| |
| |
| |
| |
| |
|
Functional analysis of Ssc1 and Iba57 proteins in \kur{Trypanosoma brucei}
SKALICKÝ, Tomáš
Aim of this thesis was to shed light on the function(s) of Iba57 and Ssc1 proteins in both life cycle stages of T. brucei using RNA interference. Depletion of Ssc1 resulted in severe grow phenotype, decrease in activities of iron-sulphur cluster-containing enzyme aconitase but no increase in oxidative stress sensitivity or accumulation of ROS in mitochondrion. Down regulation of Iba57, specialized maturation factor of aconitase and homoaconitase, lead to depletion of aconitase, destabilization of Isa1 and increased sensitivity to oxidative stress and accumulation of ROS in both stages.
|
|
Charakterizace dvou zástupců multigenní rodiny jednodoménových Kunitz-inhibitorů z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
SINGEROVÁ, Barbora
Dva nové geny, kódující 94AA dlouhé proteiny Monolaris 1 a Monolaris 2, byly izolovány z klíštěte Ixodes ricinus. Monolaris 1 je 8,1kDa velký protein, Monolaris 2 8,3kDa. Funkce proteinu Monolaris 1 byla testována s použitím RNA interference. Po injikaci dsRNA se daly samičky klíštěte Ixodes ricinus sát na morčata. Pro zhodnocení efektu utlumení genu byla změřena tělesná hmotnost, hmotnost vaječné snůšky a úmrtnost samic. V bakteriálním expresním systému byl připraven rekombinantní protein Monolaris 1 a po imunizaci králíka byly získány protilátky proti tomuto proteinu. Protilátky reagovaly s přibližně 190kDa velkým proteinem ve slinných žlázách, ováriích a střevě klíštěte, zatímco Monolaris 1 nebyl v slinách, slinných žlázách a dalších tkáních detekován.
|
| |
|
Functional analysis of the YCF 45 gene in procyclic \kur{Trypanosoma brucei}
TÝČ, Jiří
In this study was shown by RNA interference that YCF 45 gene of putative chloroplast origin is not essential for surviving of procyclic Trypanosoma brucei. Three different construct bearing HA-tagged YCF 45 protein that differs on their N-terminus were generated to reveal the localization of the protein in the cell. Spliced leader acceptor site of YCF 45 mRNA was identified and in comparison to annotated data new start codon was proposed. Fylogeny tree was made to shed some light on the origin of this gene.
|
| |