|
|
The co-culture of keratinocytes and fibroblasts on a multi-layered polyester nanofibrous membrane enriched with platelet lysate
Blanquer, Andreu ; Filová, Elena ; Jenčová, V. ; Brož, Antonín ; Kuželová Košťáková, E. ; Lisnenko, M. ; Procházková, R. ; Bačáková, Lucie
The prevalence of chronic wounds is increasing due to the population ageing and specific illnesses like diabetes mellitus and vascular diseases. Nanofibrous membranes fabricated using synthetic polymers are promising materials to enhance skin wound healing. PCL and PVA membranes are being studied to be used as scaffolds for skin tissue engineering and hydrogels for controlled drug delivery, respectively. The present study considers the development of a multi-layered membrane made of PCL and PVA loaded with platelet lysate (PL). PCL nanofibers allowed cell adhesion and growth, whereas PVA acted as a hydrogel that releases the bioactive compounds of platelet lysate. The cytocompatibility of the membranes containing PL and without it was demonstrated on two cell types involved in wound healing, i.e. keratinocytes and fibroblasts. Both cell types were able to adhere and proliferate on the membranes. In addition, the membrane containing PL enhanced the proliferation of fibroblasts. A co-culture study was also performed by seeding each cell type on one side of the membrane. The cells were co-cultured for 7 days and the results showed that PL increased the proliferation of cells achieving a monolayer of keratinocytes or fibroblasts on each side of the membrane. Thus, the beneficial effect of PCL-PVA+PL membranes on monocultures and co-cultures of skin cells was demonstrated, and these membranes can be considered potential scaffolds for treatment of chronic wounds.
|
|
|
Degradation of polycaprolactone electrospun materials - methods of analysis
Havlíčková, K. ; Řezanka, M. ; Kobera, Libor ; Kuželová Košťáková, E. ; Lukáš, D. ; Jenčová, V.
Biodegradable electrospun materials are widely used for medical application. Polycaprolatone is polymer suitable for electrospinning technology and is very often used to create nanofibrous scaffolds for tissue engineering. The time to disintegration or biodegradation of such materials is very important here. However, testing is not entirely easy. It is not possible to create exactly body-like conditions in vitro. Moreover, it is not easy to find suitable analytical methods that would show exactly what happens in the nanofibrous polycaprolactone electrospun samples at certain stages of degradation, ie how the internal structure of decaying nanofibers changes. This paper describes the traditional use of methods for testing polycaprolatone nanofibers by enzymatically catalysed degradation. Morphological changes are studied using scanning electron microscope images. However, it also offers a non-traditional analysis of polycaprolactone electrospun materials using the ssNMR method.
|
|
|
A COMPARISON OF THE CENTRIFUGAL FORCE SPINNING AND ELECTROSPINNING OF COLLAGEN UNDER DIFFERENT CONDITIONS
Hlavatá, J. ; Suchý, Tomáš ; Šupová, Monika ; Pokorný, M. ; Košťáková, E.
Collagen makes up one of the most important parts of the extracellular matrix and connective tissue. Collagen type I accounts for up to 90% of the collagen found in the body and it can be isolated and purified in large quantities and processed into a variety of forms. With respect to the process of the treatment of collagen into the nano-fibrous and submicron-fibrous forms, severe conditions leading to the denaturation of the collagen and thus the gelatin content should be avoided. Centrifugal force spinning and electrospinning processes appear to present promising methods for the spinning of collagen solutions. This paper deals with a comparison of the various methods applied in the processing of collagen, i.e. principally needle and needleless centrifugal spinning technology and electrospinning technology. In addition, the effect of process parameters and collagen solution conditions on the final form of the material was analyzed. Spun layers were prepared based on collagen type I isolated from calf skin. Nano-structured layers were prepared employing the spinning of 4-16 wt% collagen solutions in phosphate buffer saline and ethanol. The layers thus prepared were characterized by means of scanning electron microscopy and Fourier transform infrared spectroscopy.
|
|
|
Rozpočtové určení daní
Houdková, Kamila ; Sedmihradská, Lucie (vedoucí práce) ; Košťáková, Eliška (oponent)
Diplomová práce zkoumá dopad novely zákona o rozpočtovém určení daní účinné od 1. 1. 2013 na financování obcí zřizujících na svém území školu. Hlavním cílem diplomové práce je zjistit, jaký vliv měla novela školského zákona a zákona o rozpočtovém určení daní na financování obcí zřizující na svém území školu a obcí, které na svém území školu nezřizují. A dále, zda po zrušení příspěvku na školství dokáže obec zřizující na svém území školu, pokrýt náklady, které jí vznikají s tím, že jejich školu navštěvují i žáci z obcí, na jejichž území škola zřízena není. V diplomové práci je zkoumána problematika financování obce zřizující na svém území školu a obce, která na svém území školu nezřizuje. Následně je problematika vztažena na celý Pardubický kraj, kde zjišťuji, zda obce zřizující na svém území školu dokážou po účinnosti novely zákona o rozpočtovém určení daní pokrýt náklady související s provozem školy.
|
|
|
In vitro testování buněčných nosičů na bázi nanovláken pro léčbu vitiliga
Kodedová, Barbora ; Amler, Evžen (vedoucí práce) ; Kuželová Košťáková, Eva (oponent)
Vitiligo je kožní onemocnění s prevalencí 2 % v celosvětové populaci. Je charakteristické sníženou aktivitou či ztrátou melanocytů v epidermis, vedoucí k depigmentaci v kůži a ve vlasech. Zásadně ovlivňuje psychiku, sociální vztahy pacientů a snižuje schopnost obrany organismu proti UV záření. Jednou z metod léčby je autologní transplantace melanocytů, nebo suspenze melanocytů s keratinocyty. Použití biokompatibilní membrány umožňující kultivaci těchto buněk s jejich následnou transplantací na depigmentované léze by mohlo zvýšit úspěšnost a zefektivnit tuto formu léčby. Cílem této práce proto bylo vytvořit biokompatibilní membránu z nanovlákenných vrstev polyvinylalkoholu (PVA), která by mohla sloužit jako nosič pro buněčné transplantáty v terapii vitiliga. Nosiče z PVA byly připraveny elektrostatickým zvlákňováním z hladiny a následně modifikovány studeným metanovým (CH4) plazmatem pro snížení jejich hydrofilnosti. Vzorky modifikovaných nanovlákenných nosičů byly podrobeny analýze fyzikálně-chemických vlastností (vizualizace morfologie vláken pomocí SEM, XPS analýza, smáčivost a Zeta potenciál povrchu). Následně byla sledována adheze, proliferace a metabolická aktivita myších linií melanocytů (Melan-a) a keratinocytů (XB2) pomocí testování in vitro. Z výsledků vyplývá, že krátkodobá modifikace CH4...
|
|
|
Daňové úniky a transferové ceny
Košťáková, Eliška ; Vítek, Leoš (vedoucí práce) ; Zídková, Hana (oponent)
Cílem diplomové práce je vysvětlit daňový únik, zodpovědět otázku, kdy se jedná o daňový únik, vyhnutí se dani a daňový trestný čin. Dále charakterizovat metody měření daňových úniků a opatření proti nim zaváděná na národní i mezinárodní úrovni. Tohoto cíle je dosaženo prostřednictvím analyticko-syntetických metod využitých v první až třetí kapitole diplomové práce. Hlavním cílem práce je využít externí zdroje informací pro stanovení převodních cen k čemuž využívám drobné ekonomické modely. Pro dosažení tohoto cíle práce je nejprve vysvětlen princip tržního odstupu, srovnávací analýza a následně představeny jednotlivé metody stanovení převodních cen. Diplomová práce se rovněž zabývá zhodnocením jednotlivých transferových metod, a to za použití analyticko-syntetických metod a metody komparace.
|
host ::
RSS.