|
|
Evaluation of opioid and TLR-4 receptors in the mechanism of opioid effects on heart muscle cells
Biriczová, Lilla ; Novotný, Jiří (vedoucí práce) ; Alánová, Petra (oponent)
V literatúre bolo poukázané, že aktivácia opioidných receptorov napodobňuje fenomén ischemického preconditioningu, ktorý chráni srdce pred rozvinutím infarktu.Toll-like receptor 4 (TLR-4) počas infarktu stimuluje produkciu cytokínov, ktoré spôsobia zápal a vedú k poškodeniu tkaniva srdca. Našim cieľom bolo preskúmať vplyv morfínu in vitro na viabilitu a oxidatívny stav v H9c2 bunkách (potkanie kardiomyoblasty) a rolu TLR-4 počas oxidatívneho stresu. Naše výsledky dokázali, že podávanie morfínu pred vyvolaním oxidatívneho stresu pomocou tert- butylhydroperoxidu (t-BHP), 2,2'-bipyridylu (BP) a lipopolysacharidu (LPS) pôsobí protektívne na viabilitu H9c2 buniek a výrazne zníži produkciu kyslíkových radikálov. Protektívne účinky morfínu vymizli po podaní naloxonu. Potlačenie funkce TLR-4 inhibítorom TAK-242 a pomocou RNA interferencie viedlo k miernemu zvýšeniu viability buniek a k výraznému potlačeniu produkcie kyslíkových radikálov po pôsobení t-BHP a BP. V dôsledku potlačenia funkce TLR-4, viabilita buniek bola výrazne zvýšená po aplikácie LPS. Najvýznamnejší efekt na zachovanie viability a zmiernenie oxidačného stresu mal súčasné podávanie naloxonu a potlačenie expresie TLR-4. Pomocou Western blotu sme zistili, že oxidatívny stres vyvolaný pomocou t-BHP, BP a LPS vedie k zvýšeniu expresie Bax,...
|
|
|
Beta-adrenergic receptors and their desensitization
Biriczová, Lilla ; Novotný, Jiří (vedoucí práce) ; Kolář, David (oponent)
β-Adrenergné receptory (β-AR) sú s G-proteínmi asociované receptory (GPCR), široko prítomné v živočíšnom organizme a sprostredkujú katecholamínovú dráhu, ktorá vedie k najrôznejším fyziologickým odpovediam. Do rodiny β-AR patrí β1-AR, β2-AR a β3-AR, ktoré sa líšia podľa afinity k adrenalínu a noradrenalínu. Typický model β-AR signalizácie zahrňuje väzbu ligandu, spriahnutie s G-proteínom, aktiváciu adenylylcyklázy (AC), vedúci k produkcii sekundárneho posla cAMP a následne k aktivácii proteínkinázy A (PKA), ktorá fosforyluje proteíny po smeru regulácie, čím vyvolá fyziologickú odpoveď. Nadmerné vyplavenie katecholamínov môže viesť k nežiadúcim dôsledkom, a preto sa vyvinul mechanizmus, ktorý spôsobí umlčanie β-AR napriek ďalšej stimulácie, desenzitizácia. Klasická desenzitizácia zahrňuje charakteristické kroky ako fosforylácia receptoru, pripojenie β-arrestinu a oddelenie G-proteínu od receptoru. Obnova signalizačnej schopnosti je možná resenzitizáciou β-AR, kedy dôjde k sekvestrácii a defosforylácii receptoru. Vzhľadom k tomu, že podtypy β-AR sú štruktúrne i geneticky odlišné, je nutné brať do úvahy, že aj jednotlivé kroky desenzitizačného procesu sa môžu líšiť medzi jednotlivými podtypmi β-AR. Kľúčové slová β-Adrenergný receptor, G-proteín, β-arrestin, adenylylcykláza, desenzitizácia
|
host ::
RSS.