|
|
Stanovení biologicky aktivních látek metodou sekvenční injekční analýzy s chemiluminiscenční detekcí
Štěpánková, Lucie ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
1.1 Souhrn Byla navržena a optimalizována jednoduchá a rychlá metoda pro stanovení norepinefrinu metodou sekvenční injekční analýzy s chemiluminescenční detekcí. Optimalizovanými parametry byly objemy a koncentrace vzorku norepinefrin bitartrátu a reagencií, průtoková rychlost, složení nosného proudu a napětí na fotonásobiči. Optimální objem vzorku byl 80 μl a optimální koncentrace činidel (a aspirované objemy) byly - 25 mM polyfosfát sodný (44 μl), 0,1 M kyselina sírová (24 μl) a 1 mM manganistan draselný (21 μl). Optimální průtoková rychlost (pro průchod detektorem) byla 91 μl/s a napětí na fotonásobiči bylo 450 V. Jako nosný proud byla použita ultračistá voda. Kalibrační křivka byla lineární v rozsahu koncentrací 1 - 40 μmol/l norepinefrin bitartrátu. Parametry kalibrační křivky y = kx + q (kde y je intenzita chemiluminiscence v nA a x je koncentrace norepinefrin bitartrátu v μmol/l) byly vypočítány metodou lineární regrese. Směrnice k byla 33.923 a absolutní člen q byl 34.839. Korelační koeficient byl 0,9997. Relativní směrodatné odchylky byly 2.78 a 1.18 % (n = 10) pro stanovení norepinefrin bitartrátu ve standardních roztocích o koncentracích 4.75 a 18.98 μmol/l. Limit detekce (LOD) byl 0.28 μmol/l a limit kvantifikace (LOQ) byl 3.34 μmol/l. Navrhovaná SIA metoda byla použita pro stanovení obsahu...
|
|
|
Stanovení septonexu ve farmaceutických přípravcích metodou kapilární zónové elektroforézy s vodivostní detekcí
Šindelková, Martina ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Pospíšilová, Marie (oponent)
STANOVENÍ SEPTONEXU VE FARMACEUTICKÝCH PŘÍPRAVCÍCH METODOU KAPILÁRNÍ ZÓNOVÉ ELEKTROFORÉZY S VODIVOSTNÍ DETEKCÍ Byla vyvinuta nová metoda kapilární zónové elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí pro stanovení septonexu ve farmaceutických přípravcích. Optimální podmínky pro separaci a stanovení septonexu byly následující: základní elektrolyt 30mM MES upravený 20mM TRISem na pH = 7,0, který obsahuje (2-hydroxypropyl)-β-cyklodextrin o koncentraci 12,5mg/ml, 25kV, 25řC, nástřik 15 sekund při tlaku 50mbar. Jako vnitřní standard byl použit N,N-dimethylethanolamin (200µg/ml). Pík septonexu byl dostatečně separován od píku vnitřního standardu i od EOF. Analýza byla provedena v křemenné kapiláře (vnitřní průměr 50µm, celková délka 75cm a délka k detektoru 45cm). Analýza trvala méně než 4 minuty, s promýváním kapiláry méně než 16 minut. Kalibrační závislost byla pro septonex lineární 75µg/ml - 300µg/ml, korelační koeficient r = 0,9976. LOD byl 9μg/ml a LOQ byl 30μg/ml. Při stanovení septonexu v reálném farmaceutickém přípravku byla pozorována špatná opakovatelnost ploch analytu, způsobená patrně nedokonalým potlačením adsorpce septonexu na vnitřní stěnu křemenné kapiláry. Tento problém bude moci být pravděpodobně vyřešen přídavkem organických rozpouštědel do elektrolytu nebo použitím modifikovaných...
|
|
| |
|
|
Využití micelární elektrokinetické chromatografie pro stanovení nečistot v léčivech.
Vančura, Luboš ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
Využití micelární elektrokinetické chromatografie pro stanovení nečistot v léčivech Byla vypracována a validována metoda micelární elektrokinetické chromatografie (MEKC) pro separaci a selektivní stanovení klotrimazolu a jeho degradačního produktu (2- chlorophenyl)diphenylmethanolu ve farmaceutických přípravcích. Analýzy probíhaly v křemenné kapiláře (vnitřní průměr 75 µm, celková délka kapiláry 60 cm a efektivní délka 50 cm), s využitím UV detekce při 210 nm, separačního napětí 30 kV, hydrodynamic kého dávkování při 34.5 mbar po dobu 7 s a teploty 25 o C. Optimální základní elektrolyt (BGE) obsahoval 15 mM dihydrogenfosforečnanu draselného, 20 mM dodecylsíranu sodného, 30 mM cholátu sodného a 10 mM β-cyclodextrinu (pH = 8.2); diklofenak sodný byl použit jako vnitřní standard. Separace trvala méně než 12 min.
|
|
|
Obsah kovů v léčivých rostlinách - empirický a chemometrický přístup
Komínková, Michaela ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
Obsah kovů v léčivých rostlinách - empirický a chemometrický přístup Abstrakt Bylo provedeno stanovení obsahu kovů Cr (0,01 - 13,9 ppm), Zn (25 - 96 ppm), Fe (84 - 2240 ppm), Mn (20 - 91 ppm), Ni (0,2 -5,4 ppm), Cu (1,5 -10 ppm) a Mg (0,3 - 1,3%) v sušených rostlinných drogách folium Melissae, flos Matricariae, herba Urticae, folium Menthae piperitae, fructus Foeniculi amari, flos Tilie, herba Hyperici a herba Filipendulae ulmariae, pocházejících z České republiky, Polska a Francie. Vzorky drog byly rozloženy mikrovlnnou mineralizací a příslušné kovové ionty stanoveny atomovou absorpční spektrofotometrií. Výsledky byly podrobeny statistické analýze za účelem vytipování kovů, které by mohly sloužit jako indikátory země původu drogy.
|
|
|
Chemiluminiscenční stanovení thioridazinu, promethazinu a levomepromazinu metodou průtokové injekční analýzy
Kolouchová, Gabriela ; Dolejšová, Jana (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
1. SOUHRN V literatuře jsem vyhledala články týkající se různých způsobů stanovení fenothiazinových derivátů ( thioridazinu, promethazinu a levomepromazinu ) a práce zabývající se využitím FIA metody s chemiluminiscenční a fluorimetrickou detekcí ve farmaceutické analýze. Otestovala jsem systém FIA řízený počítačem a nastavila jsem vhodné parametry přístroje ( doba dávkování, rychlost čerpání roztoků do systému, časové parametry ), které jsem zachovávala po celou dobu měření konstantní. Určila jsem optimální složení nosného proudu a otestovala vliv některých látek na intenzitu chemiluminiscence. Největší vliv na intenzitu chemiluminiscence byl prokázán u polyfosfátu sodného. Ten jsem použila při proměřování kalibrační závislosti. Za optimalizovaných podmínek jsem proměřila kalibrační křivky thioridazinu, promethazinu a levomepromazinu bez a s přídavkem PFS o desetkrát nižší koncentraci thioridazinu, promethazinu a levomepromazinu. Tu jsem poté použila k odečtení koncentrací léčiv ve farmaceutických přípravcích. Zjištění obsahu levomepromazinu v přípravku Tisercin® inj. jsem nemohla FIA metodou uskutečnit. Intenzitu chemiluminiscence zvyšuje obsažená antioxidační přísada acidum ascorbicum. Podniková norma nebyla k dispozici. Obsah thioridazinu v přípravku Thioridazin ® 25 mg, tbl. obd. a obsah promethazinu v...
|
|
|
Vývoj elektrochemického glutamátového biosenzoru
Doležalová, Julie ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
VÝVOJ ELEKTROCHEMICKÉHO GLUTAMÁTOVÉHO BIOSENZORU Julie Doležalová (Katedra analytické chemie, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova v Praze) Ve spolupráci s: Sofia A.L.P. Gomes, Alberto N. Araújo (Departamento de Química-Física, Faculdade de Farmácia, Universidade do Porto) Kyselina L-glutamová a L-glutamát sodný monohydrát se používají v potravinářském průmyslu jako přídatná látka pro zvýšení intenzity chuti pokrmů 1. Glutamát je přítomen v živých organismech a hraje klíčovou roli v mnoha metabolických procesech. Přesto se jeho užití v potravinách nyní sleduje s určitou obezřetností poté, co byl prokázán výskyt některých nežádoucích účinků, jako ztuhlost, napětí, bušení srdce ad., po jeho konzumaci. Některé studie upozorňovaly i na možnou souvislost s Parkinsonovou a Alzheimerovou nemocí. Jednoduchý způsob stanovení kyseliny L-glutamové a její sodné soli se proto v budoucnu může stát velmi potřebným. Tato práce představuje vývoj biosenzoru pro stanovení L-glutamátu za použití enzymu - L-glutamát dehydrogenázy. Tento redoxní enzym vyžaduje pro svou činnost přítomnost nikotinamidového koenzymu (NAD(P)+ /NAD(P)H), jehož redukovaná forma byla regenerována elektrochemicky s pomocí ve vodě rozpustného barviva - methylenové zeleně. Tenký film polymeru methylenové zeleně na povrchu...
|
|
|
Analýza ketoprofenu, methylparabenu a propylparabenu pomocí micelární elektrokinetické chromatografie
Balcar, Josef ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
1. ABSTRAKT ANALÝZA KETOPROFENU, METHYLPARABENU A PROPYLPARABENU POMOCÍ MICELÁRNÍ ELEKTROKINETICKÉ CHROMATOGRAFIE Josef Balcar Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra analytické chemie, Heyrovského 1203, Hradec Králové Cílem mé diplomové práce bylo vypracovat metodu pro separaci a stanovení ketoprofenu, methylparabenu a propylparabenu pomocí micelární elektrokinetické kapilární chromatografie a její aplikace na konkrétní léčivý přípravek. Separace probíhala v nepotažené křemenné kapiláře (50 cm × 75 μm i.d.) při 30 kV s UV detekcí při 200 nm. Základním elektrolytem byl 50 mM tricin (pH* 8,3), který obsahoval 30 mM dodecylsíran sodný jako surfaktant a 15 % (V/V) methanolu. Kalibrační závislost byla měřena v rozmezí koncentrací 10,0 - 200 mg/100ml pro ketoprofen, 0,2 - 4,0 mg/100ml pro methylparaben a 0,1 - 2,0 mg/100ml pro propylparaben. Celkový čas analýzy byl přibližně 13 min.
|
|
|
Sekvenční injekční chromatografie
Chocholouš, Petr ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent) ; Blešová, Marie (oponent)
Předložená práce přináší rozšíření aplikací sekvenční injekční analýzy v oblasti farmaceutické analýzy. Zabývá se možnostmi chromatografie pro úpravu vzorku před vlastním stanovením analytu. Soustředí se na zapojení monolitických kolon v systému SIA umožňujících provádět simultánní stanovení několika látek a analyzovat tak vzorky s matricí nebo jednoduchých směsí (farmaceutické přípravky). Nově vytvořená metoda je nazývána sekvenční injekční chromatografie (SIC) a představuje další generaci průtokových metod. Zapojením krátké monolitické kolony vyznačující se nízkým zpětným tlakem do SIC systému vyústilo v zavedení separačního prvku do dosud neseparační průtokové metody. Komerčně vyráběné monolitické kolony s reverzní fází se jeví jako vhodné pro stanovení léčiv ve směsných léčivých přípravcích. SIC umožňuje velmi rychlé stanovení směsných vzorků bez nebo jen s minimální předchozí off-line úpravou. Analýza vzorků s komplikovanější matricí (krémy, masti) byla provedena po provedení extrakce rozpouštědlem ze vzorku. Bylo také studováno využití různých délek monolitických kolon. První experimentální práce (příloha I) byla první prací na SIC systému jejíž cílem byla bezproblémová implementace monolitické kolony a následné otestování na léčivém přípravku (mast). Byly optimalizovány jednotlivé součásti...
|
|
|
Stanovení bopindololu technikou sekvenční injekční analýzy s chemiluminiscenční detekcí
Holá, Petra ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Při oxidaci léčiva bopindolol [4-(2-benzoyloxy3-tert-butylaminopropyl)-2-methylindol (I)] manganistanem v prostředí vodné H2SO4 je emitováno chemiluminiscenční (CL) záření. CL signál je zesilován hexametafosfátem. Tato CL reakce byla využita k vypracování automatizovaného stanovení I ve farmaceutických přípravcích technikou sekvenční injekční analýzy (SIA). SIA sytém ovládaný osobním počítačem se skládal z 2,5-ml pístového čerpadla Cavro XL 3000, 10-cestného selekčního ventilu Vici-Valco a průtokového fluorescenčního detektoru Spectra-Physics FS970 doplněného CL detekčním modulem, který byl zhotoven v naší laboratoři. CL signál bopindololu korigovaný slepým pokusem se zvýšil 3-krát (ve srovnání s dávkováním čistě vodného roztoku I) pokud injektovaný vzorek obsahoval 60% (v/v) methanolu. Optimální pořadí, koncentrace a objemy aspirovaných zón reaktantů byly: 80mM Na hexametafosfát ( 61l), I v 60% (v/v) methanolu (60 l), 30mM H2SO4 (40 l) a 0,5mM KMnO4 (9 l). Kalibrační křivka vyjadřující závislost intensity CL (výška píku) na koncentraci bopindololu byla lineární v rozsahu 1 - 8 M I; limit detekce (S/N = 3) byl 0,2 M I. Frekvence dávkování vzorků byla 100 h-1 . Opakovatelnost výšek píků byla charakterizována hodnotou RSD 1,8% pro 15 nástřiků 8 M I. Navržená SIA-CL metoda byla použita ke...
|
host ::
RSS.