|
|
Možnosti využití přírodních antibiotik a rostlinných přípravků v léčbě SIBO
Svitavská, Jana ; Vaníčková, Zdislava (vedoucí práce) ; Šťovíček, Jan (oponent)
Tato bakalářská práce se zabývá syndromem bakteriálního přerůstání (SIBO), gastrointestinální poruchou způsobenou zvýšeným počtem bakterií a abnormálním složením mikrobiomu v tenkém střevě. SIBO se často projevuje skrz nespecifické dyspeptické příznaky zahrnující plynatost, nadýmání, bolesti břicha, průjmy až malabsorpci a malnutrici. K diagnostice SIBO se nejčastěji využívá neinvazivní dechový test. Léčba SIBO by měla obsahovat terapii základního onemocnění, eradikaci bakterií a nutriční podporu. Hlavní cíl bakalářské práce je sledovat účinnost rostlinných přípravků a přírodních antibiotik v léčbě SIBO a poukázat na možnosti využití těchto antibakteriálních látek jako samostatné či doplňkové terapie ke konvenční léčbě. Dalším cílem je potvrdit hypotézu, že nelze na základě gastrointestinálních příznaků předvídat diagnózu SIBO a není proto vhodné toto onemocnění léčit empiricky bez potvrzení laboratorním vyšetřením. Sběr dat probíhal v Gastroenterologické laboratoři Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky 1.LF UK a VFN. Pomocí dotazníkového šetření byl zkoumán výskyt gastrointestinálních symptomů a dalších přidružených onemocnění či predisponujících faktorů. V případě pozitivního výsledku dechového testu byla zaslána pacientovi druhá část dotazníku, zaměřená na průběh a úspěšnost dané...
|
|
|
Charakterizace transgenních forem dipeptidylpeptidasy IV exprimovaných v astrocytární buněčné linii U373MG
Vomelová, Ivana ; Bezouška, Karel (vedoucí práce) ; Vaníčková, Zdislava (oponent)
Dipeptidylpeptidasa-IV (DPP-IV) je serinová proteasa, jejíž enzymová aktivita spočívá v odštěpování dipeptidů X-Pro z N-terminálního konce jejích substrátů. Řadu biologických funkcí je molekula DPP-IV schopna vykonávat neenzymově. Předchozí práce naší laboratoře prokázaly zvýšenou expresi DPP-IV ve vysokostupňových astrocytomech. Pro detailní studium enzymových a neenzymových funkcí DPP-IV v experimentálním modelu byly připraveny klony astrocytární buněčné linie U373MG transfekované enzymově neaktivní, mutovanou DPP-IV (mutDPP-IV) a enzymově aktivní DPP-IV přirozeného typu (wtDPP-IV). Enzymově neaktivní mutDPP-IV byla připravena bodovou mutací aminokyseliny serin, která je součástí aktivního centra. Buňky U373MG byly transfekovány doxycyklinem regulovatelným expresním systémem Tet-On® . K další analýze transgenních forem DPP-IV byly použity metodiky k ověření exprese na úrovni proteinu, enzymové aktivity a subcelulární lokalizace. U vyselektovaných doxycyklinem indukovaných buněk U373MG mutDPP-IV a U373MG wtDPP-IV, exprimujících mutovanou resp. přirozenou formu DPP-IV, narůstala exprese transgenních forem DPP-IV se zvyšující se koncentrací doxycyklinu a s prodlužujícím se časem indukce. U doxycyklinem indukovaných buněk U373MG exprimujících wtDPP-IV byl nárůst exprese provázán s nárůstem enzymové...
|
|
| |
|
|
Využití biočipové analýzy DNA k detekci mutací souvisejících s kolorektálním karcinomem
Adámek, Petr ; Vaníčková, Zdislava (vedoucí práce) ; Kovářová, Jaroslava (oponent)
Kolorektální karcinom je jedním z nejčastějších nádorových onemocnění vůbec. Pokud se toto závažné onemocnění diagnostikuje včas, je šance na minimálně pětileté přežití velmi vysoká. Běžné metody screeningu a diagnostiky jsou sice poměrně jednoduché i relativně úspěšné, ale přesto nejsou dokonalé - pro samotnou diagnostiku je dosud nutné invazivní vyšetření. Je všeobecná snaha postupy screeningu a diagnostiky pro pacienty ulehčovat a zároveň zpřesňovat. Zde je velká naděje na využití metod molekulární genetiky a biologie včetně biočipových metod. V rámci této diplomové práce byla vyzkoušena možnost optimalizace biočipové metody, původně výrobcem vyvinuté pro zpracování DNA získané ze stolice, pro vzorky genomové DNA z bílých krvinek s cílem zachytit přítomnost případných mutací ve čtyřech cílových genech (K-ras, BRAF, TP53 a APC) s důležitým vztahem k nádoru. Vyhodnocení všech vzorků proběhlo na biočipovém analyzátoru evidence investigatorTM. V diplomové práci jsou shrnuty teoretické poznatky z biologické, klinické i technické stránky věci. Je popsána tato biočipová metoda s ukázkou konkrétního postupu, s uvedením výsledků a s jejich zpracováním i s připojeným komentářem. V souhrnu lze konstatovat, že použitá metoda je relativně náročná na nutný čas práce v laboratoři (pro stanovení ze stolice 3 dny, v...
|
|
|
Charakterizace transgenních forem dipeptidylpeptidasy IV exprimovaných v astrocytární buněčné linii U373MG
Vomelová, Ivana ; Vaníčková, Zdislava (oponent) ; Bezouška, Karel (vedoucí práce)
Dipeptidylpeptidasa-IV (DPP-IV) je serinová proteasa, jejíž enzymová aktivita spočívá v odštěpování dipeptidů X-Pro z N-terminálního konce jejích substrátů. Řadu biologických funkcí je molekula DPP-IV schopna vykonávat neenzymově. Předchozí práce naší laboratoře prokázaly zvýšenou expresi DPP-IV ve vysokostupňových astrocytomech. Pro detailní studium enzymových a neenzymových funkcí DPP-IV v experimentálním modelu byly připraveny klony astrocytární buněčné linie U373MG transfekované enzymově neaktivní, mutovanou DPP-IV (mutDPP-IV) a enzymově aktivní DPP-IV přirozeného typu (wtDPP-IV). Enzymově neaktivní mutDPP-IV byla připravena bodovou mutací aminokyseliny serin, která je součástí aktivního centra. Buňky U373MG byly transfekovány doxycyklinem regulovatelným expresním systémem Tet-On® . K další analýze transgenních forem DPP-IV byly použity metodiky k ověření exprese na úrovni proteinu, enzymové aktivity a subcelulární lokalizace. U vyselektovaných doxycyklinem indukovaných buněk U373MG mutDPP-IV a U373MG wtDPP-IV, exprimujících mutovanou resp. přirozenou formu DPP-IV, narůstala exprese transgenních forem DPP-IV se zvyšující se koncentrací doxycyklinu a s prodlužujícím se časem indukce. U doxycyklinem indukovaných buněk U373MG exprimujících wtDPP-IV byl nárůst exprese provázán s nárůstem enzymové...
|
|
|
Model experimentálně regulovatelné exprese dipeptidylpeptidasy IV v gliomových buněčných liniích
Němečková, Jana ; Šedo, Aleksi (vedoucí práce) ; Vaníčková, Zdislava (oponent)
"Dipeptidylpeptidase IV aktivitou a/nebo strukturou homologní" (DASH) molekuly predstavují nove definovanou skupinu multifunkcních molekul, z nichž vetšina nese hydrolytickou aktivitu podobnou dipeptidylpeptidase IV (DPPIV, EC 3.4.14.5, identická s diferenciacním antigenem lymfocytu CD26), která odštepuje X-Pro dipeptidy od N-konce peptidu a bílkovin. Dosavadní poznatky svedcí o významu techto molekul v procesech vzniku a rozvoje rady nádorových onemocnení. Cílem práce je (i) prehled problematiky DASH molekul a jejich funkcních substrátu v nádorech odvozených z neuroektodermu a (ii) príprava stabilne transfekovaných lidských glioblastomových bunecných linií s indukovatelnou expresí DPPIV. Pro tuto práci byly pripraveny originální vektory s lidským genem DPPIV a s její v aktivním centru mutovanou formou pro posouzení významu vlastní enzymové aktivity výsledného produktu. Transgenní bunecné linie umožní studovat biologické úlohy DPPIV v procesech vzniku a rozvoje nádoru odvozených z neuroektodermu - v bunecném rustu, invazi a migraci na úrovni vlastní transformované bunky v modelu in vitro a v komplexním systému in vivo po homotopní implantaci do imunodeficientní myši. Vzniklé bunecné linie budou tedy použity jako nástroj studia jak "autokrinního" významu DPPIV pro vlastní exprimující transformované bunky,...
|
host ::
RSS.