|
|
Top-down, middle-up a bottom-up RPLC analýzy biofarmaceutik pomocí jedné kolony
Hývnar, Ondřej ; Lenčo, Juraj (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Ondřej Hývnar Školitel: PharmDr. Juraj Lenčo, Ph.D. Název diplomové práce: Top-down, middle-up a bottom-up RPLC analýzy biofarmaceutik pomocí jedné kolony V současné době jsou pro top-down, middle-up i bottom-up analýzy biofarmaceutik pomocí kapalinové chromatografie potřeba různé kolony. Hlavním cílem této práce bylo zjistit, jestli je možné použít na všechny tyto typy analýz novou kolonu BioResolve RP mAb Polyphenyl firmy Waters, určenou primárně k top-down a middle-up analýzám. Analyzovány byly biofarmaceutika trastuzumab, bevacizumab, panitumumab a aflibercept a to jako intaktní pro top-down analýzy, redukované, štěpené proteázou IdeS, štěpené proteázou IdeS a redukované pro middle-up analýzy a štěpené endopeptidázou Lys-C a trypsinem pro bottom-up analýzy. Top-down a middle-up analýzy byly provedeny na kapalinovou chromatografií s UV detekcí. Ověřovali jsme při nich schopnost kolony analyzovat takto připravené biofarmaceutika v našich podmínkách. Zjistili jsme, že přestože si kolona dokáže poradit i s intaktními biofarmaceutiky, tak lepší výsledky podává při middle-up analýzách. Bottom-up analýzy byly provedeny kapalinovou chromatografií ve spojení s hmotnostní spektrometrií a zde byla kolona...
|
host ::
RSS.