|
|
HPLC analýza daunorubicinu a jeho metabolitu
Adamíková, Klára ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
V současné době patří vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) stále mezi dominantní separační metody, je široce využívána ve všech oblastech analýzy léčiv. HPLC umožňuje kvalitativní i kvantitativní hodnocení separovaných složek směsi. V této práci je popsán vývoj metody pro HPLC analýzu daunorubicinu (DAU) a jeho metabolitu daunorubicinolu (DAU-OL) v králičí plazmě. Analyzované látky byly nejprve odděleny od interferujících substancí v plazmě deproteinací. Z testovaných deproteinačních činidel byl vybrán methanol (600 μl), jehož extrakční výtěžnost byla nejvyšší. Separace DAU a jeho metabolitu byla dosažena na koloně Zorbax SB-Aq (3,5 µm, 150 x 4,6 mm; Agilent Technologies, USA), mobilní fáze byla tvořena vodnou složkou, která obsahovala čištěnou vodu s fosfátovým pufrem, okyselená kyselinou fosforečnou (výsledné pH = 2,4), a organickou složkou tvořenou acetonitrilem v poměru 74:26 (v/v). Analýza proběhla za podmínek izokratické eluce během 15 minut, průtok mobilní fáze byl 1,1 ml/min a nástřik 40 μl vzorku. Fluorescenční detektor měl nastavenou emisní a excitační vlnovou délku na 480 nm a 560 nm. Jako vnitřní standard byl použit doxorubicin. Metoda byla pilotně validována s ohledem na linearitu (4 - 83 ng/ml pro DAU, 25 - 500 ng/ml pro DAU-OL), přesnost a správnost. Byla stanovena stabilita...
|
|
|
HPLC analýza daunorubicinu a jeho metabolitu
Adamíková, Klára ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
V současné době patří vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) stále mezi dominantní separační metody, je široce využívána ve všech oblastech analýzy léčiv. HPLC umožňuje kvalitativní i kvantitativní hodnocení separovaných složek směsi. V této práci je popsán vývoj metody pro HPLC analýzu daunorubicinu (DAU) a jeho metabolitu daunorubicinolu (DAU-OL) v králičí plazmě. Analyzované látky byly nejprve odděleny od interferujících substancí v plazmě deproteinací. Z testovaných deproteinačních činidel byl vybrán methanol (600 μl), jehož extrakční výtěžnost byla nejvyšší. Separace DAU a jeho metabolitu byla dosažena na koloně Zorbax SB-Aq (3,5 µm, 150 x 4,6 mm; Agilent Technologies, USA), mobilní fáze byla tvořena vodnou složkou, která obsahovala čištěnou vodu s fosfátovým pufrem, okyselená kyselinou fosforečnou (výsledné pH = 2,4), a organickou složkou tvořenou acetonitrilem v poměru 74:26 (v/v). Analýza proběhla za podmínek izokratické eluce během 15 minut, průtok mobilní fáze byl 1,1 ml/min a nástřik 40 μl vzorku. Fluorescenční detektor měl nastavenou emisní a excitační vlnovou délku na 480 nm a 560 nm. Jako vnitřní standard byl použit doxorubicin. Metoda byla pilotně validována s ohledem na linearitu (4 - 83 ng/ml pro DAU, 25 - 500 ng/ml pro DAU-OL), přesnost a správnost. Byla stanovena stabilita...
|
host ::
RSS.