|
|
Alkaloids of Dicranostigma franchetianum (Prain) Fedde and their selected biological activity
Wijaya, Viriyanata ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Šmejkal, Karel (oponent) ; Klouček, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Viriyanata Wijaya, M.Sc. Školitel: Prof. RnDr. Lubomír Opletal, CSc. Název práce: Alkaloidy Dicranostigma franchetianum (Prain) Fedde a jejich vybraná biologická aktivita Dicranostigma franchetianum (Prain) Fedde (Papaveraceae) je jedním ze zástupců malého rodu Dicranostigma Hook. f. & Thomson. Tato rostlina byla vybrána pro podrobnou fytochemickou studii na základě výsledků screeningové studie. Při screeningu alkaloidního extraktu vykázal tento alkaloidní extract zajímavou inhibiční aktivitu vůči cholinesterasám (hAChE/hBChE, IC50 g/ml; 1,67 0,11 a 3,85 0,31), navíc se podařilo v extraktu identifikovat minimálně 15 alkaloidů. Primární ethanolový extrakt byl připraven z 11,8 kg suché byliny (původ: Zahrada léčivých rostlin, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové). Zsa využití běžných chromatografických metod bylo izolováno celkem 21 isochinolinových alkaloidů různých strukturních typů. Všechny sloučeniny byly identifikovány pomocí různých spektrometrických technik (GC-MS, HPLC-MS a 1D- a 2D-NMR, optická aktivita). Všechny alkaloidy byly podrobeny studiu na jejich inhibiční potenciál vůči lidské rekombinantní acetylcholinesterase (hAChE), lidské rekombinantní butyrylcholinesterase...
|
|
|
Identifikace senzoricky aktivních látek v konopí
Jarošová, Šárka ; Klouček, Pavel (vedoucí práce) ; Polesný, Zbyněk (oponent)
Konopí představuje složitý komplex chemických látek, které mezi sebou interagují. Mezi ty nejdůležitější patří kanabinoidy a terpenoidy. Mezi těmito látkami dochází k synergii, díky které rostlina konopí vykazuje řadu léčivých účinků, např. antioxidační, protizánětlivé, protiplísňové a analgetické. Za vůni konopí jsou zodpovědné aromatické látky (nejvíce však terpenoidy), které vykazují terapeutické účinky už při pouhém jejich vdechnutí. Cílem této diplomové práce bylo identifikovat senzoricky aktivní látky v jednotlivých odrůdách konopí pomocí metody GC-MS/FID a senzoricky analyzovat tyto látky pomocí metody GC-MS/O. Analyzováno bylo 7 vzorků odrůd: Cannatonic (CT), Conspiracy Kush (CK), Jillybean (JB), Jacks Cleaner (JC), Jack Skellington (JS), Nordle (N), a Nurse Jackie (NJ). Tyto odrůdy byly vybrány na základě genetického původu (poměru morfologických typů konopí C. sativa a C. indica). Aromatické látky byly ze vzorků jednotlivých odrůd extrahovány pomocí SPME vlákna. Senzorická analýza byla provedena jedním proškoleným hodnotitelem.
Z výsledků je patrné, že nejvíce zastoupenou senzoricky aktivní látkou v měřených odrůdách konopí (jak v C. sativa, tak v C. indica) je myrcen. Tento terpenoid byl v největším množství zastoupen u odrůdy N (33,4 %), dále u odrůdy NJ (29,8 %), CT (29,7 %) a JB (29,7 %). Druhou nejvíce zastoupenou aromatickou látkou byl beta-karyofylen, který vykazoval největší relativní zastoupení u odrůd CK (21,1 %), JC (20 %) a NJ (14 %). U odrůd s vyšším obsahem morfotypu C. indica (CK, N) byl prokázán vyšší obsah limonenu a alfa-humulenu než u odrůd s vyšším obsahem morfotypu C. sativa. Na základě senzorické analýzy byla prokázána vyšší senzorická aktivita limonenu, linaloolu a alfa-humulenu u odrůd s větším poměrem C. indica. Odrůdy s vyšším poměrem C. sativa byly senzoricky i kvantitativně bohatší na myrcen a terpinolen.
|
|
|
Antimikrobiální aktivita konopného extraktu u patogenů způsobujících onemocnění kůže
Pařízek, Štěpán ; Fraňková, Adéla (vedoucí práce) ; Klouček, Pavel (oponent)
Choroby vyvolané mikroby jsou v celosvětovém měřítku příčinou morbidity a ohrožení zdraví lidí. Přes nesporný globální přínos antibiotik se lze v dnešní době stále častěji setkávat s výskytem infekcí způsobených bakteriemi rezistentními k antibiotikům. Lze to přisuzovat dlouhodobě zvýšené spotřebě antibiotik, ale především jejich nevhodným užíváním. Vývoj syntetických antibakteriálních léčiv v posledních desetiletích výrazně stagnuje, navíc tato antibiotika ničí v těle i pro člověka důležité bakterie. Tato skutečnost vyvolává silnou potřebu hledat přírodní léčebné prostředky s podobnými nebo lepšími antimikrobiálními vlastnostmi. Je známo, že mnoho rostlin produkuje široké spektrum sekundárních metabolitů s antimikrobiálními účinky, které různými mechanismy působí inhibičně na růst a reprodukci patogenních mikroorganismů. Z prozkoumaných rostlinných léčiv se jeví jako vhodná alternativa antibiotik konopí, které je lidmi již velmi dlouho využíváno při mnoha onemocněních.
Tato práce se zaměřuje na antimikrobiální aktivitu extraktů ze šesti různých genotypů konopí. Extrakty s různým poměrem kanabinoidů byly testovány in-vitro mikrodiluční metodou na vybraných patogenech, způsobujících onemocnění kůže (Staphylococcus spp., Streptococcus spp.).
Výsledky potvrdily antimikrobiální aktivitu všech testovaných extraktů. Velmi dobrá minimální inhibiční koncentrace byla vyhodnocena zejména u Streptococcus spp.
s koncentrací 4 ug/ml. Nejlepší výsledky proti všem patogenům vykazovaly extrakty NHS4, JB3 a CK3 s minimální inhibiční koncentrací v rozsahu od 4 do 16 ug/ml. Pouze extrakty CK2, N3 a JC1 se jevily jako neúčinné (MIC 512 ug/ml), protože u nich nemohla být vyhodnocena inhibiční koncentrace.
|
|
|
Biologicky aktivní látky v druzích rodu Rheum využívaných v tradiční asijské medicíně
Neradilová, Vanda ; Klusoňová, Hana (vedoucí práce) ; Klouček, Pavel (oponent)
Vanda Neradiová Biologicky aktivní látky v druzích rodu Rheum využívaných v tradiční asijské medicíně Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Odborný pracovník v laboratorních metodách Cíl práce Cílem této práce bylo stanovit obsahové látky a jejich množství ve dvou druzích rodu Rheum (R. acuminatum Hook. f. & Thomson a R. australe D. Don) a porovnat, do jaké míry se tyto druhy liší v množství obsahových látek. Dalším kritériem, podle kterého byly tyto druhy srovnávány, bylo místo jejich původu. Srovnávala jsme tyto dva druhy rostoucí ve svém přirozeném prostředí - Himálajích a pěstované v České republice. Metody Ke stanovení obsahových látek a jejich kvantitativnímu stanovení jsem použila vysokoúčinné kapalinové chromatografie s UV a fluorescenční detekcí. Vzorky jsem porovnávala pomocí retenčních faktorů a retenčních časů standardů. Dále jsem provedla izolaci a identifikaci pravděpodobného physcionu pomocí hmotnostní spektrometrie. Výsledky Při kvalitativní analýze anthrachinonů byl stanoven aloe - emodin, emodin, chrysophanol, physcion a rhein a analýzou stilbenů piceatannol a resveratrol. V druhu R. acuminatum bylo zjištěno vyšší zastoupení anthrachinonů oproti R. australe. Při srovnávání obsahu stilbenů bylo nutné zvlášť hodnotit piceatannol, jehož...
|
|
|
Možnost prodloužení úchovy čerstvého kuřecího masa pomocí silic enkapsulovaných do jílových nanočástic
Vojtíšková, Zuzana ; Klouček, Pavel (vedoucí práce) ; Fraňková, Adéla (oponent)
Tato diplomová práce má za cíl představit rostlinné silice jako účinné antimikrobiální látky vhodné pro konzervaci potravin, se zaměřením na údržnost masa. Maso je potravina, která díky vysokému obsahu živin, snadno podléhá mikrobiálnímu kažení. Kažení masa lze oddálit výběrem vhodné konzervační metody. V současné době jsou stále více využívány tzv. moderní konzervační metody, které se od klasických konzervačních zákroků liší především v šetrnosti k dané potravině. Za nadějnou metodu lze považovat konzervaci pomocí rostlinných silic.
V experimentální části diplomové práce je hodnocen účinek silic enkapsulovaných do jílových nanočástic na údržnost čerstvého kuřecího masa. Pro účely experimentu byly použity tymiánová silice a silice ze saturejky ve dvou rozdílných koncentracích (silice:nanojíl - 1:5, 1:10 w/w). Kousky kuřecího masa (5 g) byly zaočkovány bakterií Salmonella enteritidis (ATCC 13076) a Escherichia coli (ATCC 25922) a následně obaleny v jílových nanočásticích s enkapsulovanou silicí. Takto ošetřené maso bylo skladováno při 4 °C a vyhodnocováno 1., 7. a 14. den skladování společně se třemi kontrolami. Vzorky kuřecího masa byly zkoumány z hlediska mikrobiologických parametrů, kdy byl hodnocen jejich inhibiční efekt proti patogenním bakteriím. Vzorky byly podrobeny také senzorické analýze, která měla stanovit případný vliv silic na organoleptické vlastnosti masa.
Výsledky potvrdily antimikrobiální účinnost obou silic proti patogenním bakteriím. Tymiánová silice však vykazovala větší inhibiční účinek ve srovnání se silicí ze saturejky. U obou testovaných bakterií došlo vlivem přídavku tymiánové silice ke snížení jejich počtu o více jak 3,5 log KTJ.g-1 v porovnání s kontrolami.
Méně příznivé výsledky byly zaznamenány v případě senzorické analýzy, neboť z hlediska organoleptických vlastností nebyly dané koncentrace silic hodnotiteli přijímány kladně. Ve vzorcích ošetřených silicemi tak převládala nežádoucí hořká a štiplavá chuť.
Tato práce potvrdila antimikrobiální aktivitu silic tymiánu a saturejky, kterou lze využít při konzervaci čerstvého masa. Avšak reálné použití silic v potravinářství může být značně omezeno jejich vlivem na organoleptické vlastnosti produktu.
|
|
|
Laboratorní ověření účinnosti tradičně využívaných léčivých rostlin Bolivie
Hladová, Alena ; Klouček, Pavel (vedoucí práce) ; Přemysl, Přemysl (oponent)
Tradiční medicína domorodých kultur je založena na léčivých účincích místních rostlin. Tito lidé se je naučili v průběhu historie využívat a nahrazují jimi tak primární zdravotnickou péči. K tomu přispívá i fakt, že na ni nemají finanční prostředky a současně je to provázeno
i obtížnou dostupností nemocnic v oblastech výskytu těchto kultur.
Diplomová práce se zabývá laboratorním ověřením antimikrobiální a antioxidační účinnosti amazonských rostlin pocházejících z jihozápadu Bolívie. V práci je také stručně uvedena hospodářská a politická situace státu společně s vývojem tradiční medicíny ve světě a jejím možným využitím ve farmacii. Část práce je také věnována problematice stále vzrůstající antimikrobiální rezistence a možným účinkům volných radikálů v lidském organismu. Experiment byl věnován laboratornímu testování 9 vzorků dovezených sušených rostlin.
Ke zjištění antimikrobiálních vlastností byla zvolena mikrodiluční metoda a antioxidační působení bylo ověřeno ORAC metodou, která je založena na eliminaci radikálů. Mikrodiluční metodou byla potvrzena 80% MIC v počátečních testovaných koncentracích (1,024 mg/ml)
u rostliny Satureja ovata proti bakteriím Staphylococcus aureus ATCC 33591
a Streptococcus pyogenes u rostliny Baccharis genistelloides proti S. pyogenes. U ostatních vzorků se nepodařilo stanovit hodnoty minimálních inhibičních koncentrací. To lze připsat více faktorům, které jsou v práci popsány. Naproti tomu bylo u všech vzorků potvrzeno pozitivní působení proti volným radikálům. Nejvyšší účinnost vykazovala Satureja ovata
(1373,2 ug TE/mg extraktu).
Zpracování práce bylo provázeno obtížně dohledatelnými informacemi o testovaných rostlinách, a to jak z hlediska botanického popisu, tak z hlediska porovnání získaných laboratorních výsledků s výsledky odborných studií. Výsledky experimentu byly tedy hodnoceny především vzhledem k tradičnímu užívání testovaných rostlin, které bylo uvedeno bolivijskými domorodci nebo dohledáno z literatury.
|
|
|
Laboratorní ověření účinnosti tradičně využívaných léčivých rostlin Ekvádoru
Klepáčková, Kateřina ; Klouček, Pavel (vedoucí práce) ; Přemysl, Přemysl (oponent)
Poskytování služeb zdravotní péče v Ekvádoru se značně liší podle socioekonomického postavení, věku, pohlaví a místa bydliště. Až třetina obyvatelstva nemá pravidelný přístup ke zdravotnickým službám a více než dvě třetiny obyvatel nemají zdravotní pojištění. Bylinná medicína je syntézou terapeutických zkušeností domorodých lékařů vyvíjejících se po stovky let a její prostředky se používají k prevenci a léčbě různých typů onemocnění. Rostliny jsou oblíbeným přírodním lékem díky účinnosti, bezpečnosti a minimálním vedlejším účinkům. Avšak některé kombinace bylinné medicíny a léků můžou být nebezpečné. Vědy, které pomáhají zkoumat souvislosti tradičního využití rostlin v časovém horizontu a také přispívají k objevování bioaktivních látek, se nazývají etnobotanika a etnofarmakologie. Tato práce se zabývá deseti rostlinami, dovezených z Ekvádoru, které se tradičně využívají na různé typy nemocí, jako jsou střevní potíže, chřipka, nachlazení, zánět močového měchýře, kožní nemoci v pánevní dutině atp. Výzkum účinnosti bylinných léčiv má do budoucna velký význam i kvůli rozšiřující se antimikrobiální rezistenci, která se v současné době stává vážným rizikem pro zdraví lidí a zvířat. Antimikrobiální a antioxidační aktivita rostlin, které jsou v této práci měřeny bujónovou mikrodiluční metodou a ORAC metodou, jsou významným ukazatelem pro analýzu léčivých rostlin. Jediným prokazatelným pozitivním výsledkem při testování antimikrobiální aktivity bylo nalezení minimální inhibiční koncentrace Espeletia schultzii proti Streptococcus pyogenes (MIC = 0,256 mg/ml). Nejvyšší antioxidační aktivitu prokázala rostlina Croton elegans Kunth (743,64 +- 28,56 mikrogramů troloxu ekvivalentní 1 miligramu extraktu), u které nebyly nalezeny žádné záznamy související s antioxidační aktivitou.
|
|
|
Výběr chemotypů konopí vhodných pro léčebné použití s převládající účinnou látkou THC
Michnová, Lenka ; Fraňková, Adéla (vedoucí práce) ; Klouček, Pavel (oponent)
V posledních letech se stále více diskutuje o možném terapeutickém využití konopí. Ukazuje se, že jeho účinné látky (kanabinoidy tetrahydrokanabinol a kanabidiol) mají velký potenciál v medicíně a nemusí být zneužívány pouze jako rekreační droga. Katedra rostlinné výroby na FAPPZ byla první institucí v ČR, které bylo uděleno povolení k legálnímu pěstování konopí s vyšším obsahem THC než je 0,3 % pro výzkumné účely.
V první části literární rešerše byly shrnuty základní poznatky o konopí, jeho biologicky aktivních látkách a současné legislativě. V druhé části byl popsán endokanabinoidní systém a využití konopí v oblasti medicíny. Tato práce byla zaměřena na vyhodnocení obsahu THC a CBD v sedmi různých kultivarech konopí (Nurse Jackie, Conspiracy Kush, Jillybean, Jack Cleaner 2, Jack Skellington, Nordle a National Health Service). Rostliny konopí byly pěstovány ve stejných podmínkách ve třech pěstebních cyklech. Obsah účinných látek v sušeném a homogenizovaném květenství každé rostliny byl analyzován pomocí plynové chromatografie s plamenově ionizačním detektorem (GC-FID) dle metodiky OSN. Na základě analýz byly vybrány vhodné genotypy, které obsahem kanabinoidů odpovídají vyhlášce 236/2015 Sb. a potřebám pacientů.
Dle výsledků bylo zjištěno, že všech sedm analyzovaných odrůd je vhodných k léčebnému použití z hlediska obsahu THC a CBD. Nejvyšší průměrný obsah THC byl naměřen u odrůdy Jack Cleaner 2, naopak nejmenší obsah byl analyzován v odrůdě Nordle. Bylo prokázáno, že rozdíly v obsahu THC jsou spojeny spíše s genotypovou variací, než s kultivačními faktory. Cílem práce bylo také zjistit, která ze sedmi odrůd bude stabilní jak z hlediska obsahu THC a CBD, tak i ve výnosu. V tomto případě se nejlépe jevila odrůda Jack Cleaner 2 a Nurse Jackie. Z předběžných výsledků vyplývá, že právě tyto dvě odrůdy by mohly být využívány k léčebným účelům.
|
|
|
Influence of Essential Oil Blanching on Drying Kinetics of Dehydrated Meat
Claramount Ruiz, Diego Antonio ; Banout, Jan (vedoucí práce) ; Klouček, Pavel (oponent)
Meat is one of the most valuable livestock products, for many people serves as their first source of animal protein. Rising demand for meat in developing countries combined with poor access to synthetic antioxidants necessary for proper food preservation along with their potential side-effects highlights the importance of feasible alternatives for rural populations.
Among the most critical components that cause quality deterioration are the lipids and proteins oxidation, in time if not treated properly this will cause off-odor and off-flavor production in the meat, for that reason this dissertation focus on the application of Essential Oil (EO) as alternative to those more commonly used synthetic antioxidants like butyl hydroxyanisole (BHA) and butylhydroxytoluene (BHT) as pre-treatment of dehydrated meat, and its further effects if any during the drying process.
Beef meat samples will be prepared, and tree different types of pretreatment will be studied along with a combination of three possibilities as concentration of Essential Oil, the three types of pre-treatment will be ; Steam Blanching (SB), Hot Air Blanching (HAB) and Oil Treatment (OT), this were combined with different concentrations of Oregano EO, those were 1.5ml, 3ml, and 6ml. The approach will focus on finding if there was any correlation between the concentration of Oregano EO used versus the speed of drying and if there is any correlation between the different types of pretreatment applied.
|
|
|
Kvalita bramborových lupínků ze skladovaných brambor ošetřených karvonem
Gildainová, Dana ; Klouček, Pavel (vedoucí práce) ; Fraňková, Adéla (oponent)
V diplomové práci byla hodnocena schopnost monoterpenu D-karvonu (hlavní složka kmínové silice) inhibovat růst klíčků skladovaných brambor určených pro zpracování na potravinářské výrobky. Následně byl hodnocen vliv ošetření karvonu na vybrané kvalitativní parametry bramborových lupínků.
Pro tento experiment byly zvoleny dvě koncentrace karvonu (8 a 32 mikrolitrů na litr) aplikovaného na skladované brambory v třítýdenních intervalech celkem čtyřikrát. K aplikaci byl použit upravený chromatograf, který zajistil rovnoměrné rozptýlení aplikované látky. Ošetření probíhalo po dobu deseti minut, každá varianta ošetření byla provedena ve třech opakováních. Po každém ošetření byl hodnocen inhibiční efekt karvonu na růst klíčků a také byl stanovován obsah redukujících cukrů v hlízách metodou Luffa-Schoorla. Z ošetřených brambor byly opakovaně vyráběny bramborové lupínky. Instrumentální měření textury bramborových lupínků bylo provedeno na testovacím přístroji Instron. Lupínky byly také podrobeny senzorickému hodnocení ke zjištění míry ovlivnění organoleptických vlastností.
Na základě výsledků byl inhibiční účinek na růst klíčků potvrzen pouze u varianty ošetření karvonem o koncentraci 32 mikrolitrů na litr. Varianta ošetření 8 mikrolitrů na litr vykazovala stejné výsledky klíčení jako varianta kontrolní. Obsah redukujících cukrů v hlíze nebyl ovlivněn ošetřením karvonem. Při instrumentálním měření texturních vlastností byl významný rozdíl mezi kontrolou a variantami ošetřenými karvonem potvrzen pouze po druhém a čtvrtém ošetření. Tyto lupínky vykazovaly vyšší maximální sílu potřebnou ke křupnutí bramborového lupínku v porovnání s kontrolní variantou. Na základě senzorického profilu bramborových lupínků nebyly ovlivněny organoleptické vlastnosti, a to ani po čtvrtém ošetření skladovaných brambor karvonem. Silice a jejich účinné látky představují vhodnou náhradu používaných syntetických látek, protože nebyl zjištěn negativní vliv karvonu na kvalitativní parametry.
|
host ::
RSS.