
Fejfarová, Edita ; Bušek, Petr (vedoucí práce) ; Rösel, Daniel (oponent)
Migrace a invaze jsou děje probíhající přirozeně v organismu během embryogeneze, při imunitních reakcích či hojení ran. Velice důležitým faktorem jsou také u řady závažných onemocnění jako např. revmatická artritida a maligní nádory. Význam proteolytických enzymů v těchto procesech je nesporný - podílejí se na degradaci extracelulární matrix a tím usnadňují pohyb buňky. Dipeptidylpeptidáza-IV (DPPIV) odštěpuje pouhé dvě aminokyseliny od N-konce a na degradaci ECM se nepodílí. Rozpoznává a štěpí krátké peptidy mající jako předposlední AA prolin, který svému držiteli obvykle zajišťuje rezistenci vůči běžným typům proteáz. Mezi substráty DPPIV a homologních proteáz patří chemokiny uplatňující se v signalizaci migrace, jako jsou SDF-1 a RANTES či neuropeptid Y. Jejich štěpením a tím inaktivací se molekuly s DPPIV-podobnou aktivitou projevují jako modulátory migračního signálu na buňkách choriokacinomu, neuroblastomu, buňkách Sézaryho syndromu či epiteliálních buňkách migrujících v reakci na poranění. Dalším mechanismem proteáz s DPPIV-podobnou aktivitou je vazba na proteiny extracelulární matrix, čímž se spolupodílejí na adhezi buněk a tím ovlivňují jejich migrační schopnost. Vliv na migraci a invazi mohou mít i intracelulární enzymové homology DDP8 a DPP9, u kterých je mechanismus účinku již z...
|
|
|
Role fibroblastového aktivačního proteinu v růstu a invazivitě gliomových buněk
Fejfarová, Edita ; Bušek, Petr (vedoucí práce) ; Szabo, Pavol (oponent)
Astrocytární tumory vysokého stupně malignity jsou velice progresivní mozkové nádory. Glioblastoma multiforme je nejčastější a nejmalignější typ s infiltrativním fenotypem nádorových buněk. Fibroblastový aktivační protein (FAP) je prolyl peptidáza převážně vázaná na membránu a vykazující exo- a endopeptidázovou hydrolytickou aktivitu. Je známo, že se FAP podílí na hojení ran, buněčné migraci a invazi a jeho xprese je spojována s patogenezí řady malignit. Exprese FAP mRNA je podle microarray dat z The Cancer Genome Atlas zvýšena ve 48% glioblastomů. Vliv FAP na patogenezi astrocytárních nádorů není objasněn. Cíly této práce je analyzovat expresi FAP v primárních gliomových kulturách odvozených od gliomů vysokého stupně malignity a analýza vlivu FAP na růst, migraci a invazi gliomových buněk. Naše výsledky z ELISA a wester blotu ukázaly heterogenní expresi napříč studovanými gliomovými primárními buněčnými kulturami a permanentími liniemi. Obě enzymové aktivity charakteristické pro FAP byly detekovány v primární gliomové kultuře P11 s vysokou expresí FAP. Pomocí imunofluorescenčního značení se ukázalo, že v těchto buňkách se FAP nacházel nejen na plasmatické membráně, kde je typicky lokalizován, ale také v cytoplazmě. Buňky z kultury P11 byly tumorigenní v immunodeficientních myších a udržely si...
|
|
|
Význam dipeptidylpeptidázy-IV a homologních proteáz v procesech migrace a invaze.
Fejfarová, Edita ; Rösel, Daniel (oponent) ; Bušek, Petr (vedoucí práce)
Migrace a invaze jsou děje probíhající přirozeně v organismu během embryogeneze, při imunitních reakcích či hojení ran. Velice důležitým faktorem jsou také u řady závažných onemocnění jako např. revmatická artritida a maligní nádory. Význam proteolytických enzymů v těchto procesech je nesporný - podílejí se na degradaci extracelulární matrix a tím usnadňují pohyb buňky. Dipeptidylpeptidáza-IV (DPPIV) odštěpuje pouhé dvě aminokyseliny od N-konce a na degradaci ECM se nepodílí. Rozpoznává a štěpí krátké peptidy mající jako předposlední AA prolin, který svému držiteli obvykle zajišťuje rezistenci vůči běžným typům proteáz. Mezi substráty DPPIV a homologních proteáz patří chemokiny uplatňující se v signalizaci migrace, jako jsou SDF-1 a RANTES či neuropeptid Y. Jejich štěpením a tím inaktivací se molekuly s DPPIV-podobnou aktivitou projevují jako modulátory migračního signálu na buňkách choriokacinomu, neuroblastomu, buňkách Sézaryho syndromu či epiteliálních buňkách migrujících v reakci na poranění. Dalším mechanismem proteáz s DPPIV-podobnou aktivitou je vazba na proteiny extracelulární matrix, čímž se spolupodílejí na adhezi buněk a tím ovlivňují jejich migrační schopnost. Vliv na migraci a invazi mohou mít i intracelulární enzymové homology DDP8 a DPP9, u kterých je mechanismus účinku již z...
|
host ::
RSS.