|
|
Vývoj a optimalizace metody pro stanovení jódu v různých matricích
Kušnír, Patrik ; Horstkotte Šrámková, Ivana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Patrik Kušnír Školiteľ: PharmDr. Ivana Šrámková, Ph.D. Konzultant: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Vývoj a optimalizace metody pro stanovení jódu v různých matricích Jód patrí medzi dôležité stopové prvky v strave. Vo svete trpí nedostatkom jódu v príjme potravy približne 2 miliardy ľudí. Nedostatok jódu vedie k nedostatku tvorby hormónov štítnej žľazy, ktorý súvisí s ochoreniami ako napr. struma. Z tohto dôvodu sa jód pridáva do bežných potravín (jódovaná kuchynská soľ) a dôležité sú aj iné zdroje tohto prvku, napríklad minerálne vody. Z tohto pohľadu je sledovanie množstva jódu dôležitou úlohou pre včasné odhalenie rizika chorôb spojených so štítnou žľazou a ich diagnostikou. Cieľom tejto práce bolo vyvinúť jednoduchú metódu s využitím jednoduchého prístrojového vybavenia na stanovenie jódu v rôznych vzorkách. Súčasťou vývoja našej metódy bola optimalizácia podmienok pre analýzu jódu v stopovom množstve a stanovenie obsahu jódu vo vybraných vzorkách. Ako technika bola využitá prietoková technika Lab-In syringe. Po optimalizácii táto metóda bola využitá na analýzu stopového množstva jódu vo vzorke nosných kvapiek a v doplnku stravy s obsahom jódu.
|
|
| |
|
|
Vývoj imunochromatografického stanovení pro testování reálných vzorků obsahujících TNT
Kosařová, Lucie ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lucie Kosařová Školitel: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj imunochromatografického stanovení pro testování reálných vzorků obsahujících TNT V dnešní době je stále více vyžadováno velice rychlé získání výsledků. Zejména to platí pro látky nebezpečné a potenciálně nebezpečné. Jednou z takových látek je 2,4,6-trinitrotoluen (TNT), látka která byla testována v průběhu této práce. TNT byl značně používán jako výbušnina pro vojenské účely a je stále jednou z nejpoužívanějších výbušnin. Jeho výhody, jako nízké výrobní náklady, bezpečná manipulace a dobrá výbušnost, může vést ke zneužití této sloučeniny teroristy. TNT je navíc známým polutantem kvůli jeho toxicitě a nízké biodegradabilit. Může kontaminovat povrchovou i spodní vodu, půdu a sedimenty, a tak způsobovat problémy jak v životním prostředí, tak zdravotní problémy. Proto je požadováno stanovit tuto nitroaromatickou sloučeninu v minimálních koncentracích, velmi rychle i mimo laboratoř. Tyto požadavky může splnit lateral flow test. V průběhu této práce byl vyvinut imunochromatografický test (LFIA) založený na značení koloidním zlatem pro detekci TNT v reálných vzorcích. Tyto vzorky byly získány kontrolovaným výbuchem TNT,...
|
|
|
Elektro membránová extrakce za nehybných podmínek - Ultrarychlá izolace kyselých léčiv z neupravené lidské plazmy
Prosová, Klára ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Tato práce se zabývá studiem elektro-membránové extakce (EME) léčiv kyselé povahy z biologických vzorků za naprosto stabilních podmínek; čili bez využití třepání. Jak je z názvu patrné, EME přes kapalnou membránu na nosiči (SLM) je důsledkem existence elektrického potenciálového rozdílu mezi kompartmenty oddělenými membránou *1+*2+. Byla provedena extrakce tří kyselých léčiv z neupravené lidské plazmy, a to pomocí organického rozpouštědla (dekanol) imobilizovaného v pórech polymerního dutého vlákna (o tloušťce stěny 200 µm) jako SLM, do přijímacího roztoku, kterým byl roztok 10 mM NaOH. Hnací silou pro extrakci bylo 10-30 V. Byl studován vliv doby extrakce, napětí a hodnot pH dárcovského a přijímacího roztoku a byly navrženy optimální podmínky pro dosažení efektivity. Ketorpofen, ibuprofen a naproxen ze skupiny nesteroidních antiflogistik byly extrahovány ze vzorků plazmy s výtěžky dosahujícími hodnot 2 až 20 % za 5-10 minut. Systém byl během extrakce udržován v nehybném stavu a hnací silou pro přechod cílových analytů přes SLM bylo pouze napětí 20 V. Metoda představuje velice efektivní způsob předúpravy a zakoncentrování před separací za použití kapilární elektroforézy (CE) nebo vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). Metoda vykazuje lineární odezvu signálu v rozmezí koncentrací 0.5 až 30...
|
|
|
Stanovení vitamínů A, D a E metodou sekvenční injekční chromatografie
Trefilová, Kateřina ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Byl vypracován postup separace vitamínů A, D a E pomocí monolitických kolon zapojených v systému sekvenční injekční analýzy. Po provedené optimalizaci byly vybrány následující podmínky separace: analýza na: monolitické koloně 25 mm dlouhé Chromolith Flash RP-18e kolony, 4,6 mm I.D. (Merck, Germany), při rychlosti (10 µl/s) za použití mobilní fáze acetonitril metanol (1:1, v/v). Monolitická kolona byla v SIA systému zapojena mezi vícecestný ventil a průtokovou Z celu. Spektrofotometrická detekce byla provedena při vlnových délkách absorpčních maxim pro vitamín A - 324 nm, D - 265 nm, E - 285. Celková délka SIA analýzy byla 400 s (z toho 230 s trvala vlastní separace). Ze základních chromatografických validačních parametrů byly vyhodnoceny faktor symetrie AS, rozlišení RS, počet teoretických pater a opakovatelnost. Faktor symetrie pro vitamín A - 1,309, pro vitamín D2 - 1,302, pro D3 - 1,286 , pro vitamín E - 1,158. Rozlišení píků pro vitamíny A-D2 je 3,607, D2-D3 4,232, D-E 1,532. Počet teoretických pater pro vitamín A 998, pro vitamín D2 1621, pro vitamín D3 2091 a vitamín E 2376. Opakovatelnost byla vypočítána z 6 nástřiků, kdy z výšky píků jednotlivých látek byla vypočítaná relativní směrodatná odchylka. Opakovatelnost je pro vitamín A - 0,53 %, pro vitamín D2 - 0,35 %, pro vitamín D3 - 0,81 % a...
|
|
|
Extrakce na tuhou fázi a její miniaturizace metodou Lab-On-Valve
Krchňáková, Eva ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Eva Krchňáková Školitel: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Extrakce na tuhou fázi a její miniaturizace metodou Lab-On-Valve. Diplomová práce se zabývá možností automatizovat extrakci na tuhou fázi (SPE) ve spojení s mikročásticovou analýzou (BI). Cílem práce bylo vyzkoušet nahrazení mikročástic v mikročásticové analýze sorbentem z SPE, zjistit chování sorbentu v tomto systému a následně ověřit, zda je možné extrakci na tuhou fázi miniaturizovat se všemi kroky, které jsou k provedení metody nutné. V práci byla manuálně provedena extrakce na tuhou fázi, ve které bylo testováno 7 sorbentů: Lichrolut MERCK RP-18, DSC-18, DSC-18Lt, DSC-8, DSC-PH, DSC-CN a HLB Oasis. Z pokusu vyplynuly nejlepší možné podmínky pro provedení extrakce na tuhou fázi a to: aktivace sorbentu a eluce analytu 100% acetonitrilem, solvatace sorbentu, rozpuštění vitaminu D a vymytí balastu ze sorbentu zředěnou kyselinou octovou o pH 3. Pro systém je nejvhodnější sorbent HLB Oasis od firmy Waters, který je smáčivý s vodou a neměl by se rozptylovat po systému, což bylo po použití sorbentu potvrzeno. Ostatní sorbenty byly pro systém nevhodné z důvodu nesmáčivosti s vodou a velké jemnosti sorbentu. Sorbenty...
|
|
|
On-line extrakce na tuhé fázi pomocí sekvenční injekční analýzy
Hadysová, Zuzana ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Zuzana Hadysová Školitel: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: On-line extrakce na tuhé fázi pomocí sekvenční injekční analýzy Tato diplomová práce je zaměřena na porovnání tří sorbentů (Iontosorb OXIN 50, Iontosorb OXIN 100 a TOYOpearl AF-chelate-650M) s cílem najít ten nejvhodnější pro analýzu Zn2+ při použití on-line extrakce na tuhou fázi s využitím sekvenční injekční analýzy. Při práci byly používány roztoky síranu zinečnatého o koncentracích 25 nmol/l, 50 nmol/l, 100 nmol/l, 200 nmol/l, 500 nmol/l, 1000 nmol/l, 1500 nmol/l a 2000 nmol/l. Při analýze byl dále využíván pufr o pH 6, eluční činidlo HCl o pH 1 a činidlo 4-(2- Pyridylazo)resorcinol (PAR). Snahou bylo extrahovat Zn2+ v co nejnižších koncentracích. Testovány byly kalibrační rozsahy a opakovatelnost metody. Nejlepším sorbentem z porovnávaných byl Iontosorb OXIN 100.
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení vitaminu E v přípravku geladrink
Švestková, Petra ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Byla vyvinuta HPLC metoda pro stanovení obsahu vitaminu E acetátu v přípravku Geladrink Forte práškový nápoj - ananas. Metoda je založena na využití kolony Chromolith Performance RP-18e (100 x 4,6 mm) a UV detekce p_i 290 nm. Vitamin E acetát byl separován v přítomnosti tokolu jako vnitřního standardu od matrice přípravku. Byla využita izokratická eluce mobilní fází methanol:voda (98:2), pr_toková rychlost mobilní fáze byla 1,5 ml/min. Měření probíhalo p_i 30 řC. Systém umožnil úspěšnou separaci v čase pod 5 min. Retenční _as tokolu byl 2,337 min a vitaminu E acetátu 4,271 min. Rozlišení chromatografických píků tokolu a vitaminu E acetátu bylo 7,515. Metoda byla dále využita pro analýzu vitaminu E acetátu v přípravku Chondrotin - MSM 2600. Stanovené koncentrace vitaminu E acetátu byly přepočítány na obsah vitaminu E, který deklaruje výrobce. Klíčová slova: vitamin E acetát, HPLC, Geladrink, Chondrotin - MSM 2600
|
|
|
Stanovení železitých iontů v SIA systému s chemiluminiscenční detekcí
Blahynková, Michaela ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Michaela Blahynková Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení hladin železitých iontů v SIA systému s chemiluminiscenční detekcí Bylo sledováno katalytické působení železitých iontů na oxidaci luminolu peroxidem vodíku v bazickém prostředí pomocí chemiluminiscenční detekce. Optimalizována byla sekvence aspirace vzorku a činidel, jejich objemy, rychlosti mísení a průtoku detektorem. Také byl zkoušen vliv promísení, různých železitých sloučenin a přítomnost železnatých iontů na intenzitu chemiluminiscence. Výsledky optimalizace byly sekvence aspirace 50 µl H2O2 10-3 mol·l-1 , 50 µl K3[Fe(CN)6] 10-3 mol·l-1 ,50 µl luminol 10-3 mol·l-1 . Aspirace roztoků probíhala při 100 µl·s-1 , rychlost průtoku detektorem byla 70 µl·s-1 . Kalibrační závislost intenzity chemiluminiscence na koncentraci železitých iontů při nízkých koncentracích (10-7 - 10-9 mol·l-1 ) byla nelineární. Lineární oblast kalibrace Fe3+ iontů za standardních podmínek nebyla nalezena s dostatečně vysokým korelačním koeficientem, proto byla použita polynomická kalibrační závislost druhého řádu s korelačním koeficientem Rš = 0,9785. Byl vypočítán detekční limit, který se rovná 7,48∙10-10 mol∙l-1 Fe3+...
|
|
|
Automatizace liberačních testů pro uvolňování biologicky aktivních látek z nanovláken
Schneidrová, Marie ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Marie Schneidrová Školitel: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Automatizace liberačních testů pro uvolňování biologicky aktivních látek z nanovláken Tato diplomová práce se zabývá automatizací liberace antibiotika tetracyklinu (TTC) z nanovlákenného nosiče, za využití neseparační průtokové metody sekvenční injekční analýzy. Pro detekci signálu byl používán UV-VIS spektrofotometr. Měření byla realizována za využití 1-3 paralelně zapojených Franzových cel umístěných ve vodní lázni. Jako liberační média byly použity tlumivé roztoky o pH 7,4 a 4,5. Liberace TTC probíhala ze dvou různých nanovlákenných nosičů - typ "A" a "AK", lišících se v postupu při své výrobě. Každý z nich tedy vykazoval odlišné vlastnosti, týkající se především množství navázaného TTC a způsobu jeho vazby na nosič. Výroba těchto nanovláken byla realizována Technickou univerzitou v Liberci za využití technologie NanoSpiderTM . Měření probíhala za různých, předem stanovených podmínek, reprezentujících stav lidské kůže - dvě rozdílné hodnoty pH (7,4; 4,5) a teploty (32řC; 37řC). Byly využívány také čtyři různé typy membránových filtrů, které liberační profily v průběhu měření různě ovlivňovaly. Jednalo se o filtry...
|
host ::
RSS.