|
|
Biotransformační aspekty nových karbocyklických analogů nukleosidů.
Rozumová, Nela ; Mertlíková Kaiserová, Helena (vedoucí práce) ; Rumlová, Michaela (oponent)
Analogy karbocyklických nukleosidů s norbornanovým skeletem byly syntetizovány na ÚOCHB AV ČR a představují nová potenciální chemoterapeutika s významnou aktivitou proti Coxsackie virům. Základním cílem této práce bylo zkoumání metabolismu a mechanismu účinku původního karbocyklického nukleosidového analogu MS 254, jež se vyznačuje protivirovou a cytostatickou aktivitou. Částečně je pozornost věnována i dvěma strukturně příbuzným látkám (MS 255, MS 320). V této práci byla stanovena cytotoxicita těchto látek v buněčné kultuře a vliv látky MS 254 na množství celkového a oxidovaného glutathionu, na aktivitu glutathion-S-transferasy (GST), glutathionreduktasy (GR) a na oxidační stres. Dále byla stanovena kinetika přeměny MS 254 lidskou GST. Bylo potvrzeno, že ze tří sledovaných látek je nejvíce cytotoxická látka MS 255 a nejméně cytotoxická je látka MS 254. Dále bylo zjištěno, že látka MS 254 nenavozuje v buňce oxidační stres a že se vzrůstající koncentrací této látky se zvyšuje aktivita GST i GR. Michaelis-Mentenové konstanta pro konjugaci látky MS 254 s glutathionem (hlavní metabolická cesta) byla stanovena v řádech milimolů, což ukazuje na relativně nízkou afinitu substrátu ke GST.
|
|
|
Enantioseparace a derivatizace vybrané aminokyseliny.
Rozumová, Nela ; Loukotková, Lucie (oponent) ; Bosáková, Zuzana (vedoucí práce)
Enantioseparace nativní i derivatizované formy D,L-valinu byla studována s využitím chirální stacionární fáze, založené na bázi teikoplaninového chirálního selektoru. Pro enantioseparaci a kvantifikaci nederivatizovaného D,L-valinu byla nejvhodnější mobilní fáze methanol/voda 50/50 (v/v) a UV detekce při 205 nm. Byly určeny hodnoty LOD a LOQ pro L- a D-enantiomery, řádově v setinách mg/ml. Derivatizace D,L-valinu byla provedena pomocí 9-fluorenylmethylchlormravenčanu (FMOC-Cl). Optimalizovaná mobilní fáze pro enantioseparaci FMOC-D,L-valinu byla 37/63 (v/v) methanol/0,5% triethylaminoctanový pufr, pH 4,0. S fluorescenční detekcí při vlnové délce excitace 254 nm a vlnové délce emise 314 nm byla provedena kvantifikace a hodnoty LOD a LOQ pro FMOC-L- a FMOC-D-valin se pohybovaly v řádu setin až desetin g/ml. Výsledky ukazují, že po derivatizaci bylo dosaženo mnohem vyšší citlivosti detekce.
|
host ::
RSS.