|
|
The employment of HPLC for separation of bioconjugates of azaphthalocyanines II.
Sčensná, Anna ; Kučera, Radim (vedoucí práce) ; Lochman, Lukáš (oponent)
6 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát Anna Sčensná Školiteľ doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Názov diplomovej práce Použitie HPLC pre separáciu biokonjugátov azaftalocyanínov II Biokonjugáty azaftalocyanínov sú študované ako tzv. dark quenchers v molekulárnych sondách, v ktorých sú použité pre monitorovanie "real-time" PCR. Princíp detekcie je založený na prenose energie medzi fluorofórom a zhášačom, ktoré sú naviazané na oligonukleotidový reťazec. Fluorofór emituje žiarenie, ktoré tmavý zhášač pohltí. Účinnosť procesu zhášania žiarenia závisí na vzdialenosti medzi fluorofórom a zhášačom. Dostupné sú jednoducho značené sondy, v ktorých sa používajú dva oligonukleotidové reťazce. Jeden z nich je pripojený k fluorofóru a ten druhý k zhášaču. Druhým typom sú dvojito značené sondy, ktoré na jednom oligonuklotidovom reťazci majú naviazaný fluorofór a na opačnom konci zhášač. Nenaviazaná oligonukleotidová sonda je náhodne stočená, a teda fluorofór a zhášač sa k sebe priblížia. Žiarenie nie je emitované. Po hybridizácií s komplementárnym oligoniklotidovým reťazcom sa zhášač a fluorofór od seba oddialia. U sond typu Taq-man dochádza po hybridizácií k odštiepeniu terminálneho nukleosidu zo 5', ktorý nesie...
|
host ::
RSS.