|
| |
|
|
Molekulární charakterizace NADPH oxidázy ve střevě klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
KUČERA, Matěj
Tato bakalářská práce je zaměřena na charakterizaci duální oxidázy (DUOX), člena rodiny NADPH oxidáz, která byla popsána jako hlavní faktor epiteliální imunity ve střevě modelového organismu Drosophila melanogaster. Charakterizovali jsme ortolog genu pro DUOX u klíštěte I. ricinus a popsali jeho tkáňový expresní profil. DUOX je exprimován hlavně ve střevě nenasátých klíšťat a zdá se, že je jeho exprese snížena během umělé antimikrobiální infekce. Byl připraven rekombinantní protein fragmentu DUOX a připraveny antiDUOX protilátky pro pozdější charakterizaci enzymu. Naším hlavním záměrem je zdůraznit důležitost reaktivních kyslíkových radikálů produkovaných DUOX a roli klíštěcí DUOX v obraně proti patogenům ve střevě.
|
|
|
Výskyt klíšťové encefalitidy v okrese Příbram a míra informovanosti a postoj k očkování proti klíšťové encefalitidě u vybraných skupin obyvatel
KUCHAŘOVÁ, Eliška
Středoevropská klíšťová encefalitida je onemocnění, které patří do skupiny zoonóz a které je přenášeno prostřednictvím klíštěte Ixodes ricinus. Je to akutní neuroinfekce způsobená RNA virem, která může nemocného ohrozit na životě. Klíšťová encefalitida patří mezi onemocnění typické svou přírodní ohniskovostí. K nákaze člověka nejčastěji dochází přisátím infikovaného klíštěte. Jsou ale známy i případy, kdy k nákaze došlo požitím nepasterizovaného mléka nebo mléčných výrobků. Ačkoli se jedná o preventabilní onemocnění, kterému lze snadno předejít, proočkovanost je u nás stále velmi nízká. Pokud by se tento stav podařilo změnit, můžeme předpokládat, že výskyt klíšťové encefalitidy u nás by se výrazně snížil.
|
|
|
Příprava rekombinantního inhibitoru serinových proteáz z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
VLNOVÁ, Ivana
Inhibitory serinových proteáz klíšťat mohou být díky jejich vlastnostem a funkcím vhodnými kandidáty na vakcínu proti klíšťatům. Cílem této práce bylo připravit rekombinantní inhibitor serinových proteáz z klíštěte Ixodes ricinus v bakulovirovém expresním systému. Pro tento účel byly vybrány dva proteiny z nadrodiny serpinů a transformovány do plazmidů. Jeden rekombinantní protein byl exprimován v bakulovirovém expresním systému, následně byl přečištěn a byla provedena jeho biochemická analýza.
|
|
|
Vakcinační potenciál cystatinu z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
HARCUBOVÁ, Adéla
Klíšťata patří mezi ektoparazity přenášející řadu patogenů nebezpečných pro člověka- bakterie, viry a protozoa. Vývoj vakcíny proti klíšťatům je velmi důležitý. Cystatiny hrají důležitou roli v trávení klíšťat a mají imunomodulační účinky. Z toho důvodu jsou cystatiny možnými kandidáty na vytvoření vakcíny proti klíšťatům. Tato práce se zabývá experimentální vakcinací myší rekombinantním cystatinem z klíštěte Ixodes ricinus.
|
|
|
Vliv klíštěcího serpinu IRS-2 na dendritické buňky aktivované TLR4 ligandem
POSPÍŠILOVÁ, Šárka
IRS-2 je inhibitor serinových proteáz z klíštěte Ixodes ricinus. Mým úkolem v této práci bylo zjistit efekt IRS-2 na dendritické buňky aktivované TLR4 ligandem nebo Borreliemi afzelii. Efekt byl studován na několika úrovních. Zaměřila jsem se na produkci cytokinů, expresi kostimulačních molekul a buněčnou signalizaci. Výsledky naznačují, že IRS-2 může ovlivňovat expresi kostimulačních molekul CD80 a CD86 na povrchu buněk, ale tato zjištění potřebují další ověření. IRS-2 neovlivnil produkci cytokinů. Vliv IRS-2 na aktivitu p38, Erk1/2 ani NF-?B v buňkách stimulovaných s LPS nebyl pozorován. IRS-2 negativně ovlivnil B. afzelii indukovanou fosforylaci transkripčního faktoru STAT 3.
|
|
|
Dynamika aktivit trávicích proteáz ve střevě klíšťat \kur{Ixodes ricinus} během sání na hostiteli.
KONVIČKOVÁ, Jitka
Proteolýza proteinů obsažených v nasáté krvi hostitele je hlavní fyziologický proces v klíšťatech. Tato práce se věnuje studiu dynamických profilů trávicích enzymů v klíštěti Ixodes ricinus (nymfy, samice) během fáze sání na hostiteli a během fáze trávení po odpadu z hostitele. Měřila jsem aktivity trávicích proteáz (v přítomnosti specifických fluorescenčních substrátů a inhibitorů). Aktivity enzymů byly zanedbatelné v počáteční fázi sání, následně exponenciálně rostly až k fázi plného nasátí. V průběhu trávení mimo hostitele aktivity většiny enzymů opět narůstaly až do období ovipozice samic nebo metamorfózy nymf. Proteinové hladiny jednotlivých proteáz byly potvrzeny imunolokalizací metodou Western blot.
|
|
| |
|
|
Charakterizace defensinu klíštěte \kur{Dermacentor marginatus}
LEŠTINOVÁ, Kateřina
Antimikrobiální peptidy (AMPs), které jsou součástí imunitního systému klíšťat a dalších žijících organismů, jsou schopné eliminovat patogenní organismy. Defensiny jsou u klíšťat nejdůležitější skupinou AMPs. V této práci byl studován defensin z klíštěte D. marginatus. Gen pro defensin byl izolován z nasátých samic D. marginatus. Pomocí RT-PCR byla detekována genová exprese ve slinných žlázách a ve střevě. Rekombinantní protein byl připraven v prokaryontním expresním systému, purifikován a testován pro svou antimikrobiální aktivitu. Byly připraveny specifické polyklonální králičí protilátky (anti DR IgG) a byla testována jejich specifita i sensitivita.
|
|
|
Přenos významných patogenů aktivovaný klíštěcími slinami
HUSPEKOVÁ, Helena
Ticks are one of the most common ectoparasites in the world and they are vectors of many tick-borne diseases. These diseases are caused by pathogens, including bacteria and viruses. The main point of the thesis is focused on enhancement of pathogens transmission, (especially Borrelia burgdorferi sensu lato, the causative agent of Lyme disease) by tick saliva or salivary glands extracts, and I tried to refer the main molecules, which have immunomodulatory or inhibition effect on the immunity of host. This effect can lead to the enhancement of pathogens transmission and contributes to their extension in host. The second part of the thesis is based on molecules, which can lead to the creation of vaccines against tick-borne diseases.
|
host ::
RSS.