Národní úložiště šedé literatury Nalezeno 3 záznamů.  Hledání trvalo 0.02 vteřin. 
Enzymatic Incorporation of Biotin into DNA for DNA Hybridization Analysis and for Sensitive Detection of PCR-Amplified DNA
Špaček, Jan ; Zenka, Martin ; Haroniková, Lucia ; Havran, Luděk ; Fojta, Miroslav
We present two enzymatical electrochemical assays for DNA analysis. For hybridization analysis we used probes with biotin-14-dC introduced to 3' OH end by terminal transferase. For detection of PCR products we used Deep Vent polymerase to incorporate biotin-14-dCduring PCR. In both cases streptavidin-alkaline phosphatase conjugate was subsequently attached to the incorporated biotins and was used to catalyze dephosphorylation of 1-naphthyl phosphate to 1-naphthol, the electrochemical signal of which was utilized for detection. Compared to the former method, biotin incorporation during PCR offers lower molar detection limits, whereas application of the biotin-tailed probe can provide us with more selective detection.
Voltametrická analýza nukleosidtrifosfátů a oligonukleotidů značených antrochinonem na zlatých elektrodách
Vidláková, Pavlína ; Balintová, Jana ; Havran, Luděk ; Hocek, Michal ; Fojta, Miroslav
Elektrochemická aktivita nukleových kyselin byla objevena v 50. letech 20. století a od té doby je používána ke studiu struktury a interakcí přirozených i modifikovaných molekul nukleových kyselin i syntetických oligonukleotidů. Přestože je přirozená DNA sama o sobě elektrochemicky aktivní a je možné ji studovat na různých typech elektrod, je pro řadu analytických aplikací praktické použít DNA značenou elektroaktivními molekulami (například komplexy přechodných kovů, amino- nebo nitroskupinami, antrachinonem apod.). Tyto látky podléhají redoxním reakcím a dávají takto modifikované DNA nové elektrochemické vlastnosti, které je možné využít pro studium struktury a interakcí nukleových kyselin a v oblasti DNA diagnostiky.
Redox značení DNA - od jednoduché detekce DNA pomocí modifikace komplexy oxidu osmičelého k ratiometrické analýze sekvencí
Havran, Luděk ; Balintová, Jana ; Vidláková, Pavlína ; Macíčková-Cahová, Hana ; Pivoňková, Hana ; Hocek, Michal ; Fojta, Miroslav
Elektrochemické metody našly široké uplatnění jak v analýze DNA a studiu jejích interakcí s různými látkami, tak i při vývoji senzorů pro detekci hybridizace DNA. DNA je přirozeně elektroaktivní molekula, která poskytuje na různých typech pracovních elektrod řadu analyticky využitelných elektrochemických signálů. Pro některé typy analýz, zvláště pak při vývoji DNA hybridizačních senzorů, se osvědčilo užití redox aktivních značek. Jedním ze způsobů jak zavést do DNA elektroaktivní značku je její modifikace pomocí komplex oxidu osmičelého s dusíkatými ligandy (Os,L). Vznikající adukty poskytují na rtuťových i uhlíkových elektrodách elektrochemické signály v důsledku redukce/oxidace atomu osmia v molekule aduktu. Tato metoda značení DNA našla uplatnění ve vysoce citlivé analýze DNA a také v analýze nukleotidových sekvencí. Další z metod pro přípravu redox značené DNA je enzymatická inkorporace značených deoxyribonukleotid trifosfátů (dNTP) pomocí DNA polymeráz. Značené dNTP lze připravit jednoduchou cross-coupling reakcí ve vodném prostředí. V tomto příspěvku bude demonstrována aplikace různých redox aktivních značek v elektrochemické analýze DNA.

Chcete být upozorněni, pokud se objeví nové záznamy odpovídající tomuto dotazu?
Přihlásit se k odběru RSS.