|
|
Vývoj bakterií rodu Asaia ve flebotomech a jejich vliv na přenos leishmanií
Stejskalová, Markéta ; Jančářová, Magdaléna (vedoucí práce) ; Procházková, Petra (oponent)
Složení mikrobiomu hmyzích vektorů hraje nezastupitelnou roli při šíření lidských pato- genů. Dosavadní znalosti o vzájemných vztazích mezi flebotomy, bakteriemi a patogeny jsou dost omezené. Tato diplomová práce se zabývá bakterií rodu Asaia, která může být součástí mikrobiomu flebotoma. Oba testované druhy, Asaia siamensis i Asaia krungthepensis, jsou schopné kolo- nizovat střevo Phlebotomus duboscqi a navíc byl prokázán jak transstadiální přenos mezi jednotlivými larválními stádii tak kontaminativní přenosu do další generace. Při superin- fekci Ph. duboscqi Asaia sp. a Leishmania major byl také prokázán vliv bakterii na vývoj leishmaniové infekce, což může mít výrazný epidemiologický dopad a je třeba se tímto tématem nadále zabývat. Klíčová slova: Phlebotomus, superinfekce, Asaia siamensis, Asaia krungthepensis, Leishma- nia major, mikrobiom 1
|
|
|
Toscana virus development in sand flies
Rehbergerová, Markéta ; Jančářová, Magdaléna (vedoucí práce) ; Hönig, Václav (oponent)
Toscana virus (TOSV) je původcem lidských meningitid, meningoencefalitid a encefalitid. Tento virus je ve Středomoří převážně během letních měsíců přenášen krev sajícím hmyzem Phlebotomus perniciosus a Ph. perfiliewi ze skupiny Phlebotominae (Diptera, Psychodidae). V předkládané diplomové práci byly studovány experimentální nákazy druhů Ph. papatasi, Ph. perniciosus, Ph. sergenti, Ph. tobbi a Sergentomyia schwetzi virovými kmeny náležejícími do dvou genetických linií TOSV (TOSV-A a TOSV-B). Nákazy TOSV-A z infekční krve byly neúspěšné u všech testovaných druhů. U druhů Ph. tobbi a Ph. sergenti popisujeme úspěšné nákazy TOSV-B z infekční krve s 59.5 % a 5.9 % nakažených jedinců, a rozšíření viru do hlavy se slinnými žlázami, které naznačuje potenciál pro přenos viru na obratlovce. Pokusy o nákazu TOSV z infekčního cukerného roztoku byly neúspěšné. Klíčová slova: Toscana virus, Phlebovirus, Phlebotominae, vektorová kompetence
|
|
|
Critical factors affecting pathogen development in sand flies
Jančářová, Magdaléna ; Volf, Petr (vedoucí práce) ; Ratinier, Maxime (oponent) ; Bilej, Martin (oponent)
Tato práce se zabývá bariérami a kritickými faktory při vývoji virů, leishmanií a gregarin během vývoje ve flebotomovi. Nejdříve jsme se zaměřili na vývojový cyklus virů přenášených flebotomy, jelikož dodnes není jasné, jak tyto viry dokážou kolovat v přírodě. Pro studium této problematiky jsme si zvolili Massilia virus (MASV), který je blízce příbuzný Toscana viru, hlavnímu původci meningitidy v Mediteránu během letních měsíců. Zkoušeli jsme různé způsoby nákazy Massilia virem u různých vývojových stádií flebotoma druhu Phlebotomus pernicisous a to infekci: (i) prvního a čtvrtého larválního instaru z larvální potravy, (ii) samic krví a (iii) obou pohlaví cukrem. Infekce larev z potravy a následný transstadiální přenos MASV na dospělce byl neefektivní; celkem se z larev vyvinulo 875 dospělců a pouze tři z nich byli MASV pozitivní. Po nákaze samic z krve jsme sice na počátku získali vysoké procento infikovaných jedinců, nicméně po defekaci došlo k eliminaci infekce a počet infikovaných samic poklesl na 5 z 27. Jako nejúčinnější způsob infekce MASV jsme prokázali nákazu z cukru; 72 % samic (88 ze 122) a 51 % samců (58 ze 113) bylo MASV pozitivní. Navíc, takto infikovaní flebotomové kontaminovali virem cukr, který díky tomu sloužil jako zdroj nákazy pro naivní jedince během následujících 24 hodin;...
|
|
|
Koinfekce leishmanií a gregarin u flebotomů
Jančářová, Magdaléna ; Volf, Petr (vedoucí práce) ; Bilej, Martin (oponent)
Tato diplomová práce se skládá ze dvou vzájemně navazujících částí. První část se zabývá vlivem gregariny Psychodiella sergenti na náchylnost flebotoma Phlebotomus sergenti vůči experimentální nákaze Leishmania tropica. Při srovnání turecké kolonie P. sergenti infikované gregarinou a izraelské kolonie bez gregarin jsme u turecké kolonie prokázali signifikantně vyšší intenzitu infekce L. tropica druhý a desátý den po infekčním sání a rychlejší kolonizaci stomodeální valvy promastigoty. Tyto rozdíly však zřejmě nejsou způsobeny gregarinou, ale vnitrodruhovou variabilitou P. sergenti nebo rozdílným složením střevní mikroflory u obou kolonií. U dvou kolonií P. sergenti původem z Izraele (jedna infikovaná gregarinami, druhá nikoli) jsme žádný signifikantní rozdíl nezaznamenali; kolonie se nelišily v procentu infikovaných samic, intenzitě infekce ani v lokalizaci promastigotů L. tropica. V druhé části mé diplomové práce byly pomocí degenerovaných primerů navržených na základě sekvencí imunitních molekul z Phlebotomus papatasi a Lutzomyia longipalpis a následného klonování produktů pomocí pGEM®-T Easy Vector Systems získány sekvence čtyř imunitních molekul P. sergenti: cekropinu, serpinu, TEPu (thiolesther containing proteins) a PGRP - LB (peptidoglycan recognition protein). Pomocí qPCR byla měřena...
|
|
|
Critical factors affecting pathogen development in sand flies
Jančářová, Magdaléna
Tato práce se zabývá bariérami a kritickými faktory při vývoji virů, leishmanií a gregarin během vývoje ve flebotomovi. Nejdříve jsme se zaměřili na vývojový cyklus virů přenášených flebotomy, jelikož dodnes není jasné, jak tyto viry dokážou kolovat v přírodě. Pro studium této problematiky jsme si zvolili Massilia virus (MASV), který je blízce příbuzný Toscana viru, hlavnímu původci meningitidy v Mediteránu během letních měsíců. Zkoušeli jsme různé způsoby nákazy Massilia virem u různých vývojových stádií flebotoma druhu Phlebotomus pernicisous a to infekci: (i) prvního a čtvrtého larválního instaru z larvální potravy, (ii) samic krví a (iii) obou pohlaví cukrem. Infekce larev z potravy a následný transstadiální přenos MASV na dospělce byl neefektivní; celkem se z larev vyvinulo 875 dospělců a pouze tři z nich byli MASV pozitivní. Po nákaze samic z krve jsme sice na počátku získali vysoké procento infikovaných jedinců, nicméně po defekaci došlo k eliminaci infekce a počet infikovaných samic poklesl na 5 z 27. Jako nejúčinnější způsob infekce MASV jsme prokázali nákazu z cukru; 72 % samic (88 ze 122) a 51 % samců (58 ze 113) bylo MASV pozitivní. Navíc, takto infikovaní flebotomové kontaminovali virem cukr, který díky tomu sloužil jako zdroj nákazy pro naivní jedince během následujících 24 hodin;...
|
|
|
Symbiotické bakterie rodu Wolbachia u flebotomů a komárů.
Rehbergerová, Markéta ; Dvořák, Vít (vedoucí práce) ; Jančářová, Magdaléna (oponent)
Bakterie rodu Wolbachia (Proteobacteria, Rickettsiales, Rickettsiaceae) jsou maternálně dědičné intracelulární symbionty mnoha druhů členovců (Arthropoda) a filárií (Nematoda, Secernentea). Díky schopnostem wolbachií navodit u svých hostitelů reprodukční anomálie a redukovat infekci patogenními organismy a viry jsou hojně studovány. Tato bakalářská práce je souhrnem dostupných informací týkajících se interakcí bakterií rodu Wolbachia s komáry (Diptera, Culicidae) a flebotomy (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae), přenašeči mnoha významných infekčních patogenů a možností jejich využití v kontrole přenosu těchto patogenů. Klíčová slova: Wolbachia, Phlebotominae, Culicidae, členovci přenášená onemocnění, symbióza, metoda kontroly přenašečů
|
|
|
Critical factors affecting pathogen development in sand flies
Jančářová, Magdaléna
Tato práce se zabývá bariérami a kritickými faktory při vývoji virů, leishmanií a gregarin během vývoje ve flebotomovi. Nejdříve jsme se zaměřili na vývojový cyklus virů přenášených flebotomy, jelikož dodnes není jasné, jak tyto viry dokážou kolovat v přírodě. Pro studium této problematiky jsme si zvolili Massilia virus (MASV), který je blízce příbuzný Toscana viru, hlavnímu původci meningitidy v Mediteránu během letních měsíců. Zkoušeli jsme různé způsoby nákazy Massilia virem u různých vývojových stádií flebotoma druhu Phlebotomus pernicisous a to infekci: (i) prvního a čtvrtého larválního instaru z larvální potravy, (ii) samic krví a (iii) obou pohlaví cukrem. Infekce larev z potravy a následný transstadiální přenos MASV na dospělce byl neefektivní; celkem se z larev vyvinulo 875 dospělců a pouze tři z nich byli MASV pozitivní. Po nákaze samic z krve jsme sice na počátku získali vysoké procento infikovaných jedinců, nicméně po defekaci došlo k eliminaci infekce a počet infikovaných samic poklesl na 5 z 27. Jako nejúčinnější způsob infekce MASV jsme prokázali nákazu z cukru; 72 % samic (88 ze 122) a 51 % samců (58 ze 113) bylo MASV pozitivní. Navíc, takto infikovaní flebotomové kontaminovali virem cukr, který díky tomu sloužil jako zdroj nákazy pro naivní jedince během následujících 24 hodin;...
|
|
|
Critical factors affecting pathogen development in sand flies
Jančářová, Magdaléna ; Volf, Petr (vedoucí práce) ; Ratinier, Maxime (oponent) ; Bilej, Martin (oponent)
Tato práce se zabývá bariérami a kritickými faktory při vývoji virů, leishmanií a gregarin během vývoje ve flebotomovi. Nejdříve jsme se zaměřili na vývojový cyklus virů přenášených flebotomy, jelikož dodnes není jasné, jak tyto viry dokážou kolovat v přírodě. Pro studium této problematiky jsme si zvolili Massilia virus (MASV), který je blízce příbuzný Toscana viru, hlavnímu původci meningitidy v Mediteránu během letních měsíců. Zkoušeli jsme různé způsoby nákazy Massilia virem u různých vývojových stádií flebotoma druhu Phlebotomus pernicisous a to infekci: (i) prvního a čtvrtého larválního instaru z larvální potravy, (ii) samic krví a (iii) obou pohlaví cukrem. Infekce larev z potravy a následný transstadiální přenos MASV na dospělce byl neefektivní; celkem se z larev vyvinulo 875 dospělců a pouze tři z nich byli MASV pozitivní. Po nákaze samic z krve jsme sice na počátku získali vysoké procento infikovaných jedinců, nicméně po defekaci došlo k eliminaci infekce a počet infikovaných samic poklesl na 5 z 27. Jako nejúčinnější způsob infekce MASV jsme prokázali nákazu z cukru; 72 % samic (88 ze 122) a 51 % samců (58 ze 113) bylo MASV pozitivní. Navíc, takto infikovaní flebotomové kontaminovali virem cukr, který díky tomu sloužil jako zdroj nákazy pro naivní jedince během následujících 24 hodin;...
|
|
|
Mikrobiota a protista ve střevě flebotomů a komárů
Sovová, Kristina ; Volf, Petr (vedoucí práce) ; Jančářová, Magdaléna (oponent)
Flebotomové a komáři jsou přenašeči leishmanií a plasmodií, což jsou parazitární protista, která způsobují malárii a leishmaniózu. Komáři i flebotomové jsou vystaveni širokému spektru mikroorganismů, které se do jejich těla dostávají kontaktem s okolním prostředím, při příjmu potravy nebo přenosem z jedince na jedince. Larvy získávají mikroorganismy z mikrohabitatu líhnišť, dospělci z cukerné potravy a krve. Naprostá většina bakterií vyskytujících se v mesenteronu střeva dospělých přenašečů patří do skupiny gram negativních. U larválních stádií se však poměr gram pozitivních bakterií ve střevě zvyšuje. Ve střevě přenašeče se bakterie mohou setkávat s parazitárními protisty a ovlivňovat zde jejich vývoj přímo nebo nepřímo. Přímé ovlivnění může být způsobeno například produkcí sekundárních bakteriálních metabolitů. Nepřímo mohou bakterie modulovat kompetenci vektora přes jeho imunitní systém. Klíčová slova: Phlebotomus, Lutzomyia, Leishmania, mikrobiom
|
|
|
Koinfekce leishmanií a gregarin u flebotomů
Jančářová, Magdaléna ; Volf, Petr (vedoucí práce) ; Bilej, Martin (oponent)
Tato diplomová práce se skládá ze dvou vzájemně navazujících částí. První část se zabývá vlivem gregariny Psychodiella sergenti na náchylnost flebotoma Phlebotomus sergenti vůči experimentální nákaze Leishmania tropica. Při srovnání turecké kolonie P. sergenti infikované gregarinou a izraelské kolonie bez gregarin jsme u turecké kolonie prokázali signifikantně vyšší intenzitu infekce L. tropica druhý a desátý den po infekčním sání a rychlejší kolonizaci stomodeální valvy promastigoty. Tyto rozdíly však zřejmě nejsou způsobeny gregarinou, ale vnitrodruhovou variabilitou P. sergenti nebo rozdílným složením střevní mikroflory u obou kolonií. U dvou kolonií P. sergenti původem z Izraele (jedna infikovaná gregarinami, druhá nikoli) jsme žádný signifikantní rozdíl nezaznamenali; kolonie se nelišily v procentu infikovaných samic, intenzitě infekce ani v lokalizaci promastigotů L. tropica. V druhé části mé diplomové práce byly pomocí degenerovaných primerů navržených na základě sekvencí imunitních molekul z Phlebotomus papatasi a Lutzomyia longipalpis a následného klonování produktů pomocí pGEM®-T Easy Vector Systems získány sekvence čtyř imunitních molekul P. sergenti: cekropinu, serpinu, TEPu (thiolesther containing proteins) a PGRP - LB (peptidoglycan recognition protein). Pomocí qPCR byla měřena...
|
host ::
RSS.