|
|
Monitoring the antioxidant activity of newly synthesized potential acetylcholinesterase modulators
Keratová, Žaneta ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Kobrlová, Tereza (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Žaneta Keratová Vedoucí diplomové práce: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Konzultant: RNDr. Ľubica Múčková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Sledovanie antioxidačnej aktivity novo syntetizovaných potenciálnych modulátorov acetylcholinesterasy Teoretická časť diplomovej práce je zameraná na charakteristiku oxidačného stresu (OS) a antioxidačnej ochrany organizmu. V ďalšej časti sú podrobne spracované jednotlivé neurodegeneratívne ochorenia a význam OS pri ich rozvoji. V experimentálnej časti predkladanej práce bola hodnotená cytotoxicita 16 nových potenciálnych modulátorov acetylcholinesterasy pomocou neuroblastómovej bunkovej línie SH-SY5Y. Cytotoxicita látok, vyjadrená ako IC50, bola meraná pomocou kolorimetrickej metódy, ktorá využíva tetrazóliovú soľ (MTT). Táto metóda bola využitá aj k stanoveniu maximálnej tolerovateľnej koncentrácie (MTC). Hodnoty MTC boli následne overené pomocou sledovania apoptoticko-nekrotického profilu buniek vo fyziologickom prostredí (bez OS) a v prostredí OS, ktoré bolo indukované peroxidom vodíka (H2O2) pomocou mikrokapilárnej prietokovej cytometrie. Z výsledkov bolo patrné, že látky nevyvolali žiadnu štatisticky významnú zmenu distribúcie buniek v jednotlivých populáciách....
|
|
|
Study of migration of cells affected by sulfur mustard
Mojská, Mária ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Mária Mojská Školiteľ: RNDr. Miloslav Macháček, PhD. Konzultant: Mgr. Petr Jošt, PhD. Názov diplomovej práce: Štúdium migrácie buniek ovplyvnených sírnym yperitom Sírny yperit je vysoko toxická chemická látka. Z pohľadu toxikológie ju radíme medzi pľuzgierotvorné chemické látky a jej použitie je zakázané medzinárodným "Dohovorom o zákaze vývoja, výroby, hromadenia a použitia chemických zbraní a o ich zničení". Aj napriek tomu bola však táto látka v minulosti zneužitá v niekoľkých ozbrojených konfliktoch a teroristických útokoch. Pri kontakte s ľudskou kožou dochádza k tvorbe typických pľuzgierov naplnených nažltlým exsudátom. Sírny yperit má cytotoxické a cytostatické účinky na živé tkanivo, a preto je liečba takýchto lézií mimoriadne obťažná. Táto práca sa zaoberá hodnotením hypotézy, či môžu rastové faktory IGF, KGF a EGF prispieť k rýchlejšej regenerácii tkaniva zasiahnutým yperitom. Metódou "scratch wound healing assay" bol hodnotený vplyv uvedených rastových faktorov na kolektívnu migráciu buniek keratinocytov HaCaT a kožných fibroblastov HDFa v podmienkach in vitro. Naše výsledky ukazujú, že toxické účinky sírneho yperitu natoľko inhibujú migráciu buniek, že sa pozitívny vplyv testovaných rastových...
|
|
|
Peripherally substituted subphthalocyanines for photodynamic therapy with benzocrown or tyrosine methyl ester as axial ligands
Hlbočanová, Ingrid ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Ingrid Hlbočanová Školiteľ: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Názov diplomovej práce: Periférne substituované subftalocyaníny pre fotodynamickú terapiu s axiálne viazaným benzocrownom alebo metylesterom tyrozínu Nádorové ochorenia sa pomaly, ale s istotou stávajú najrozšírenejším ochorením na svete. Malígne stavy postihujú široké spektrum ľudí, ktorí predispozíciu k ochoreniu zdedili geneticky, prípadne boli alebo sú ovplyvnení faktormi vonkajšieho prostredia. Nákladná terapia však predstavuje problém nielen vo vyspelých krajinách, ale hlavne v krajinách tretieho sveta. Financie a dostupnosť predstavujú len časť z problému. Základom je hlavne včasná diagnostika, prevencia pred vznikom tohto typu ochorenia a efektívna terapia. Vzhľadom na vysokú rozšírenosť a úmrtnosť spojenú s malígnymi ochoreniami, ktoré každoročne stúpajú, sa venuje veľké úsilie predchádzaniu týchto ochorení a správnou a včasnou diagnostikou spojenou so zdravým životným štýlom. Veľká pozornosť sa venuje taktiež aj výskumu a vývoju nových a účinných protinádorových liečiv a terapeutických postupov. Jednou z takýchto moderných a sľubných metód je fotodynamická terapia (PDT). Jedná sa o selektívnu, minimálne invazívnu klinicky schválenú...
|
|
|
Nové inhibitory topoisomerasy II - studie antiproliferačních účinků a vlivu na protinádorovou aktivitu etoposidu
Proftová, Lenka ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Lenka Ohnemichlová Školitel: prof. PharmDr. Tomáš Šimůnek, Ph.D. Název diplomové práce: Nové inhibitory topoisomerasy II - studie antiproliferačních účinků a vlivu na protinádorovou aktivitu etoposidu Rakovina je závažným celospolečenským problémem, který se může týkat každého z nás, její výskyt se navíc výrazně zvyšuje s věkem. Antracyklinová antibiotika (ANT) představují mimořádně účinné léky, pomocí nichž se léčila a stále léčí celá řada rakovinných onemocnění. Mají multimodální mechanismus účinku, přičemž jedním z mechanismů je inhibice topoisomerasy 2 (TOP2), základního buněčného enzymu modulujícího topologii DNA. V současné době je užití ANT limitováno kvůli obavám plynoucím z výskytu kardiotoxicity. Etoposid (ETO) je protinádorová látka působící jako topoisomerasový jed. Často je využíván v léčbě v kombinaci společně s ANT, není však na rozdíl od antracyklinů považovaný za významně kardiotoxický. Proti kardiotoxicitě ANT působí dexrazoxan (DEX), také známý jako ICRF-187, jako jediné dosud schválené kardioprotektivum. Nepůsobí však jako chelátor iontů železa, nýbrž prostřednictvím ovlivnění TOP2. Ačkoliv se DEX potvrdil jako velmi účinná kardioprotektivní látka, má i své nevýhody, především bývá...
|
|
|
Porovnání vlivu bisfenolů na parentní a diferencované H9c2 buňky
Macáková, Barbora ; Jirkovský, Eduard (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Barbora Macáková Školiteľ: PharmDr. Eduard Jirkovský, Ph.D. Názov diplomovej práce: Porovnanie vplyvu bisfenolov na parentné a diferencované H9c2 bunky Bisfenoly je skupina látok vyskytujúca sa vo veľkej miere v produktoch a v životnom prostredí. Ich možná toxicita na ľudské zdravie je stále v procese študovania,pričom priamy účinok enviromentálne relevantných dávok nebol pozorovaný. Tieto endokrinné disruptory pôsobia na rôzne receptory v tele a taktiež nie je vylúčený vplyv na kardiovaskulárny systém. Najviac preskúmanou látkou je BPA, ktorý je postupne nahradzovaný svojimi analógmi, ktoré ale nie sú z veľkej časti tak preskúmané. V tejto práci sme sa zamerali na vplyv bisfenolov BP, M a S na diferenciáciu H9c2 buniek, ako modelu, s možnými negatívnymi účinkami na vývoj srdca a jeho regenerácii po poškodení. Bunková línia H9c2 majú nediferencovaný fenotyp ale môžu byť ľahko nasmerované k diferenciácii za určitých podmienok. Skúmaný bol vplyv bisfenolov na diferencované bunky a zmeny v expresii vybraných markerov (GATA4, Hand2, Tnnt2, Myog) diferenciácie (transkripčných faktorov). Dané protokoly boli sledované 9 dní a líšili sa prídavkom fetálneho hovädzieho séra (1 % alebo 10 %), all-trans...
|
|
|
Protinádorový a imunomodulační efekt polymerních konjugátů na bázi HPMA nesoucích gemcitabin
Klusová, Natálie ; Beránek, Martin (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Natálie Klusová Školitel: prof. PharmDr. Martin Beránek, Ph.D. Konzultant: RNDr. Milada Šírová, Ph.D. (MBÚ AV ČR, v.v.i.) Název diplomové práce: Protinádorový a imunomodulační efekt polymerních konjugátů na bázi HPMA nesoucích gemcitabin Diplomová práce se zaměřila na zkoumání protinádorového a imunomodulačního účinku polymerních konjugátů na bázi HPMA s navázaným gemcitabinem (Gem). Zkoumány byly čtyři polymerní konjugáty (P-Gem1-P-Gem4), jejichž molární hmotnost a obsah léčiva byly podobné a lišily se použitými spojkami pro vazbu Gem na nosič. Využity byly spojky: β- Alanin (P-Gem1); glycyl-fenylalanyl-leucyl-glycyl (P-Gem2); kyselina aminokapronová (P- Gem3); kyselina valerová (P-Gem4). Na základě stanovených hodnot IC50 na nádorových liniích 4T1, LL2, Panc02, MiaPaca2 a Panc1 byly vzorky rozděleny do dvou skupin: a) vzorky s rychlým uvolňováním léčiva (P-Gem1, P-Gem2); b) vzorky s pomalým uvolňováním léčiva (P-Gem3, P-Gem4). Stabilita konjugátu in vivo ovlivňuje systémovou toxicitu a protinádorovou aktivitu, což prokázal experiment na BALB/c myších s modelem myšího mammárního karcinomu (4T1), kdy byla již po jedné intravenózní aplikaci pozorována významná protinádorová aktivita vzorků P-Gem3 a...
|
|
| |
|
|
Evaluation of cytotoxicity of newly synthesized phenoxytacrine derivatives as potential therapeutics of Alzheimer's dementia
Koperová, Erika ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Múčková, Ľubica (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Erika Koperová Školiteľ: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Školiteľ-konzultant: RNDr. Tereza Kobrlová. Ph.D. Názov diplomovej práce: Hodnotenie cytotoxicity novo syntetizovaných derivátov fenoxytakrinu ako potencionálnych terapeutík Alzheimerovej choroby. Zvyšujúca sa prevalencia Alzheimerovej choroby a dostupnosť najmä symptomatickej liečby oproti kauzálnej terapii, vyžaduje vývoj nových liekov ovplyvňujúcich zložitú patogenézu tohto ochorenia. V poslednej dobe, prevládajúca snaha vytvoriť látky s multimodálnym účinkom a nižšou toxicitou oproti Takrínu, viedla k syntéze fenoxytakrínu a jeho derivátov. Tieto látky sa vďaka svojmu zameraniu na viac cieľov súčasne, javia ako vhodný kandidáti pre liečbu Alzheimerovej choroby. Predmetom tejto diplomovej práce je stanovenie cytotoxicity derivátov fenoxytakrínu a zhodnotenie jej vzťahu voči štruktúre testovaných látok. Štúdium cytotoxicity je dôležitý aspekt vývoja liečiv, ktorý určuje účinok konkrétnej chemickej látky na živé bunky. Tento typ štúdie je kľúčový pre porozumenie potenciálnej toxicity nových chemických zlúčenín a získanie informácii o ich bezpečnosti pre použitie u živočíchov alebo u ľudí . Cytotoxicita nových derivátov fenoxytakrínu je v tejto práci...
|
|
|
Somatotropní adenomy hypofýzy u pacientů s akromegalií - stanovení míry exprese proteinů s potenciálním vlivem na terapeutickou odpověď
Krbalová, Lenka ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Pejchal, Jaroslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: RNDr. Mgr. Lenka Krbalová Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Školitel specialista: MUDr. Jiří Soukup, Ph.D. Název rigorózní práce: Somatotropní adenomy hypofýzy u pacientů s akromegalií - stanovení míry exprese proteinů s potenciálním vlivem na terapeutickou odpověď Akromegalie je vzácné onemocnění, projevující se širokou paletou různých příznaků (zvětšením akrálních částí těla, makroglosií, neuropatií, hypertenzí, kardiomyopatií aj.), které jednak zkracují život, jednak ve svých důsledcích značně snižují jeho kvalitu. Je způsobena zvýšenou sekrecí růstového hormonu v dospělosti. Příčinou této zvýšené sekrece bývá nejčastěji somatotropní adenom hypofýzy. Léčba akromegalie vyžaduje ve většině případů komplexní přístup, jedná se o kombinaci chirurgického zásahu, radioterapie a farmakoterapie. Ve farmakoterapii se využívají především somatostatinová analoga (SSA). Jsou to látky, které po vazbě na somatostatinový receptor vykazují obdobné farmakodynamické účinky jako somatostatin. Jejich podání vede k poklesu sekreční aktivity tumoru a k redukci jeho objemu. Do první generace řadíme oktreotid a lanreotid (ty dnes představují nejrozšířenější medikamentózní léčbu akromegalie), do druhé pasireotid....
|
|
|
Studium originálních ftalocyaninových fotosensitizérů na buněčné úrovni
Halašková, Marie ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Pejchal, Jaroslav (oponent) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Marie Halašková Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Název disertační práce: Studium originálních ftalocyaninových fotosensitizérů na buněčné úrovni Fotodynamická terapie (PDT) je léčebná metoda, která v posledních desetiletích zaznamenala velký pokrok a používá se k léčbě řady onemocnění a poruch jako jsou například věkem podmíněná makulární degenerace, psoriáza či některé druhy nádorových onemocnění. PDT je založena na kombinaci tří základních složek: léčiva citlivého na světlo (známé jako fotosensitizér, PS), světla o vhodné vlnové délce a kyslíku. Světlem aktivovaný PS reaguje s molekulárním kyslíkem za vzniku reaktivních forem kyslíku, jež v biologickém prostředí interagují s buněčnými složkami a spouštějí kaskádu reakcí, které způsobují biochemické poškození buňky, cévního systému nádoru a indukci lokální zánětlivé reakce. Výsledkem je významné narušení homeostázy buňky vedoucí k procesu buněčné smrti. Jako všechny nově navržené způsoby léčby, i v této oblasti je stále zapotřebí další výzkum, včetně vývoje a optimalizace syntézy nových PS pro zvýšení účinnosti terapie a zároveň minimalizace vedlejších účinků. V této práci jsme se rozhodli provést rozsáhlé studium vlastností několika různých...
|
host ::
RSS.