| |
| |
| |
| |
|
Determination of pharmaceuticaly important substances using High Performance Liquid Chromatography with Mass Spectrometry detection
Barrett, Blanka
Vysoce účinná kapalinova chromatografie (HPLC) v kombinaci s hmotnostní spektromerií (MS) je nejčastěji užívanou metodou pro stanovení léků v lidské plazmě. Patří ke skupině metod, které umožňují nové a moderní modifikace. Velmi citlivé metody, které nevyžadují dlouhou přípravu vzorků jsou žádoucí pro farmakokinetické (PK) studie. Dvojitá MS (MS/MS) detekce poskytuje identifikaci účinné látky léku a zaroveň je vysoce citlivá pro kvantitativní stanovení. Efektivně eliminuje interference endogenních látek přičemž garantuje selektivitu metody. PK studie určuje farmakokinetické chrakteristiky daného léku. Ty jsou dále použity ke stanovení bioekvivalence stanovovaného léku se zvoleným lékem stejné podstaty. PK parametery jsou vypočteny z koncentrace léku v plazmě, která je stanovena validovanou metodou. Učelem této disertační práce bylo ukázat použití HPLC-MS/MS metod ve pharmakokinetických studiích. Všechny vyvinuté byly úspěšně použity ve farmakokinetických studiích k určení PK parametrů. Validovaná, vysoce citlivá a selektivní HPLC metoda s MS-MS detekcí byla vyvinuta pro kvantitativní azithromycinu (AZI) v lidské Na2EDTA plazmě. Roxithromycin (ROX) byl použit jako interní standard. Validovaná, vysoce citlivá a selektivní HPLC metoda byla publikována pro kvantitativní stanovení jednoho z nejdůležitějších...
|
|
Vývoj a využití vysokoúčinných separačních metod pro analýzu pojivových tkání
Braun, Martin
4 Anotace: Tato práce se zabývá vývojem a využitím vysokoúčinných separačních metod vhodných pro stanovení klinicky významných degradačních produktů kolagenu a elastinu představujících nejvýznamnější proteiny pojivových tkání. K jejich analýze byly použity různé chromatografické a elektroforetické metody, zahrnující vysokoúčinnou kapalinovou chromatografie (HPLC), kapilární zónovou elektroforéza (CZE) a micelární elektrokinetickou kapilární chromatografii (MEKC). Cílem této práce byla optimalizace analytických separačních postupů a metod a jejich využití ke stanovení klinicky významných markerů degradace pojiva. Hodnoceny byly také nejvýznamnější validační parametry použitých metod, což umožňuje jejich srovnání s jinými přístupy. Jedním z nejvýznamnějších přínosů této práce bylo potvrzení vysoké citlivosti, přesnosti, opakovatelnosti a robustnosti použitých metod jak bylo potvrzeno u řady typů biologických vzorků. Důležitým přínosem této práce je také úspěšná současná HPLC separace příčných vazeb kolagenu a elastinu. V práci jsou popsány metody navržené a optimalizované za účelem separace a kvantitativní analýzy nejvýznamnějších příčných vazeb kolagenu a elastinu, tj. pentosidinu, pyridinolinů a desmosinů. Tyto vysokoúčinné separační metody pro separaci a stanovení síťujících elementů pojivových tkání již...
|
|
Chirální separace biologicky významných látek pomocí vysokoúčinných separačních metod za využití makrocyklických antibiotik
Honetschlägerová, Marie
Chirální separace biologicky významných látek pomocí vysokoúčinných separačních metod za využití makrocyklických antibiotik Mgr. Marie Honetschlägerová-Vadinská Abstrakt Náplní této práce je sledování retenčního a enantioseparačního chování vybraných biologicky aktivních látek metodami vysokoúčinné kapalinové chromatografie a kapilární kapalinové chromatografie s chirálními stacionárními fázemi na bázi makrocyklických antibiotik. Retenční a enantioseparační chování vybraných profenů (nesteroidní protizánětlivá léčiva) bylo studováno na CSP s navázaných teikoplanin aglykonem (TAG) v systému kapilární kapalinové chromatografie a vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Protože nejsou chirální kapilární kolony komerčně dostupné, byly evaluovány tři laboratorně připravené kolony s navázaným TAGem, a získané výsledky testovány na opakovatelnost a reprodukovatelnost. Výsledky, získané v obou systémech (cLC a HPLC) za stejných separačních podmínek, byly mezi sebou porovnány. Dále byla sledována enantioselektivní schopnost dvou komerčně dostupných CSP, lišících se pokrytím navázaného teikoplaninu (Chirobiotic T a T2) pro tři skupiny strukturně odlišných analytů, z různých aplikačních oblastí - aminoalkoholy (β-blokátory, léčiva ovlivňující adrenergní receptory), chlorofenoxypropanové kyseliny (CPPA, herbicidy) a...
|
|
Studium enantioseparace vybraných substituovaných binaftylů
Loukotková, Lucie ; Bosáková, Zuzana (vedoucí práce) ; Feltl, Ladislav (oponent) ; Flieger, Miroslav (oponent)
8 1 ÚVOD V posledních desetiletích dvacátého století se podařilo objevit mnoho stereoselektivních reakcí, díky kterým jsme schopni synteticky připravit čisté enantiomery řady látek, majících široké využití v nejrůznějších oblastech lidského života. Tento způsob přípravy, tzv. asymetrická syntéza, umožňuje přímou syntézu enantiomerů za použití vhodných katalyzátorů, jimiž bývají opticky aktivní látky. Předpokladem úspěšného použití organických katalyzátorů v asymetrické syntéze je vedle jejich vhodného prostorového uspořádání i jejich dostatečná konformační stabilita (odolnost vůči racemizaci). Mezi významné katalyzátory asymetrických reakcí patří deriváty binaftylu, jejichž použití jako asymetrických katalyzátorů je velmi rozsáhlé. Binaftyly se vyznačují pozoruhodnými vlastnostmi chirálního rozpoznávání pramenícími z jejich chirality, prostorového uspořádání a rigidní struktury. Většina molekul 1,1'-binaftylu je C2 symetrická se dvěma identickými substitučními skupinami, které bývají často umístěny v polohách 2 a 2'. Chiralita derivátů 1,1'- binaftylu je dána stéricky bráněnou rotací atomů nebo skupin atomů kolem jednoduché vazby binaftylového skeletonu (axiální chiralita, atropisomery). S velikostí racemizační bariéry roste pravděpodobnost využití binaftylů v enantioseparacích [1]. Z významných zástupců...
|
|
Význam produkce a kvality pylu letní a podzimní pylové snůšky pro včelstvo (případová studie z okolí obce Volary - CHKO Šumava)
PETROVÁ, Jana
Cílem diplomové práce bylo určit pomocí pylové analýzy botanický původ rouskovaného pylu odebraného ze včelařského stanoviště Lískovec u města Volary v území Chráněné krajinné oblasti Šumava. Pylové rousky byly odebírány od jednoho včelstva pomocí pylochytu jednou týdně v letním a podletním období od 22. 6. do 11. 9. 2010. Pylové rousky byly následně usušeny, roztříděny podle barvy, zváženy a mikroskopovány. U pylových zrn byl zjišťován počet a typ apertur, tvar, skulptura a minimálně u 50 pylových zrn jednoho typu byla měřena velikost. V každém mikroskopickém preparátu bylo napočítáno minimálně 500 pylových zrn. Podíl rostlinných druhů ve vzorku byl vyjádřen v procentech a byl vyhodnocen jejich význam v potravě včely medonosné na sledované lokalitě. U vybraných vzorků pylových rousek z lokality Lískovec i z lokality Dobčice byl zjišťován obsah dusíkatých látek a obsah aminokyselin. Pylové rousky Polemonium coeruleum, Trifolium pratense a Trifolium repens byly vyhodnoceny jako velmi důležitý zdroj bílkovin a aminokyselin pro včelu medonosnou. Koncentrace esenciálních aminokyselin, vyjádřené v procentech z celkového obsahu aminokyselin, se významně nelišily mezi jednotlivými vzorky pylových rousek. Cílem práce bylo také porovnat zjištěné výsledky s výsledky zpracovanými v bakalářské práci podle stejné metodiky ze včelařského stanoviště u Dobčic na území severní části Blanského lesa. Součástí práce bylo také statistické vyhodnocení dominance, frekvence, Shanon-Wienerův index diverzity a variability mezi vzorky a odběry. Práce je doplněna fotografiemi pylových zrn včelařsky významných rostlinných druhů.
|
|
Kryokonzervace révy vinné: certifikovaná metodika
Faltus, Miloš ; Kotková, Renata ; Bilavčík, Alois ; Zámečník, Jiří
Uchování genetických zdrojů révy vinné v polních podmínkách je ohrožováno řadou biotických a abiotických stresorů, které přinášení riziko ztráty cenných položek. Kryokonzervace je metodou, která tato rizika eliminuje a umožňuje bezpečné dlouhodobé uchování genetických zdrojů révy vinné. Metoda kryokonzervace je založena na uchování rostlinného materiálu při teplotě tekutého dusíku v životaschopném stavu, kdy jsou všechny procesy ve skladovaném materiálu prakticky zastaveny. Tato metodika popisuje postup přípravy explantátů před kryokonzervací, dehydrataci vzrostných vrcholů, způsob a zásady pro zamražení vzorků i regeneraci kontrolních rostlin, včetně hodnocení životnosti a regenerace explantátů. Uživatelem metodiky je MZe, které ji uplatní v rámci „Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin, zvířat a mikroorganismů významných pro výživu a zemědělství“.
Plný text: PDF
|