|
|
The impact of post-translational modifications on TRPC5 ion channel activation and modulation
Mitro, Michal ; Zímová, Lucie (vedoucí práce) ; Dolejší, Eva (oponent)
Transientní receptorový potenciálový kanonický kanál 5 (TRPC5), propustný pro vápenaté ionty, se uplatňuje jako receptor v senzorických neuronech, ledvinách a mozku, kde ovlivňuje zánětlivé procesy a různé typy bolesti. Přestože se předpokládá, že posttranslační modifikace významně ovlivňují vrátkování TRPC5 a jeho transport na membránu, bylo těchto procesů dosud popsáno poměrně málo. Za využití dostupných bioinformatických databází a dat z hmotnostní spektrometrie byla identifikována v rámci předložené práce fosforylační místa. Následně byla provedena funkční charakterizace těchto míst zavedením aspartátových (napodobujících fosfát) nebo alaninových (neumožňujících vazbu fosfátu) mutací pomocí cílené mutageneze. Technikou terčíkového zámku v uspořádání snímání aktivity z celé buňky byly zkoumány membránové proudy vyvolané napětím nebo působením agonisty. Výsledky ukázaly, že individuální záměny S193 a S195 z N-koncové domény za aspartáty významně zpomalují kinetiku vrátkování. Kromě toho byl u S193A pozorován fenotyp zesílení funkce kanálu. Molekulárně dynamické simulace naznačily, že fosforylace S193 způsobuje změny v interakcích mezi sousedními podjednotkami. Biotinylace navíc potvrdila, že změny aktivity mutací S193 nejsou způsobeny zvýšeným transportem proteinu na plazmatickou membránu....
|
|
|
The role of TRP ion channels in rheumatoid arthritis pain
Havrilčáková, Gabriela ; Zímová, Lucie (vedoucí práce) ; Heleš, Mário (oponent)
Reumatoidná artritída je ochorenie, ktoré na svete postihuje milióny ľudí. Ide o chronické autoimunitné ochorenie vyvolávajúce zápal v kĺboch. Zápal postihuje kĺbnu výstelku a zapríčiňuje postupné ničenie kĺbnej chrupky. Hlavným príznakom je opuch a bolesť kĺbov. Vnímanie bolesti je úzko spojené so skupinou TRP receptorov, exprimovaných na senzorických neurónoch. Na bolesť sprevádzajúcu reumatoidnú artritídu má významný vplyv tiež stav zápalu v postihnutých kĺboch, na ktorom sa podieľajú bunky kĺbnej výstelky - synoviálne fibroblasty. Tie tiež exprimujú podskupinu TRP receptorov, ktoré majú dôležitú úlohu v patofyziológii rozvoja artritídy. V súvislosti s bolesťou a zápalom patria medzi najviac preštudované TRP receptory TRPV1 a TRPA1. Táto práca popisuje poznatky o týchto dvoch receptoroch vo vzťahu k bolesti pri reumatoidnej artritíde. Zaoberá sa však tiež receptorom TRPC5, u ktorého bolo ešte len nedávno na myšom modele dokázané, že jeho inhibícia vedie k zhoršeniu prejavov tohto ochorenia. Výsledky štúdií diskutované v tejto bakalárskej práci dokazujú, že farmakologická modulácia aktivity TRP receptorov je sľubný spôsob možnej budúcej liečby reumatoidnej artritídy, vrátane jej hlavného prejavu - bolesti. Kľúčové slová: reumatoidná artritída, tranzientný receptorový potenciálový kanál, TRP...
|
|
|
Výskyt a vlastnosti teplotně aktivovaných TRP iontových kanálů v buněčných modelech senzorických neuronů
Loudová, Leona ; Vlachová, Viktorie (vedoucí práce) ; Boušová, Kristýna (oponent)
Primární aferentní senzorické neurony umožňují živým organismům reagovat na vnější podněty, které je ohrožují, včetně škodlivých chemických látek, teploty a tlaku. Tyto pseudo- unipolární neurony představují heterologní populaci, která v závislosti na funkčních vlastnostech, morfologii, receptorové výbavě, stupni myelinizace a rychlosti vedení určuje, s jakou intenzitou bude podnět převeden na elektrický signál, který je následně veden do centrálního nervového systému tak, aby vyvolal obrannou reakci. Těla periferních senzorických neuronů jsou lokalizována v gangliích zadních míšních kořenů (DRG) a buněčné linie odvozené z těchto neuronů jsou intenzivně využívány nejen pro studium mechanismů bolesti, ale také pro racionální vyhledávání látek s potenciálním analgetickým účinkem. Hlavním cílem této bakalářské práce je shrnutí současného výzkumu molekulárních mechanismů nocicepce za využití buněčných linií odvozených z DRG neuronů se zaměřením na specifickou skupinu teplotně citlivých transientních receptorových potenciálových (termoTRP) iontových kanálů. Cílem je vypracování rešerše dostupných studií zaměřených na buněčné a molekulární rozdíly, které vyplývají z odlišných metodických přístupů přípravy a pěstování buněčných kultur, zejména v souvislosti s výskytem charakteristických znaků typických...
|
host ::
RSS.