|
|
Využití chemogenetických nástrojů ve výzkumu onemocnění mozku
Neřoldová, Markéta ; Stuchlík, Aleš (vedoucí práce) ; Tabáková, Petra (oponent)
Chemogenetika je označení pro nově vytvořené nástroje pro manipulaci aktivity buněk. Skládají se z receptoru, který je mutovaný tak, aby neodpovídal na endogenní ligandy, a ze syntetického ligandu, který naopak neinteraguje s endogenními receptory. V průběhu posledních několika dekád bylo vytvořeno mnoho různých typů receptorů a k nim korespondujících ligandů jak pro inhibici, tak pro excitaci subpopulací nervových buněk. Přesto jsou to hlavně receptory spřažené s G-proteiny odpovídající na CNO, konkrétně DREADDs, které se používají ve výzkumu. Chemogenetika má velký potenciál, jelikož aktivita oněch receptorů je reverzibilní, spustitelná pouze příslušným ligandem, a neinvazivní. Také díky použití virových vektorů je možné selektivně ovládat určitou skupinu či typ nervových buněk. Navíc, efekt těchto receptorů na neurony je dlouhodobější, dokonce se dá docílit i chronické aktivace či inhibice, což může být užitečné zvláště u behaviorálních testů. Výhoda chemogenetických nástrojů je zejména patrná v případě výzkumu onemocnění mozku, jelikož dokážou ovlivňovat celé neuronální okruhy či propojení mezi různými oblastmi mozku. Mnohá psychiatrická a jiná onemocnění mozku se vyznačují právě dysfunkcemi v neuronálních okruzích, takže je chemogenetika silným nástrojem pro výzkum zásadních mechanismů...
|
|
|
Úloha m6A dráhy v regulaci ontogenetického vývoje mozku potkana
Tabáková, Petra ; Telenský, Petr (vedoucí práce) ; Holzerová, Kristýna (oponent)
N6-metyladenosin (m6A) je nejběžnější post-transkripční modifikace RNA, která významně ovlivňuje osud mRNA transkriptů. Mezi významnými proteiny regulující tuto takzvanou m6A dráhu patří metyltransferázy (enzymy z rodiny METTL), demetylázy (FTO, enzymy z rodiny ALKBH) a proteiny vázající se na m6A (např. rodina YTHDF), které rozpoznávají sekvence RNA v závislosti na množství a lokalizaci m6A v cílových transkriptech. Jejich navázání ovlivňuje osud mRNA transkriptů, zatímco úkolem metyltransferáz a demetyláz je zajistit dynamickou rovnováhu hladiny mRNA a patrně i dosud neobjasněné mechanismy specificity těchto tzv. epitranskriptomických značek. Hlavním cílem této práce bylo stanovit relativní změny exprese proteinů uplatňujících se v m6A regulační dráze mozku potkana v průběhu raného postnatálního vývoje a v dospělosti. Zjistili jsme, že hladina exprese hlavních proteinů m6A dráhy postupně klesá od narození do dospělosti s výjimkou období přechodného zvýšení mezi 10. až 18. postnatálním dnem. Současně jsme pozorovali významné změny v expresi proteinů dýchacího řetězce mezi těmito postnatálními dny. Je však zapotřebí dalšího výzkumu, aby bylo možné prokázat mechanistické spojení mezi m6A dráhou a regulací energetické homeostázy mozku během raného vývoje. Poznání úlohy m6A dráhy v regulaci...
|
host ::
RSS.