|
|
Amaryllidaceae alkaloidy haemanthaminového strukturního typu a jejich polosyntetické deriváty jako potenciální léčiva v terapii Alzheimerovy choroby.
Peřinová, Rozálie ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Lapčík, Oldřich (oponent) ; Mučaji, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Ing. Rozálie Peřinová Školitel: prof. Ing. Lucie Cahlíková, Ph.D. Název práce: Amaryllidaceae alkaloidy haemanthaminového strukturního typu a jejich polosyntetické deriváty jako potenciální léčiva v terapii Alzheimerovy choroby. K prohloubení znalostí o amarylkovitém alkaloidu haemanthaminu, který byl izolován na našem pracovišti v rámci předchozích fytochemických studií, byly syntetizovány deriváty tohoto alkaloidu. Nejprve byla připravena série alifatických (3-12) a aromatických esterových derivátů (13-66), a následně pro porovnání vztahu struktura-aktivita, byly od nejaktivnějších substituentů připraveny etherové deriváty (67-80). Všechny syntetizované sloučeniny byly identifikovány za využití následujících metod strukturní analýzy: NMR, HPLC/MS a HRMS, včetně testování fyzikálních vlastností, jako je optická otáčivost. Po potvrzení struktury byly všechny deriváty podrobeny screeningovým studiím na jejich inhibiční potenciál vůči hAChE a hBChE. Vybrané deriváty byly testovány na jejich inhibiční potenciál i vůči dalšímu enzymu GSK-3β, který hraje významnou roli v patogenezi AD. V rámci spolupráce s Lékařskou fakultou v Hradci Králové, Univerzity Karlovy, byla...
|
|
|
Nové analogy růstového faktoru podobného insulinu (IGF-1) pro studium receptorů a terapeutické aplikace
Lin, Jingjing ; Jiráček, Jiří (vedoucí práce) ; Hodek, Petr (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Systém insulin/IGF je evolučně konzervovaný systém, který zahrnuje tři blízce příbuzné peptidové hormony (insulin, IGF-1 a IGF-2), tři homologní tyrozin-kinázové receptory (IR-A, IR- B a IGF-1R), odlišný receptor IGF-2R a šest proteinů vážících IGF. Zatímco insulin signalizuje hlavně prostřednictvím IR a hraje klíčovou roli v homeostázi glukózy, IGF signalizují hlavně prostřednictvím IGF-1R a zprostředkovávají normální lidský růst. Pro správné fungování organismu je klíčová přísná kontrola exprese ligandů i receptorů. Aberantní signalizace prostřednictvím těchto receptorů se projevuje u mnoha patologických stavů, včetně rakoviny, poruch růstu, neurodegenerativních onemocnění a diabetu. Osa insulin/IGF proto představuje slibný terapeutický cíl. Vzhledem k četným neúspěšným klinickým protinádorovým studiím prováděným buď s inhibitory tyrosin-kináz, nebo s protilátkami namířenými proti IGF-1R, by byl zajímavý vývoj nových receptorově specifických analogů insulinu a IGF s minimalizovanými vedlejšími účinky. Naše studie začala rekombinantní přípravou dimerů IGF-1, v nichž jsou monomery IGF-1 propojeny mezi svými C- a N-konci Ser-Gly linkery (délka 8, 15 nebo 25 zbytků). Cílem bylo zjistit, zda vazba dvou kovalentně spojených molekul IGF-1 na receptor může tento receptor inhibovat nebo aktivovat. Dále...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita.
Vrabec, Rudolf ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Kokoška, Ladislav (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Rudolf Vrabec Školitel: prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Název disertační práce: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita Klíčová slova: Vinca, indolové alkaloidy, Alzheimerova choroba, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, cytotoxicita, dockingová studie Z nati Vinca minor L. (Apocynaceae) bylo chromatografickými metodami vyizolováno 23 monoterpenových indolových alkaloidů různých strukturních typů, které byly identifikovány pomocí kombinace analytických technik (NMR, MS, HRMS, optická otáčivost). Mezi izolovanými látkami se nacházela i dosud nepopsaná alkaloidní struktura, která byla pojmenovaná vinkaminorudein. Celkem 11 alkaloidů bylo v tomto rostlinném druhu identifikováno poprvé. Látky, které byly získány v dostatečném množství, byly podrobeny testům vůči inhibici hAChE, hBuChE, POP, a GSK-3β - enzymům hrající klíčovou roli v patogenezi Alzheimerovy choroby. Z testovaných alkaloidů byl nejaktivnější (−)-2-ethyl-3[2-(3- ethylpiperidinyl)-ethyl]-1H-indol (VR-19) s IC50 = 0,65 µM pro hBuChE, a IC50 = 58 µM pro POP. Z dalších alkaloidů významnou inhibici vůči hBuChE (IC50 30 µM) vykazovaly vinkaminorein, minovin, 16-methoxyminovin, vinkorin a tubotaiwin. Žádný z alkaloidů...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita.
Vrabec, Rudolf ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Kokoška, Ladislav (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Rudolf Vrabec Školitel: prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Název disertační práce: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita Klíčová slova: Vinca, indolové alkaloidy, Alzheimerova choroba, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, cytotoxicita, dockingová studie Z nati Vinca minor L. (Apocynaceae) bylo chromatografickými metodami vyizolováno 23 monoterpenových indolových alkaloidů různých strukturních typů, které byly identifikovány pomocí kombinace analytických technik (NMR, MS, HRMS, optická otáčivost). Mezi izolovanými látkami se nacházela i dosud nepopsaná alkaloidní struktura, která byla pojmenovaná vinkaminorudein. Celkem 11 alkaloidů bylo v tomto rostlinném druhu identifikováno poprvé. Látky, které byly získány v dostatečném množství, byly podrobeny testům vůči inhibici hAChE, hBuChE, POP, a GSK-3β - enzymům hrající klíčovou roli v patogenezi Alzheimerovy choroby. Z testovaných alkaloidů byl nejaktivnější (−)-2-ethyl-3[2-(3- ethylpiperidinyl)-ethyl]-1H-indol (VR-19) s IC50 = 0,65 µM pro hBuChE, a IC50 = 58 µM pro POP. Z dalších alkaloidů významnou inhibici vůči hBuChE (IC50 30 µM) vykazovaly vinkaminorein, minovin, 16-methoxyminovin, vinkorin a tubotaiwin. Žádný z alkaloidů...
|
|
|
Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae jako potenciální léčiva v terapii civilizačních onemocnění
Breiterová, Kateřina ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Nagy, Milan (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Kateřina Breiterová Školitel: doc. Ing. Lucie Cahlíková PhD. Název disertační práce: Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae jako potenciální léčiva v terapii civilizačních onemocnění Klíčová slova: alkaloidy, Amaryllidaceae, analoga, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, progrese buněčného cyklu, apoptóza Narcissus cv. Professor Einstein byl na základě získaných výsledků screeningových studií vybrán pro podrobnou fytochemickou práci za účelem co nejširšího spektra AmA. Z 34,3 kg čerstvých cibulí bylo získáno 31,7 g přečištěného alkaloidního extraktu, který byl rozdělen pomocí sloupcové chromatografie se stupňovitou elucí benzinem, chloroformem a ethanolem v různých poměrech na téměř 500 frakcí. Tyto frakce byly spojeny do 27 podfrakcí, z nichž bylo pomocí preparativní TLC, vakuové sloupcové chromatografie a krystalizace izolováno 25 alkaloidů v čistém stavu. Všechny látky byly identifikovány pomocí GC-MS, ESI-MS, NMR, optické otáčivosti a literatury a jedna z nich byla identifikována jako nový nepopsaný alkaloid lykorinového strukturního typu. Všechny alkaloidy izolované v dostatečném množství byly podrobeny testům jejich biologické aktivity spojené s Alzheimerovou chorobou (inhibice hAChE, hBuChE, POP,...
|
|
|
Alkaloidy Zephyranthes citrina (Amaryllidaceae): izolace, strukturní identifikace, biologická aktivita.
Kohelová, Eliška ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Lapčík, Oldřich (oponent) ; Mučaji, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Eliška Kohelová Školitel: prof. Ing. Lucie Cahlíková, Ph.D. Název disertační práce: Alkaloidy Zephyranthes citrina (Amaryllidaceae): izolace, strukturní identifikace, biologická aktivita. Klíčová slova: Amaryllidaceae alkaloidy, Zephyranthes, Alzheimerova choroba, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, nádorová onemocnění Rostlina Zephyranthes citrina Baker byla na základě screeningové studie a literární rešerše vybrána pro podrobnou fytochemickou práci za účelem zisku co nejširšího spektra Amaryllidaceae alkaloidů. Z 35 kg čerstvých cibulí bylo získáno 151 g přečištěného alkaloidního extraktu, který byl rozdělen pomocí sloupcové chromatografie na téměř 700 frakcí. Tyto frakce byly na základě kontrolní TLC spojeny do 21 podfrakcí, z nichž bylo pomocí extrakce kapalina-kapalina, flash chromatografie, preparativní TLC a krystalizace izolováno 27 alkaloidů. Všechny látky byly identifikovány pomocí MS (EI, ESI), HRMS, 1D- a 2D-NMR, CD, optické otáčivosti a porovnáním dat s literaturou. U sedmi z nich se jednalo o nové dosud nepopsané struktury (6α-ethoxyhippeastidin, 10-deoxy-6α- ethoxyhippeastidin, narcieliin, zephyjanin, zephycitrin I, 7-ethoxy-10-methoxy-1- methyllykorenan-9-ol a zephycitrin II). Všechny...
|
|
|
Vliv vybraných endokrinních disruptorů na lidskou spermatogenezi
Vítků, Jana ; Hill, Martin (vedoucí práce) ; Pohanka, Michal (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Souhrn Steroidní hormony hrají důležitou roli během spermatogeneze, v produkci spermatu a v neposlední řadě také v udržování sekundárních mužských pohlavních znaků a libida. Jsou také diskutovaným cílem pro látky, které se nazývají endokrinní disruptory (ED). Dosud však nebyla provedena žádná studie, která by se zabývala vlivem ED na steroidní spektrum ve 2 biologických matricích - v plasmě a seminální plasmě. Cílem mé disertační práce bylo vyvinout a zvalidovat metodu pro stanovení bisfenolu A (BPA) a spektra steroidů v plasmě a seminální plasmě a tuto metodu společně s dalšími ukazateli využít k vyhodnocení vlivu BPA a polychlorovaných bifenylů (PCB) na lidskou spermatogenezi a steroidogenezi. Byly vyvinuty a zvalidovány 2 nové metody na stanovení BPA a 11 steroidů v plasmě a seminální plasmě a tyto metody byly použity ke stanovení 191 vzorků v obou tělních tekutinách u mužů s různým stupněm neplodnosti. Současně byly v plasmě stanoveny hladiny 6 kongenerů PCB, gonadotropinů, selenu a zinku. K vyhodnocení vztahů mezi všemi analyty byly použity parciální korelace adjustované na věk a BMI. BPA v seminální plasmě negativně koreloval s koncentrací spermií (r=-0.212; p=0.005), celkovým počtem spermií (r=-0.178; p=0.018) a jejich morfologií (r=-0.156; p=0.049). Tyto vztahy byly zjištěny jen pro BPA v seminální...
|
|
|
Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae jako potenciální léčiva v terapii civilizačních onemocnění
Breiterová, Kateřina ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Nagy, Milan (oponent) ; Lapčík, Oldřich (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Kateřina Breiterová Školitel: doc. Ing. Lucie Cahlíková PhD. Název disertační práce: Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae jako potenciální léčiva v terapii civilizačních onemocnění Klíčová slova: alkaloidy, Amaryllidaceae, analoga, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, progrese buněčného cyklu, apoptóza Narcissus cv. Professor Einstein byl na základě získaných výsledků screeningových studií vybrán pro podrobnou fytochemickou práci za účelem co nejširšího spektra AmA. Z 34,3 kg čerstvých cibulí bylo získáno 31,7 g přečištěného alkaloidního extraktu, který byl rozdělen pomocí sloupcové chromatografie se stupňovitou elucí benzinem, chloroformem a ethanolem v různých poměrech na téměř 500 frakcí. Tyto frakce byly spojeny do 27 podfrakcí, z nichž bylo pomocí preparativní TLC, vakuové sloupcové chromatografie a krystalizace izolováno 25 alkaloidů v čistém stavu. Všechny látky byly identifikovány pomocí GC-MS, ESI-MS, NMR, optické otáčivosti a literatury a jedna z nich byla identifikována jako nový nepopsaný alkaloid lykorinového strukturního typu. Všechny alkaloidy izolované v dostatečném množství byly podrobeny testům jejich biologické aktivity spojené s Alzheimerovou chorobou (inhibice hAChE, hBuChE, POP,...
|
|
|
Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae jako potenciální léčiva v terapii civilizačních onemocnění
Breiterová, Kateřina ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Lapčík, Oldřich (oponent) ; Nagy, Milan (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky Kandidát: Mgr. Kateřina Breiterová Školitel: doc. Ing. Lucie Cahlíková PhD. Název disertační práce: Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae jako potenciální léčiva v terapii civilizačních onemocnění Klíčová slova: alkaloidy, Amaryllidaceae, analoga, AChE, BuChE, POP, GSK-3β, progrese buněčného cyklu, apoptóza Narcissus cv. Professor Einstein byl na základě získaných výsledků screeningových studií vybrán pro podrobnou fytochemickou práci za účelem co nejširšího spektra AmA. Z 34,3 kg čerstvých cibulí bylo získáno 31,7 g přečištěného alkaloidního extraktu, který byl rozdělen pomocí sloupcové chromatografie se stupňovitou elucí benzinem, chloroformem a ethanolem v různých poměrech na téměř 500 frakcí. Tyto frakce byly spojeny do 27 podfrakcí, z nichž bylo pomocí preparativní TLC, vakuové sloupcové chromatografie a krystalizace izolováno 25 alkaloidů v čistém stavu. Všechny látky byly identifikovány pomocí GC-MS, ESI-MS, NMR, optické otáčivosti a literatury a jedna z nich byla identifikována jako nový nepopsaný alkaloid lykorinového strukturního typu. Všechny alkaloidy izolované v dostatečném množství byly podrobeny testům jejich biologické aktivity spojené s Alzheimerovou chorobou (inhibice hAChE, hBuChE, POP,...
|
|
|
Sulfation and desulfation of neuroactive steroids in normal and neoplastic primate brain tissues
Kříž, Lubomír ; Hampl, Richard (vedoucí práce) ; Lapčík, Oldřich (oponent) ; Pácha, Jiří (oponent)
SOUHRN Byla vyvinuta a aplikována nová metodika pro stanovení aktivit STS a SULT v mozkové tkáni primátů. Stanovení aktivity STS bylo zaloŽeno na vlastní enzymové, extrakci reakčníhoproduktu' jeho následné derivatizací a stanovení metodou GC-MS. Aktivita SULT byla stanovena nepřímo po separaci nezreagovaného substrátu a následné hydrolýze produktu enzymové reakce. Detekce byla provedena radioimunoanalýicky. Pro obě enzymové reakce byly nalezeny optimální podmínky. Jak reakce katalyzovaná STS, tak reakce katalyzovaná SULT vykazova|y významné závislosti struktury enzymu, případně reakčníhocentra na katalytické aktivitě. Navíc byla pozorována dosud nepopsaná substrátová inhibice STS a nayrŽena hypotéza obj asňuj ícíýzio lo gický vý znam tohoto efektu. Stanovení aktivit STS a SULT v různých oblastech mozku opic odhalilo rozdíly jak mezi jednotliými mozkovými částmi' tak mezi oběma pohlavími. Nicméně vzhledem k nízkémupočtuvzorkůnebyla vyhodnocena statistická významnost. RovněŽ byly stanoveny základní kinetické parametry pro STS. Aktivita STS a SULT v lidských mozkových nádorech vykazova|a statisticky vysoce významné rozdíly mezi jednotlivými typy nádorů. Dále byla odha|ena tendence tumorů ke tvorbě klastru charakterizovaných jak aktivitou STS, tak SULT. Tato skutečnost odhalila specifrcké znaky zvláště pro...
|
host ::
RSS.