|
|
Přítomnost nízkomolekulárních imunomodulátorů ve slinách klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
HAUSEROVÁ, Simona
K úspěšnému dokončení krmení klíšťata využívají proteinové látky obsažené ve slinách, díky nimž jsou schopna potlačit imunitní reakci hostitele. U některých klíštat (např. Rhipicephalus sanguineus) se ovšem zjistilo, že jsou ve slinách obsaženy i nízkomolekulární látky neproteinového charakteru. Cílem práce bylo zjistit, zda tyto neproteinové molekuly jsou přítomny ve slinách našich klíštat Ixodes ricinus. V této práci se konkrétně jedná o prostaglandin E2 a adenosin. Druhým cílem bylo pomocí PKA inhibitoru zhodnotit úlohu obou nízkomolekulárních složek (nebo alespoň jedné z nich) v supresi produkce cytokinu TNF-alfa vhodnými buňkami pomocí klíštěcích slin.
|
|
|
Určení N-glykomu klíštěte \kur{Ixodes ricinus} a \kur{Dermacentor marginatus}; analýza N-glykanů v tkáních klíštěte a jejich porovnání
ŠIMONOVÁ, Zuzana
Glykosylace proteinů hraje u vyšších živočichů nezastupitelnou roli v mnoha důležitých procesech. N-glykosylace má vliv na skládání a sekreci proteinu, mezibuněčný transport, komunikaci mezi buňkami a aktivitu enzymů atd. U nižších živočichů jako jsou členovci nebyla glykosylace dosud dostatečně prostudována. Oproti vyšším živočichům, zejména savcům, se u členovců vyskytuje mnohem méně komplexních a hybridních glykanů. Například u octomilky Drosophila melanogaster tvoří komplexní glykany jen přibližně desetinu všech N-glykanů. Sialované glykany se vyskytují u členovců ještě vzácněji, octomilka je produkuje pouze v embryonálním stádiu. Co se týče klíšťat, přítomnost kyseliny sialové byla prokázána pouze elektronovou mikroskopií s lektinovým značením na povrchu slinných duktů klíštete Ixodes ricinus (Vancová et al., 2006). Tato práce je zaměřena na analýzu N-glykanů v tkáních klíšťat Ixodes ricinus a Dermacentor marginatus.
|
|
|
Analýza glykoproteinů ze slinných žláz klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
BUČINSKÁ, Lenka
Charakterizovala jsem nekolik potencionálních glykoproteinů z extraktů slinných žláz nenasátých a částečně nasátých samic klíštěte Ixodes ricinus použitím afinitního značení s lektiny a pomocí enzymatické deglykosylační reakce. Izolovala jsem glykoprotein specifický k lektinu GNA. Tento glykoprotein obsahuje N{--}vázanou terminální manózu připojenou Man{$\alpha$}1,3Man. Tento protein byl hmotnostní spektrometrii určen jako Karboxypeptidáza M. Dále byly izolovány dva glykoproteiny obsahující GalNAc pomocí HPA{--}afinitní chromatografie. Výsledkem MS analýzy bylo určení morčecího proteinu Trappin 12. V SŽ nasáté samice klíštěte jsem detekovala fukózu vazanou vazbami {$\alpha$}1,2, {$\alpha$}1,3 a {$\alpha$}1,6. Také přítomnost O{--}vázané fukózy je možná. Přítomnost kyseliny sialové v glykoproteinech SŽ a slinách nasáté samice klíště byla nepřímo prokázána vazbou s MAA II lektinem. Analýzou hmotnostní spekrometrie byla zjištěna N{--}terminální sekvence peptidu podobná s myším sialoadhesinem (Siglec 1). Dosavadní výsledky z MS zatím nepřispěly k potvrzení či vyvrácení přítomnosti Siglec 1. Z nenasátých SŽ samic jsme izolovali dva proteiny specifické pro značení GNA lektinem. Byly předběžně identifikovány jako protein podobný arylsulfatáze B a Sojo protein cytoskeletu klíštěte Ixodes. Přítomnost proteinů s GNA specifitou byla prokázána v granulech acinů SŽ nenasáté a částečně nasáté samice klíštěte. Přítomnost fukózy byla prokázána v granulárních buňkách acinů II a III a ve střevních buňkách a obsahu střeva klíštěte pomocí afinitního značení a reakce byla pozorována florescenčním mikroskopem.
|
|
| |
host ::
RSS.