|
|
Tail labelled oligonucleotide probes for the detection of DNA-protein interactions
Pivoňková, Hana ; Němcová, Kateřina ; Horáková Brázdilová, Petra ; Havran, Luděk ; Macíčková-Cahová, Hana ; Hocek, Michal ; Fojta, Miroslav
DNA-protein interactions can be monitored via different ways. We introduce novel, fast and simple approaches in DNA-protein interaction detection based on electrochemical measurements of DNA alone (structure-sensitive DNA sensing), or DNA modified with osmium tetroxide bearing nitrogenous ligands, or measurements of redox-active moieties enzymatically attached to the end of a DNA substrate thus forming a labeled tail (by terminal transferase).
|
|
|
Redox labelling of nucleic acids for analyzing nucleotide sequences and monitoring DNA-protein interactions
Fojta, Miroslav ; Havran, Luděk ; Horáková Brázdilová, Petra ; Pivoňková, Hana ; Kostečka, Pavel ; Macíčková-Cahová, Hana ; Raindlová, Veronika ; Vrábel, Milan ; Hocek, Michal
Nucleobase labelling of DNA for electrochemical sensing was attained through chemical modification of thymine bases with osmium tetroxide in the presence of nitrogenous ligands, or via enzymatic incorporation of nucleotide conjugates with redox-active moieties using labelled deoxynucleoside triphosphates. DNA hybridization, primer extension and PCR techniques were used for sequence-specific DNA assays. Tail-labelled DNA substrates were applied to monitor DNA binding by tumour suppressor p53 protein.
|
|
| |
|
|
Elektrochemické rozpouštěcí metody pro speciaci olova a kadmia v půdních roztocích
Šestáková, Ivana ; Jaklová Dytrtová, J. ; Jakl, M. ; Navrátil, Tomáš ; Fojta, Miroslav
Půdní roztok je vodná fáze půdy, která je v kontaktu s kořenovým systémem rostlin. V půdním roztoku jsou obsaženy živiny, organické i anorganické látky z půdy a dále tzv. exudáty – látky vylučované rostlinou (např. nízkomolekulární organické kyseliny). Pro bioakumulaci, tj. přenos z půdy do rostlin, je významný obsah volných iontů kovů a labilních komplexů v půdním roztoku, pohybující se většinou v oblasti stopových koncentrací. Proto jsou pro tato stanovení vhodné elektrochemické metody využívající nahromadění analytu na pracovní elektrodě – diferenční pulsní anodická rozpouštěcí voltametrie, anodická rozpouštěcí square-wave voltametrie a rozpouštěcí chronopotenciometrie s konstantním proudem. Uvedené metody s použitím visicí rtuťové kapkové elektrody byly testovány pro speciaci kadmia a olova v modelově připravených i reálných půdních roztocích.
|
|
|
Možnost přípravy DNA sond pro potřebu CMG
Krejčí, Jana ; Bártová, Eva
Důležitou metodou cytogenetiky je DNA fluorescenční in situ hybridizace (DNA-FISH), kdy dochází ke specifické vazbě DNA sondy na určité místo genomu. V naší laboratoři jsou DNA sondy připravovány z DNA naamplifikované pomocí bakteriálního vektoru (PAC/BAC). Nicktranslační reakcí je do DNA vkládaná reportérová molekula vizualizovatelná protilátkou konjugovanou s fluorescenční látkou. Vystíněním repetitivních sekvencí pomocí Cot-DNA je následdně zvýšena specifičnost připravené sondy.
|
|
|
Vznik života na Zemi. Fakta a (pseudo)interpretace
Paleček, Emil
V první části je uveden souhrn soudobých poznatků o vzniku života na Zemi. Dále je uvedeno několik názorů uznávaných vědců na vědu. Tyto názory jsou konfrontovány s některými interpretacemi fakt ve vědecko-populárních článcích. Přednáška upozorňuje na nebezpečí ideologizace vědy.
|
host ::
RSS.