|
|
Mechanismy transportu látek hematoencefalickou bariérou a jejich ovlivnění L-karnitinem
Havelek, Radim ; Herink, Josef (vedoucí práce) ; Kudláčková, Zděnka (oponent)
S tím jak populace stárne, se zvyšuje prevalence mnoha neurodegenerativních chorob, rakoviny a infekce mozku. To je jeden z důvodu, proč je hematoencefalická bariéra a její transportní mechanismy intenzivně zkoumány. Hematoencefalická bariéra je unikátní membránová bariéra, která těsně odděluje mozek od cirkulující krve. Hematoencefalická bariéra je tvořena spojením těsně přiléhajících tight junction mezi endotelovými buňkami kapilár mozku, které nejsou fenestrovány a které vykazují minimální pinocytózu. Endotelové buňky kapilár vytvářejí polarizovanou bariéru, která reguluje přenos molekul přes hematoencefalickou bariéru. L-karnitin je složka nepostradatelná v periferních tkáních pro transfer mastných kyselin k jejich oxidaci do buňky, akumulující se v mozku nehledě na nízkou β-oxidaci v tomto orgánu. V případě vstupu do mozku, L-karnitin přechází hematoencefalickou bariéru přes specifické transportéry pro karnitin. Cílem práce bylo popsat současné informace o hematoencefalické bariéře, L-karnitinu, transportních mechanismech přes hematoencefalickou bariéru a zjistit zdali podání L-karnitinu může ovlivnit efekt 7- methoxytakrinu. Jako ukazatel efektu testovaného léčiva bylo zvoleno stanovení aktivity AChE Ellmanovou metodou ve vybraných částech mozku potkana. Aktivita AChE byla měřena ve frontální...
|
|
|
In vitro studium mechanismu protinádorového účinku montaninových alkaloidů čeledi Amaryllidaceae
Koutová, Darja ; Havelek, Radim (vedoucí práce) ; Tichý, Aleš (oponent) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Souhrn Možnosti současné terapie nádorových onemocnění jsou široké, přesto však tato onemocnění stále patří mezi nejčastější příčiny úmrtí. Dosavadní poznatky biomedicínského výzkumu se čím dál tím více uplatňují v léčebné strategii tohoto typu onemocnění. Pochopení molekulárních drah spojených se vznikem nádorových buněk, jejich progresí a metastází vedl k objevu nových protinádorových léčiv a rozvoji cílené léčby. Současně také poznání molekulárního mechanismu účinku protinádorových léčiv získaných z rostlin či jejich semisyntetických derivátů umožnuje rozšířit portfolio dosud používaných cytostatik. Cílem disertační práce bylo studium cytotoxického a cytostatického účinku dosud neprozkoumaných isochinolinových alkaloidů montaninového typu in vitro s použitím panelu nádorových buněčných linií a nenádorové buněčné linie lidských plicních fibroblastů. V počáteční fázi studie byly základní typy montaninových alkaloidů - montanin a pankracin - izolovány, dále podrobeny screeningu cytotoxicity s použitím panelu devíti nádorových buněčných linií odlišného histotypu a jedné nenádorové buněčné linie plicních fibroblastů. Byly stanoveny hodnoty 50 % inhibiční koncentrace IC50. Pankracin, parentní alkaloid čeledi Amaryllidaceae, byl komplexně prostudován s cílem pochopit molekulární mechanismus jeho účinku,...
|
|
|
Možnosti průtokové cytometrie v analýze reakce buněk na genotoxický stres
Havelek, Radim ; Řezáčová, Martina (vedoucí práce) ; Bílková, Zuzana (oponent) ; Štětina, Rudolf (oponent)
Možnosti průtokové cytometrie v analýze reakce buněk na genotoxický stres Průtoková cytometrie je moderní metoda analýzy imunofenotypu a funkčních charakteristik buněk. Je to technika kvantitativní analýzy jedné buňky, která k detekci využívá optických vlastností buněk unášených v proudu nosné kapaliny stanovených paprskem laseru. Analýza a rozlišení buněk je založena na jejich velikosti, granularitě, a zdali buňka nese fluorescenční molekulu ve formě konjugované protilátky, nebo fluorescenčního barviva. Buňky mohou být značeny fluorescenčními barvivy, inkubovány s fluorogeními substráty, označeny fluorochromy konjugovanými protilátkami specifickými k molekulám na povrchu nebo uvnitř buňky. Průtokové cytometry jsou multiparametrické, zaznamenávající několik měření z jedné buňky. Z tohoto důvodu jsme schopni identifikovat homogenní subpopulaci v heterogenní populaci buněk. Buňky vystaveny působení genotoxických agens reagují kvantitativně a kvalitativně v závislosti na absorbované dávce a buněčném typu. S cílem vypořádat se s poškozením buněčné DNA dojde k aktivaci dočasné zástavy buněčné cyklu a mechanismů odpovědi na poškození DNA, jež poskytnou nezbytný čas k její účinné opravě. Za situace kdy tyto mechanismy selžou, nebo poškození DNA je neopravitelné, dojde k buněčné smrti apoptózou, nebo je...
|
|
|
Možnosti průtokové cytometrie v analýze reakce buněk na genotoxický stres
Havelek, Radim ; Řezáčová, Martina (vedoucí práce) ; Bílková, Zuzana (oponent) ; Štětina, Rudolf (oponent)
Možnosti průtokové cytometrie v analýze reakce buněk na genotoxický stres Průtoková cytometrie je moderní metoda analýzy imunofenotypu a funkčních charakteristik buněk. Je to technika kvantitativní analýzy jedné buňky, která k detekci využívá optických vlastností buněk unášených v proudu nosné kapaliny stanovených paprskem laseru. Analýza a rozlišení buněk je založena na jejich velikosti, granularitě, a zdali buňka nese fluorescenční molekulu ve formě konjugované protilátky, nebo fluorescenčního barviva. Buňky mohou být značeny fluorescenčními barvivy, inkubovány s fluorogeními substráty, označeny fluorochromy konjugovanými protilátkami specifickými k molekulám na povrchu nebo uvnitř buňky. Průtokové cytometry jsou multiparametrické, zaznamenávající několik měření z jedné buňky. Z tohoto důvodu jsme schopni identifikovat homogenní subpopulaci v heterogenní populaci buněk. Buňky vystaveny působení genotoxických agens reagují kvantitativně a kvalitativně v závislosti na absorbované dávce a buněčném typu. S cílem vypořádat se s poškozením buněčné DNA dojde k aktivaci dočasné zástavy buněčné cyklu a mechanismů odpovědi na poškození DNA, jež poskytnou nezbytný čas k její účinné opravě. Za situace kdy tyto mechanismy selžou, nebo poškození DNA je neopravitelné, dojde k buněčné smrti apoptózou, nebo je...
|
|
|
Možnosti průtokové cytometrie v analýze reakce buněk na genotoxický stres
Havelek, Radim ; Řezáčová, Martina (vedoucí práce) ; Bílková, Zuzana (oponent) ; Štětina, Rudolf (oponent)
Možnosti průtokové cytometrie v analýze reakce buněk na genotoxický stres Průtoková cytometrie je moderní metoda analýzy imunofenotypu a funkčních charakteristik buněk. Je to technika kvantitativní analýzy jedné buňky, která k detekci využívá optických vlastností buněk unášených v proudu nosné kapaliny stanovených paprskem laseru. Analýza a rozlišení buněk je založena na jejich velikosti, granularitě, a zdali buňka nese fluorescenční molekulu ve formě konjugované protilátky, nebo fluorescenčního barviva. Buňky mohou být značeny fluorescenčními barvivy, inkubovány s fluorogeními substráty, označeny fluorochromy konjugovanými protilátkami specifickými k molekulám na povrchu nebo uvnitř buňky. Průtokové cytometry jsou multiparametrické, zaznamenávající několik měření z jedné buňky. Z tohoto důvodu jsme schopni identifikovat homogenní subpopulaci v heterogenní populaci buněk. Buňky vystaveny působení genotoxických agens reagují kvantitativně a kvalitativně v závislosti na absorbované dávce a buněčném typu. S cílem vypořádat se s poškozením buněčné DNA dojde k aktivaci dočasné zástavy buněčné cyklu a mechanismů odpovědi na poškození DNA, jež poskytnou nezbytný čas k její účinné opravě. Za situace kdy tyto mechanismy selžou, nebo poškození DNA je neopravitelné, dojde k buněčné smrti apoptózou, nebo je...
|
|
|
Mechanismy transportu látek hematoencefalickou bariérou a jejich ovlivnění L-karnitinem
Havelek, Radim ; Herink, Josef (vedoucí práce) ; Kudláčková, Zděnka (oponent)
S tím jak populace stárne, se zvyšuje prevalence mnoha neurodegenerativních chorob, rakoviny a infekce mozku. To je jeden z důvodu, proč je hematoencefalická bariéra a její transportní mechanismy intenzivně zkoumány. Hematoencefalická bariéra je unikátní membránová bariéra, která těsně odděluje mozek od cirkulující krve. Hematoencefalická bariéra je tvořena spojením těsně přiléhajících tight junction mezi endotelovými buňkami kapilár mozku, které nejsou fenestrovány a které vykazují minimální pinocytózu. Endotelové buňky kapilár vytvářejí polarizovanou bariéru, která reguluje přenos molekul přes hematoencefalickou bariéru. L-karnitin je složka nepostradatelná v periferních tkáních pro transfer mastných kyselin k jejich oxidaci do buňky, akumulující se v mozku nehledě na nízkou β-oxidaci v tomto orgánu. V případě vstupu do mozku, L-karnitin přechází hematoencefalickou bariéru přes specifické transportéry pro karnitin. Cílem práce bylo popsat současné informace o hematoencefalické bariéře, L-karnitinu, transportních mechanismech přes hematoencefalickou bariéru a zjistit zdali podání L-karnitinu může ovlivnit efekt 7- methoxytakrinu. Jako ukazatel efektu testovaného léčiva bylo zvoleno stanovení aktivity AChE Ellmanovou metodou ve vybraných částech mozku potkana. Aktivita AChE byla měřena ve frontální...
|
|
| |
host ::
RSS.