|
|
Vlastnosti specifických protilátek prionových chorob a možnosti jejich využití
Šafaříková, Eva ; Holada, Karel (vedoucí práce) ; Mareš, Michael (oponent) ; Živný, Jan (oponent)
Souhrn Transmisivní spongiformní encefalopatie (TSE) jsou neurodegenerativní onemocnění charakterizovaná ukládáním patologické formy prionového proteinu (PrPTSE ) v mozku. V současnosti je PrPTSE jediný specifický biochemický marker lidských a zvířecích TSE. Laboratorní diagnostika je založena na průkazu rezistentního jádra PrPTSE (PrPres) po štěpení vzorku mozkového homogenátu proteinázou K. PrPres je posléze detekován pomocí western blotu nebo imunometodami. Obě metody jsou však obtížně standardizovatelné, časově náročné a nejsou schopné zachytit k proteolytickému štěpení senzitivní formy PrPTSE . V této práci jsme se zaměřili na přípravu nového typu testů založených na průkazu PrPTSE bez nutnosti štěpení proteinázou K či jiným enzymem. Působením glukózy a jiných redukujících cukrů v organismu vzniká spektrum produktů zvaných koncové produkty glykace. Vzhledem k dlouhodobému ukládání prionových depozit v mozku dochází ke glykaci i u PrPTSE . Detekce glykovaného PrPTSE by tak mohla sehrát roli diagnostického markeru. V rámci první části studie jsme se zaměřili na přípravu monoklonálních protilátek specifických pro glykovaný prionový protein. Připravili jsme bakteriálně exprimovaný rekombinantní lidský prionový protein (rhPrP). Na rhPrP jsme působili kyselinou glyoxalovou za vzniku karboxymethyl...
|
|
|
Vzdálené ovládání a vizualizace sběrnicových systémů KNX a DALI pro řízení budov
Holub, Jiří ; Macháček, Jan (oponent) ; Bátora, Branislav (vedoucí práce)
Tato diplomová práce je zaměřena na sběrnicové systémy a jejich ovládání pomocí vizualizace. V první části práce jsou rozebrány základní principy managementu energii a nejznámější sběrnicové systémy. Dále se práce věnuje softwarovému nástroji ETS 4 určenému k oživení systémové instalace KNX. V závěru teoretické části se práce zabývá softwarovým nástrojem SmartServer, který je určen pro komunikaci se sběrnicovým systémem KNX přes webové rozhraní. V praktické části byly vytvořeny dva laboratorní panely osazené prvky KNX a DALI. Dále byly pro ty to panely vytvořeny 3 laboratorní úlohy, které jsou vytvořeny tak, aby navazovaly na tématiku popsanou v teoretické části. Cílem prvního návodu je seznámení se s panelem a prostředím ETS4. Druhý návod je zaměřen na DALI prvky a řízení teploty pomocí regulátoru zařízení PriOn. Poslední návod popisuje, jak vytvořit základní vizualizaci a jak ovládat panel pomocí SmarServeru.
|
|
|
Detekce prionových proteinů a jejich interakce s kovy a metalothioneinem
Cardová, Alžběta
Prionová onemocnění vznikají konformační změnou buněčného prionového proteinu(PrPC) struktury alfa-helixu na jeho patologickou isoformu (PrPSc), která nabývá konformace beta-skládaného listu. Vlastnosti PrPC v mozku stále nejsou dostatečně prozkoumány, ale předpokládá se jeho afinita k iontům kovů. Dalším proteinem, který má kov-vázající vlastnosti je i metalothionein (MT). Mozkově specifická isoforma MT se nazývá MT-III a předpokládá se její účast na udržování koncentrace kovových iontů v mozku. Cílem této práce byla příprava rekombinantního buněčného prionového proteinu v E. coli. Dále využití tohoto proteinu k odhalení interakcí mezi ionty kovů(Cu, Zn), MT a PrPC pomocí metody diferenční pulzní voltametrie. Poslední část pak byla věnována stanovení hladiny MT-III v prion-infekčních a neinfekčních myších mozkových tkáních různých genotypů.
|
|
|
Synthetic scan of C-domain from prion proteins
Šebestík, Jaroslav ; Zawada, Zbigniew ; Šafařík, Martin ; Hlaváček, Jan
Prions are suspected as culprits of several neuropathogenic diseases. A combination of chemical and recombinant syntheses is a powerful tool for studying prion role in pathogenesis of neurodegenerative diseases. Due to the presence of “difficult” sequences in the prion protein molecule, chemical ligation procedure using peptide thioesters as key building blocks is a method of choice. Therefore, a synthetic scan of peptides constituting the mouse prion protein (MoPrP) C-domain 93-231 was carried out. The synthesis on chlorotritylchloride resin was the most promising for most peptides. Only the octadecapeptide MoPrP195-212 could not be synthesized by automated peptide synthesis even using the β-sheet breaking dipeptides. This difficulty was overcome by manual peptide synthesis with careful monitoring of coupling and Fmoc removal.
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.