|
|
Vizualizace a analýza distribuce komplexu ARP2/3 v rostlinách
Martinek, Jan ; Schwarzerová, Kateřina (vedoucí práce) ; Libusová, Lenka (oponent)
Aktinový cytoskelet je velmi dynamická struktura, která podléhá neustálé přestavbě polymerací, depolymerací, stříháním, svazkováním a větvením. Jedním z faktorů řídících polymeraci aktinu je ARP2/3, heteroheptamerický proteinový komplex evolučně konzervovaný takřka u všech euka- ryotických organismů. Podjednotky ARP2 a ARP3 se strukturou podobají monomeru aktinu a tvoří v rámci komplexu nukleační centrum pro polymeraci nových aktinových vláken. Komplex je navíc schopen nasedat na již existující mikrofilamenta a vytvářet nové větve pod úhlem cca 70 ř. V živočišných buňkách hraje komplex ARP2/3 klíčovou roli v buněčné motilitě skrze tvorbu la- mellipodií a jeho mutace jsou obvykle letální. U rostlin mají mutanti pouze mírné fenotypové pro- jevy na úrovni buněčné morfologie, jako jsou deformované trichomy nebo méně laločnaté pokož- kové buňky. Abychom objasnili funkci komplexu ARP2/3 v rostlinách, rozhodli jsme se jej vizua- lizovat in vivo v diferencovaných buňkách Arabidopsis thaliana pomocí translační fúze jednotli- vých podjednotek s GFP. Fúzní proteiny GFP-AtARPC2 a GFP-AtARPC5 po transformaci do mu- tantů postrádajících odpovídající podjednotku komplexu komplementovaly mutaci a zachránily deformovaný fenotyp trichomů. Oba fúzní proteiny vykazovaly stejnou difusní lokalizaci v cyto- plasmě, v...
|
host ::
RSS.